王彩凤
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 短小乳杆菌S-层蛋白质的原核表达及其体外粘附性的初步鉴定
- S-层蛋白（S-Layer Protein,SLP）是古细菌和真细菌表面由单分子蛋白或糖蛋白亚单位组成的晶格状结构，它位于细胞壁或细胞膜外层，以非共价键相互作用。通常可使用高浓度变性剂或离解剂（如尿素、盐酸胍、氯化锂、金...
- 王彩凤
- 关键词：S-层蛋白原核表达
- 文献传递
- 嗜酸性乳杆菌MG株S层蛋白的高级结构预测分析及原核表达
- 2013年
- 以嗜酸性乳杆菌MG株slp基因(表达S层蛋白的基因)为材料,应用Genetyx软件推导出其正确的开放阅读框(ORF),并用CPHmodels,Swiss-Model和Swiss-PdbViewer生物软件预测SLP蛋白质的高级结构;此外,构建slp基因的原核表达载体pGEX-slp,经IPTG诱导后,成功表达出重组S层蛋白(S-layer protein,SLP),并进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果表明,使用3种不同的软件预测SLP蛋白质的高级结构,预测结果具有很高的相似性,其中α螺旋占3.33%,线性结构占45%,无规则卷曲占51.67%,平均亲水值为-0.262,亲水氨基酸比例为59.1%;表达载体pGEX-slp在E.coli BL21中经IPTG诱导成功表达出重组SLP蛋白,其GST融合蛋白的大小约为70ku。本研究结果为进一步以SLP为材料的生物制品的制备和应用开发奠定了基础。
- 王敏小琴那日苏王彩凤特尼格尔赵慧格日勒图
- 关键词：原核表达
- 短小乳杆菌重组S-层蛋白质的纯化及其体外黏附性的初步鉴定
- 2013年
- 以本实验室已构建的pMD19T-slp为模板,应用PCR方法亚克隆slp基因,将其定点插入到原核表达载体pGEX-4T-3中,成功构建原核表达载体pGEX-slp,经IPTG诱导获得重组融合蛋白GST-SLP并用LiCl的方法进行纯化。应用SDS-PAGE和Western blot方法对表达产物进行鉴定,应用ELISA方法鉴定重组融合蛋白的体外黏附特性。在大肠埃希菌裂解样品中,SDS-PAGE和Western blot结果均证明分子质量大小约为71ku的重组融合蛋白GST-SLP的存在;ELISA结果提示,该重组融合蛋白在体外能够有效地黏附在乳酸乳球菌NZ9000表面。本试验为S-层蛋白质生物学特性的进一步研究奠定了基础。
- 王彩凤敖敦格日勒小琴特尼格尔赵慧格日勒图
- 关键词：纯化体外
