公共文化服务平台

共 7 条记录，以下是 1-7

全选清除导出

排序方式：

脂肪肝作为供肝的预处理研究现状被引量：1: 2007年; 20世纪80年代以来，临床肝移植有了长足的进步。但供肝的缺乏也变得越来越突出。利用脂肪肝扩大供肝来源是移植界努力尝试的课题。然而，由于脂肪肝与移植术后原发性移植肝无功能（PNF）及早期移植物功能不良（IPF）的发生明显相关，致使许多供肝在获得后又被抛弃。因此，研究脂肪肝作为供肝的可行性，是近几年探讨的热点之一。目前影响脂肪供肝移植的因素主要有两方面：; 王宏博; 关键词：供肝移植脂肪肝预处理移植术后移植肝

过表达解偶联蛋白-2基因加重原代肝细胞急性损伤被引量：1: 2009年; 目的研究解偶联蛋白-2(uncoupling protein-2,UCP-2)基因在肝细胞急性损伤过程中的作用。方法构建小鼠UCP-2基因过表达慢病毒载体;二步胶原酶灌注法分离培养小鼠原代肝细胞;慢病毒感染肝细胞,使肝细胞中UCP-2基因表达上调;荧光显微镜镜检确定感染效率,Real ti me PCR检测UCP-2表达;肿瘤坏死因子-α(TNF-α)作用于病毒感染肝细胞24 h后,检测细胞上清液中谷丙转氨酶(ALT)和乳酸脱氢酶(LDH)水平;碘化丙啶(PI)染色流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡因子Caspase 3的活化。结果Real ti me PCR检测证实目的细胞中UCP-2表达上调;TNF-α作用后病毒感染的实验组上清液中ALT和LDH水平、细胞凋亡率、凋亡因子Caspase 3活化程度均高于对照组(均P<0.05)。结论UCP-2基因过度表达可加重肝细胞急性损伤。; 万赤丹程锐王春友王宏博王帅刘涛; 关键词：解偶联蛋白-2 慢病毒肝细胞损伤

脂肪来源间充质干细胞对大鼠肝移植的免疫调节作用被引量：7: 2007年; 目的探讨大鼠脂肪来源问充质干细胞（MSC）对大鼠肝移植术后急性排斥反应的作用。方法分离、培养sD大鼠MSC，体外混合淋巴细胞培养（MLC）体系中，研究MSC对Wistar大鼠T细胞增殖的抑制作用。以SD与Wistar大鼠为供受体建立肝移植模型。随机分为MSC处理组与空白对照组，术后第7天检测肝功能、血清白细胞介素（IL）-2和白细胞介素（IL）-10水平、肝组织病理形态及肝细胞凋亡。结果体外MLC中，Wistar大鼠T细胞增殖明显受抑，抑制率为48．44％。实验组血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）、IL-2、IL-10分别为（134．2±45．0）、（162．5±30．5）U／L、（30．6±5．4）umol／L、（187．35±18．26）、（193．95±37．62）ug／L；对照组上述指标分别为（355．6±54．3）、（296．4±71．2）U／L、（145．7±28．6）umol／L、（295．73±57．15）、（75．12±11．23）ug/L，两组差异有统计学意义（P〈0．05）；病检提示实验组排斥反应较对照组明显减轻；脱氧脲核苷酸缺口末端标记（TUNEL）检测提示实验组肝细胞凋亡程度明显低于对照组（P〈0．05）。结论供体来源MSC能明显抑制MLC体系中受体源T细胞的增殖，并能显著减轻大鼠肝移植术后急性排斥反应。; 万赤丹程锐王宏博刘涛; 关键词：脂肪组织间充质干细胞肝移植急性排斥反应

抑制解偶联蛋白-2基因表达减轻急性脂肪肝细胞损伤: 2008年; 目的探讨下调解偶联蛋白2（UCP-2）基因的表达对脂肪肝细胞损伤的影响，为存在脂肪变性的供肝提供治疗靶点。方法采用二步胶原酶灌注法分离C57BL／6 J—ob／ob转基因肥胖小鼠的原代脂肪肝细胞，用靶向小鼠UCP-2基因的RNA干扰慢病毒载体感染所获得的脂肪肝细胞，实现对UCP2基因的特异性敲减（实验组），另以空载体感染的脂肪肝细胞为对照。荧光显微镜镜检确定感染效率，实时聚合酶链反应鉴定敲减效果。以肿瘤坏死因子-α（TNF-α）作用于感染后的肝细胞，24h后以碘化丙啶染色。流式细胞仪检测细胞凋亡情况；Western印迹法检测凋亡蛋白酶-3（Caspase-3）的活化。结果UCP2基因表达被有效抑制，UCP-2基因的敲减率约为75％。实验组的肝细胞凋亡率为（4．97±0．25）％，明显低于对照组的（21．13±1．28）%（P〈0．05），其Caspase-3的活化程度也低于对照组。结论抑制UCP-2基因表达能减轻脂肪肝细胞的损伤。; 程锐王春友刘涛王宏博王帅万赤丹; 关键词：解偶联蛋白-2 基因表达脂肪肝细胞死亡

解偶联蛋白-2 RNA干扰慢病毒载体的构建被引量：1: 2008年; 目的:构建解偶联蛋白-2(UCP-2)基因的RNA干扰慢病毒载体。方法:根据RNA干扰序列设计原则,针对UCP-2mRNA(NM_011671)设计3个RNA干扰靶点序列,合成含干扰序列的DNA双链,酶切后连入慢病毒转移质粒pGCL-GFP中。连接产物转化感受态细胞,所获克隆行PCR鉴定和序列测定。构建成功的RNA干扰质粒与UCP-2表达质粒共转染293T细胞,荧光显微镜下观测转染效果,Western blot检测UCP-2蛋白表达,筛选出干扰效果最好RNA干扰质粒。将该质粒与两种辅助包装原件载体质粒pHelper1.0(gag/pol元件)载体,Helper2.0(VSVG元件)共转染293T细胞包装成慢病毒并检测滴度。结果:PCR和测序结果显示针对3个靶点的RNA干扰质粒均构建成功;通过Westernblot检测获得最优干扰靶点,并成功包装成滴度为5×108TU/ml的慢病毒。结论:成功构建可供感染的解偶联蛋白-2RNA干扰慢病毒载体,为后续靶向抑制该基因表达以提高脂肪肝移植成功率的研究奠定物质基础。; 万赤丹程锐王春友王宏博王帅刘涛; 关键词：解偶联蛋白-2 RNA干扰慢病毒

解偶联蛋白2过度表达对LO2肝细胞缺血再灌注损伤的影响被引量：3: 2008年; 目的探讨解偶联蛋白-2(uncoupling protein-2,UCP-2)的过度表达对人LO2肝细胞系缺血再灌注损伤的影响及可能机制。方法构建UCP-2真核表达质粒,转染LO2肝细胞并筛选出阳性克隆进行鉴定。将转染重组质粒组和对照组肝细胞进行缺血再灌注处理后,采用原位Hoechest/PI染色,荧光显微镜观察细胞损伤情况,AnnexinⅤ/PI双标流式细胞仪检测细胞坏死率、凋亡率和存活率,并检测细胞内三磷酸腺苷(ATP)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)水平。结果转染重组质粒组细胞在缺血再灌注后遭受的损伤显著重于对照组,转染重组质粒组细胞内ATP水平显著低于对照组,细胞坏死率、凋亡率、存活率与对照组细胞比较差异均有显著性意义(P<0.05)。结论肝细胞内UCP-2的过度表达加剧了缺血再灌注后细胞内ATP的耗竭,导致细胞遭受更为严重的损伤。; 万赤丹王宏博冯贤松刘涛程锐勾善淼; 关键词：解偶联蛋白-2 缺血再灌注损伤肝细胞

调控解偶联蛋白2基因的表达对肝细胞缺血后耐受能力的影响: 目的: 探讨靶向调控解偶联蛋白-2(uncoupling protein 2，UCP-2)基因的表达对肝细胞耐受缺血再灌注损伤能力的影响。方法: 构建针对UCP-2基因的正义及干扰质粒siRNA，分别转染至正...; 王宏博; 关键词：脂肪肝肝细胞缺血再灌注损伤基因表达; 文献传递

全选清除导出

共1页<1>

王宏博

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

王宏博

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈