王会文 作品数:12 被引量:81 H指数:5 供职机构: 河北大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 河北省自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 化学工程 自动化与计算机技术 更多>>
SDS一步法制备PCR模板 被引量:22 2002年 为了简化PCR模板DNA的制备 ,选取 4种实验材料 ,采用SDS一步法制备PCR模板 .经PCR扩增 ,获得同常规方法制备的模板相近的实验结果 .实现了“一管一步”制备模板DNA ,从而开辟了一种快速、简易。 王会文 吴琛 赵晓瑜 王建辉 张瑞英 王彦芳关键词:PCR DNA抽提 SDS 蚯蚓纤溶酶基因在甲醇酵母中的克隆 蚯蚓纤溶酶(Earthworm Fibrinolytic Enzymes,EFE)是从蚯蚓体内提取的一类纤维蛋白水解酶.它在治疗脑血栓、半身不遂、心肌梗塞等血栓类疾病方面具有效果快、疗效好等优点,目前市场已有多种以EFE... 王会文 赵晓瑜 静天玉文献传递 甲醇酵母PEG和电转化法 被引量:1 2004年 Electricporation and PEG transformation were used to transform methylotrophic yeast respectively . The transforming rate(DNA) of electroporation method was 400 transformants/μg, while the PEG method was only 0~20 transformants /μg. 李亚东 王会文 赵晓瑜关键词:甲醇酵母 电转化 电穿孔 PEG 电击法 一种简便经济制备银染序列分析模板质粒DNA的方法 1999年 用改良碱裂解法提取的质粒DNA,经RNA酶消化后做银染列分析的模板,所得测序结果清晰、准确,从而使银染法模板的制备更加经济简便。 王会文 赵晓瑜 刘建荣 王彦芳 静天玉关键词:质粒DNA RNA酶 人La多肽融合蛋白在E.coli中的表达 被引量:3 2000年 目的 构建在E .coli中表达人La多肽的质粒。方法以人脾cDNA为模板 ,通过PCR获得La多肽 (全长 )的DNA片段。将此片段利用双酶切定向克隆到MBP(麦芽糖结合蛋白 )融合系统的载体pMALTM c中 ,表达可溶性融合蛋白 ,并通过亲和层析予以纯化。结果免疫印迹实验 (IBT)证明 ,表达的融合蛋白具有La抗原多肽的特异性 ,而敏感性超过生化制备的ENA制品。 赵晓瑜 刘建荣 静天玉 王会文 王彦芳 王锡民关键词:克隆 融合蛋白 聚合酶链反应 Interent生命科学中文站点导航 2000年 本文主要介绍Interent上与生命科学相关的主要中文站点的内容及网址。分为科研信息网、数据检索的网站、中科院及其下属研究所、有关生命科学的电子出版物四个方面进行介绍。从而为生命科学研究工作者使用Interent做网上导航。 王会文关键词:INTERNET 生命科学 网址 甲醇酵母表达系统 被引量:13 2000年 王会文 赵晓瑜关键词:甲醇酵母 磁性蚯蚓纤溶酶脂质体的制备 被引量:8 1999年 用超声法将磁流体和蚯蚓纤溶酶同时包入脂质体中,形成一种具有磁导向性能的溶栓药物──磁性蚯蚓纤溶酶脂质体。纤溶酶包封率达80%以上。在磁场作用下该脂质体定向聚集在血栓周围,脂质体破坏后释放出来的纤溶酶可以将血栓完全溶解。还介绍了一种简便、快速制备磁流体的方法。本系统对于制备水溶性药物的磁性脂质体可能有一定通用性。 静天玉 王会文 赵晓瑜关键词:脂质体 磁流体 蚯蚓 纤溶酶 水溶性药物 微量超氧化物歧化酶邻苯三酚/Vc测活法 被引量:16 2000年 在Vc终止剂法的基础上 ,邻苯三酚的加入量由终浓度2mmol/L降低为0.05mmol/L ,并提高反应溶液的 pH值至8.6 ,从而提高了SOD活力测定的灵敏度。使用本方法在SOD样品最大加入量1mL时 ,最低可检测到3.3×10-8 mol/(s·mL)SOD ,比Vc终止剂法灵敏度提高4倍。 王会文 刘建荣 静天玉 赵晓瑜关键词:超氧化物歧化酶 邻苯三酚 蚯蚓纤溶酶在大肠杆菌中的克隆与表达 被引量:17 2002年 根据蚯蚓纤溶酶最佳组分的N -末端氨基酸序列设计简并引物 ,以蚯蚓cDNA为模板 ,获得该组分蛋白质的部分编码序列 (AF4 32 2 2 4 ,GenBank登陆号 ) .BLAST相似性分析表明 ,该序列与U 2 5 6 43和U2 5 6 48的部分序列相似性达 91% ,根据 5’和 3’末端保守序列设计引物 ,经PCR获得全长cDNA编码序列 .将该序列插入 pTBY - 11质粒 ,转化大肠杆菌 ,表达蛋白以包含体形式存在 . 赵晓瑜 静天玉 王彦芳 王会文 李亚东关键词:蚯蚓纤溶酶 分子克隆 基因表达 大肠杆菌 基因克隆