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鸡传染性支气管炎病毒HN99株S1基因的克隆与序列测定被引量：4: 2004年; 根据基因库中收录的鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)S1基因的序列 ,设计了一对引物并采用RT -PCR扩增了鸡传染性支气管炎病毒HN99株的S1基因 ,扩增产物进行了克隆、测序 ,获得了IBVHN99株S1基因片段 ,其大小为1 739bp(含前导序列 ) ,其核苷酸序列与H1 2 0、H52、M41、Gray、Holte的S1基因核苷酸序列同源性较低 ,分别为 79.1 %,79.2 %,77.3%,77.8%,79 .4%,有大量的点突变并伴有基因插入和缺失 ;IBVHN99株的S1基因推导的氨基酸与H1 2 0、H52、M41、Gray、Holte株氨基酸的同源性分别为80 .1 %,79.9%,79.5%,78.5%,78.5%,经S1基因系统进化分析 ,提示IBVHN99株与其它各毒株的亲缘关系较远。; 陈红英崔保安曹素芳牛春玲范成英; 关键词：传染性支气管炎病毒 S1基因基因克隆

一步法RT-PCR克隆鸡IL-18基因: 根据GenBank上已发表的鸡IL-18基因核苷酸序列,设计合成了一对扩增跨幅约600bp的引物,并提取鸡脾细胞的总RNA,进行一步法RT-PCR扩增,即将反转录和PCR反应在一个PCR反应管中一次性完成;将PCR扩增片...; 牛春玲崔保安陈红英金喜新刘占通吴建宇; 关键词：一步法RT-PCR 基因克隆核苷酸序列基因工程; 文献传递

猪伪狂犬病病毒单抗双夹心ELISA的构建被引量：11: 2004年; 建立了检测猪伪狂犬病病毒(Pseudorabiesvirus,PRV)的单克隆抗体双夹心酶联免疫吸附试验(Enzyme linkedimmunosor bentassay,ELISA)方法,为该病的快速诊断奠定了基础.作者对其组装条件进行了筛选,认为兔抗PRVIgG最佳包被质量浓度为4.59mg·L-1;抗PRV的单克隆抗体(Monoclonalantibodies,McAb)的最佳质量浓度为6.45mg·L-1;最佳封闭剂为10g·L-1BSA(牛血清白蛋白),封闭时间为60min,制定了科学的结果判定标准,最低病毒检出量为200μg·L-1.与病毒分离、动物试验和中和试验相比较,该方法特异、灵敏、可靠、方便.; 祁小乐崔保安牛春玲王莉娟刘占通; 关键词：伪狂犬病病毒双夹心ELISA 单克隆抗体

鸡传染性支气管炎病毒HN99株S1基因的序列分析: 为了解鸡传染性支气管炎病毒HN99株的基因型,采用RT-PCR扩增了鸡传染性支气管炎病毒HN99株的S1基因,连接到pGEM-T Easy载体上,克隆后进行了核苷酸序列和氨基酸序列分析,结果显示HN99株S1基因全长为1...; 陈红英崔保安李平牛春玲金喜新刘占通; 关键词：鸡传染性支气管炎病毒 S1基因核酸序列; 文献传递

鸡IL-18基因的克隆、表达及其生物学活性检测: 家禽传染性疾病是养禽业最大的威胁,给养殖业造成严重经济损失。应用传统免疫预防手段仍存在一些问题,如弱毒疫苗的潜在安全问题;灭活疫苗虽然安全有效,但免疫效力尤其细胞免疫作用受限制;基因工程亚单位疫苗和DNA疫苗等虽具有应用...; 牛春玲; 关键词：RT-PCR 原核表达包涵体生物学活性; 文献传递

ELISA在猪伪狂犬病诊断中的应用被引量：11: 2004年; 近年来 ,猪伪狂犬病不断传播蔓延 ,给世界养猪业带来了巨大危害 ,因此开发特异性强、敏感性高、简便、快速、能区别疫苗毒和野毒、能检出潜伏感染的诊断方法是防制该病的关键之一。EL ISA方法具有特异、敏感、快速、稳定等特点 ,为广大兽医工作者所关注。目前 ,国内外关于 EL ISA在猪伪狂犬病诊断中的应用方面的研究已有不少 ,已有试剂盒出售。笔者综述了应用于猪伪狂犬病诊断的多种 EL ISA方法 ,如直接 EL ISA、间接 EL ISA、竞争 EL ISA、斑点EL ISA、SPA-EL ISA、双抗体夹心 EL ISA、单抗夹心 L AB-EL ISA、血清学鉴别 EL ISA等。这些方法中 ,有测病毒的 ,有测抗体的 ;有单抗介导的 ,有多抗介导的 ;有的还引入了 SPA和 L AB;有的以分子生物学为基础并能够鉴别疫苗毒和野毒。此外 ,还总结了目前所用 EL ISA诊断方法的优点和缺点。; 牛春玲祁小乐崔保安王鑫; 关键词：ELISA 伪狂犬病酶联免疫吸附试验

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牛春玲