潘俊敏
- 作品数:38 被引量:37H指数:3
- 供职机构:清华大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划清华大学自主科研计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生经济管理农业科学更多>>
- SMART技术构建衣藻细胞的酵母双杂交文库被引量:3
- 2011年
- 衣藻是用来研究植物光合作用和动物纤毛常用的模式生物。为了研究蛋白质之间的相互作用,利用SMART技术构建了衣藻的酵母双杂交文库。使用Trizol试剂提取鞭毛再生过程和光周期培养的细胞进入分裂前的衣藻细胞的总RNA,经过Oligotex纯化得到mRNA;应用SMART技术和LD-PCR合成双链cDNA,经过CHROMA SPIN TE-400柱子去除短片段的cDNA;cDNA和线性化载体pGADT7-Rec共转化酵母Y187构建酵母双杂交文库。库容达到3.0×106 CFU,重组率为70%,插入片段平均长度为0.6 kb。以上结果说明该文库质量较好,能够通过筛选文库得到与目的蛋白互相作用的蛋白质,为寻找蛋白质的作用伴侣打下基础。
- 孙银行潘俊敏
- 关键词:细胞周期衣藻SMART技术
- 微管解聚驱动蛋白Kinesin-13的研究进展与展望被引量:3
- 2015年
- 微管是细胞骨架的重要组成成分,其在细胞内的动态调节关系着细胞正常生理功能的发挥和维持.目前发现多种参与细胞内微管组装与解聚调控的蛋白,其中发挥微管解聚功能的Kinesin-13驱动蛋白家族被广泛地研究,该蛋白具有控制有丝分裂,调控纤毛组装与解聚和神经轴突发育与修复等功能.本文主要对Kinesin-13微管解聚机制,以及在主要的模式生物中生物学功能与调控机制进行比较与分析.
- 王亮杨丰源陈慧怡潘俊敏
- 关键词:微管解聚有丝分裂纤毛
- N-糖基化修饰在莱茵衣藻鞭毛膜蛋白的运输及功能调节中的作用
- 在真核生物中有50%的蛋白质发生了糖基化修饰。其中,N-糖基化是糖蛋白的主要修饰形式,不仅影响蛋白质的空间构象、生物活性、运输和定位,而且在分子识别、信号转导等过程中发挥着重要作用。
- 徐南南Michael Hippler潘俊敏黄开耀
- 关键词:纤毛配子
- 揭开蛋白质聚集及其翻译后异常修饰与退行性疾病的“面纱”
- 2017年
- 神经退行性疾病,包括一系列受害组织或器官的结构或功能逐步恶化的疾病,如帕金森症(PD)、阿尔茨海默症(AD)、传染性海绵状脑病(TSE)、2型糖尿病和额颞叶痴呆(FTD)。
- 罗施中周兵潘俊敏
- 关键词:神经退行性疾病传染性海绵状脑病翻译阿尔茨海默症
- 钙离子依赖性蛋白激酶调控纤毛的组装过程
- 动物细胞的初级纤毛有感知信号和运动等功能,纤毛结构和功能异常引起很多。肾脏病,多指症,呼吸道疾病,肥胖症及生殖不育症等。模式生物——衣藻,具有和动物纤毛相似的纤毛结构和蛋白组成,因此我们利用衣藻研究纤毛的组装机理。我们的...
- 梁银文潘俊敏
- 文献传递
- 钙离子依赖的蛋白质激酶调控马达蛋白的活性及货物装载
- 纤毛对细胞信号传导和细胞运动起着重要的作用.纤毛的缺陷和多种人体缺陷或疾病相关,如肾囊肿,发育异常,肥胖,智力迟滞等.纤毛的组装和信号传导依赖'鞭毛内运输'(IFT).IFT是在胞体和纤毛顶端之间的一种双向的蛋白质运输过...
- 梁银文厐雨浓吴琼胡长峰韩雪许译声邓海腾潘俊敏
- 钙离子依赖的蛋白质激酶调控马达蛋白的活性及货物装载
- <正>纤毛对细胞信号传导和细胞运动起着重要的作用。纤毛的缺陷和多种人体缺陷或疾病相关,如肾囊肿,发育异常,肥胖,智力迟滞等。纤毛的组装和信号传导依赖"鞭毛内运输"(IFT)。IFT是在胞体和纤毛顶端之间的一种双向的蛋白质...
- 梁银文厐雨浓吴琼胡长峰韩雪许译声邓海腾潘俊敏
- 文献传递
- 衣藻蛋白激酶CALK在纤毛调控过程中的修饰和作用
- 曹木青潘俊敏
- 关键词:纤毛激酶
- CrPP2C蛋白影响衣藻细胞鞭毛过渡区结构
- 2016年
- 目的:在莱茵衣藻细胞中构建并筛选鞭毛组装缺陷突变体,克隆缺陷基因,探索其对鞭毛组装的影响。方法:使用带有巴龙霉素(Paromomycin)抗性的基因片段随机插入衣藻细胞基因组中,通过性状筛选和基因序列分析获得与Cr PP2C(Chlamydomonas reinhardtii type 2C protein phosphatase)基因相关的鞭毛异常突变体,根据突变体基本生物学性状和生化分析对Cr PP2C基因的功能进行分析。结果:采用电转法成功获得衣藻细胞鞭毛缺陷相关突变体,部分细胞具有短鞭毛,部分细胞则不具有鞭毛;通过RESDA-PCR(restriction enzyme site-directed amplification PCR)对突变体基因序列分析,鞭毛缺陷性状由Cr PP2C基因遭到破坏导致;把含有完整Cr PP2C基因的重组质粒通过电转法导入突变体后,其鞭毛几乎恢复为野生型长度,并可检测到PP2C-HA融合蛋白的表达;观察鞭毛再生,突变体鞭毛只能再生为原有长度;使用药物处理使鞭毛缩短,突变体鞭毛能正常解聚;电镜检测突变体的鞭毛显微结构,发现过渡区的Y形结构缺陷。结论:Cr PP2C基因的破坏导致鞭毛过渡区结构缺失,影响鞭毛组装过程,不组装鞭毛或组装短鞭毛。
- 何炜潘俊敏
- 关键词:莱茵衣藻
- 通过羟基脲处理实现衣藻细胞周期同步化
- 真核生物的鞭毛(或者纤毛)具有参与调控细胞周期的作用,要研究纤毛在细胞分裂中的作用,获得细胞周期进程同步化的细胞是必不可少的。作为纤毛研究的一种模式生物,衣藻的同步化主要是通过光周期调节实现的,而通过药物处理的方法尚未见...
- 李桂华潘俊敏
- 关键词:衣藻细胞周期同步化羟基脲
- 文献传递