温淑平
- 作品数：10 被引量：6H指数：2
- 供职机构：福州大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学化学工程农业科学医药卫生更多>>
- 卡那霉素B工程菌的构建及其发酵特性研究被引量：2
- 2017年
- 研究高产卡那霉素B产业化工程菌的构建.以主产氨甲酰卡那霉素B工程菌——黑暗链霉菌S.tenebrarius312为出发菌株,进一步敲除氨甲酰磷酸转移酶基因tobZ,获得直接产卡那霉素B的工程菌ST314.对工程菌ST314的生物合成潜力进行研究,在200L发酵罐上进行放大实验,测定各参数,并绘制发酵代谢曲线.结果表明,该菌株遗传特性稳定,产抗能力得到有效恢复,提高幅度接近2倍;该工程菌产卡那霉素B的能力达到4500 U/mL.黑暗链霉菌ST314的研究可以向产业化生产转移.
- 陈晖温淑平洪文荣
- 关键词：黑暗链霉菌基因敲除发酵特性
- 高产氨甲酰妥布霉素基因工程菌的构建
- 以安普霉素生物合成基因aprd为靶标,克隆其上下游序列作为同源交换臂,构建重组质粒pFJ401,利用接合转移技术将其导入S.tenebrarius Tt-49,获得一株工程菌TX302（Z△aprd）。代谢产物分析表明,...
- 肖剑萍温淑平洪文荣
- 关键词：黑暗链霉菌安普霉素基因工程
- 文献传递
- 妥布霉素糖基转移酶基因tobM2的研究
- 2016年
- 为探索妥布霉素生物合成过程中糖基转移的作用,对糖基转移酶基因tobM2进行了阻断研究.以妥布霉素生物合成基因簇为模板,构建了同源重组质粒pMB4,通过接合转移将质粒pMB4导入黑暗链霉菌Tt-49,然后利用红霉素抗性筛选并经PCR验证,获得了一株基因tobM2被阻断的工程菌TW402.发酵及代谢产物分析结果表明:工程菌总效价略有下降,约为出发菌株的85%.TLC检测与质谱分析显示,工程菌TW402主产安普霉素,并积累中间产物尼泊拉胺.TobM2转化尼泊拉胺生成妥布霉素,tobM2基因的缺失阻断了妥布霉素的生物合成,获得一株主产安普霉素工程菌.
- 温淑平陈晖汪洋洪文荣
- 关键词：黑暗链霉菌妥布霉素基因阻断
- 小单孢菌—链霉菌功能基因组合研究
- 黑暗链霉菌Tt-49主要产安普霉素、妥布霉素和氨甲酰妥布霉素等氨基糖苷类抗生素。采用基因敲除技术,获得单组分氨甲酰妥布霉素工程菌和安普霉素工程菌。在此基础上,插入来自小单孢菌中C3',4'-双脱羟基酶基因或甲基化酶基因,...
- 温淑平
- 关键词：黑暗链霉菌小单孢菌基因组合发酵特性
- 文献传递
- aprK基因敲除的氨甲酰妥布霉素工程菌的构建被引量：2
- 2013年
- 以温敏型穿梭质粒pKC1139为基础,克隆安普霉素辛二糖合成酶基因aprK上下游序列作为同源交换臂,构建用于敲除aprK的重组质粒pBK5。pBK5转化E.coli ET12567后经接合转移导入黑暗链霉菌Tt-49,得到单交换菌株ST315。ST315经松弛传代后通过影印培养与PCR筛选得到aprK阻断突变株ST316。ST316发酵效价约1 500 ug/mL,发酵产物经TLC分析,发现安普霉素的生物合成被阻断,得到了一株主要产氨甲酰妥布霉素的工程菌。
- 李辉温淑平洪文荣
- 关键词：黑暗链霉菌安普霉素基因工程
- 单组分妥布霉素工程菌的构建被引量：2
- 2014年
- 目的阻断黑暗链霉菌中安普霉素和氨甲酰妥布霉素的合成,构建主产妥布霉素工程菌。方法以安普霉素生物合成基因apr J为靶标,克隆其上下游序列作为同源交换臂,构建重组质粒p XJ401,利用接合转移技术将其导入黑暗链霉菌Tt-49,获得工程菌TX302,并在此基础上敲除氨甲酰基转移酶基因tob Z,获得工程菌TX308。采用MS法,检测工程菌次级代谢产物的变化。结果 TX302主产氨甲酰妥布霉素,未检测到安普霉素。TX308不再合成氨甲酰妥布霉素,产物只检测到妥布霉素。结论磷酸变位酶基因apr J是安普霉素生物合成的关键基因,敲除后能有效阻断安普霉素的合成,工程菌TX308大量积累妥布霉素,不再合成安普霉素和氨甲酰妥布霉素,具有重要的产业化价值。
- 肖剑萍温淑平洪文荣
- 关键词：黑暗链霉菌安普霉素妥布霉素工程菌
- 卡那霉素B工程菌的构建及其发酵特性研究
- 高产卡那霉素B产业化工程菌的构建.以主产氨甲酰卡那霉素B工程菌——黑暗链霉菌S.tenebrari us312为出发菌株,进一步敲除氨甲酰磷酸转移酶基因tobZ.获得直接产卡那霉素B的工程菌ST314.对工程菌ST314...
- 陈晖温淑平洪文荣
- 关键词：抗菌素黑暗链霉菌基因敲除发酵工艺
- 庆大霉素生物合成基因genB4的研究
- 2015年
- 以庆大霉素生物合成基因簇为模版,构建了genB4基因阻断质粒pGB403.经接合转移导入绛红色小单孢菌G1008,得到一株genB4基因缺失工程菌GB4408.对菌株GB4408的发酵产物进行了TLC、HPLC和MS分析,结果表明GB4408不再合成庆大霉素C族组分,而是积累中间代谢产物G418、西索霉素和威大霉素,阻断了从西索霉素到庆大霉素C1a的转化以及从威大霉素到庆大霉素C2的转化,这可能是genB4基因参与了庆大霉素绛红糖胺C4′和C5′的双脱氢作用.据此推论,在菌株GbK(△genK)基础上敲除了genB4基因,并成功获得一株主产西索霉素的工程菌GbKB4,进一步验证了genB4的功能.
- 温淑平林强洪文荣
- 一株降解拟除虫菊酯类农药的烟色曲霉菌
- 本发明提供了一株降解拟除虫菊酯类农药残留的烟色曲霉（Aspergillusfumigatus）菌株WJ-1，该菌株能够同时降解氯氟氰菊酯和氯氰菊酯两种拟除虫菊酯类农药。该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中...
- 吕暾吴洁陈灵艳温淑平林素颖
- 文献传递
- 一株降解拟除虫菊酯类农药的烟色曲霉菌
- 本发明提供了一株降解拟除虫菊酯类农药残留的烟色曲霉（<I>Aspergillusfumigatus</I>）菌株WJ-1，该菌株能够同时降解氯氟氰菊酯和氯氰菊酯两种拟除虫菊酯类农药。该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员...
- 吕暾吴洁陈灵艳温淑平林素颖
