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miR-146b-5p异常表达对胰腺癌细胞生物学特性的影响: 2012年; MicroRNAs（miRNAs）是由一类内源性的非编码RNA组成，长度大约20—24nt，来源于长的前体pri-miRNA和pre—miRNA。在多细胞生物体中，它通过不完全碱基互补配对的方式识别靶位点，转录后调控基因的表达。尽管过去的几年中通过基因芯片筛查肿瘤特异性miRNA有很大的进展，但miRNA影响肿瘤形成和发展的机制仍不清楚。本研究检测6株胰腺癌细胞miR-146b-5p的表达，观察其对胰腺癌细胞生物学特性的影响。; 林凡王敏洪晓泉周伟王欣秦仁义; 关键词：细胞生物学特性胰腺癌细胞 MIRNA 非编码RNA 肿瘤特异性调控基因

MAP3K10在胰腺癌中的表达及其意义: 2011年; 目的探讨丝裂原活化蛋白3激酶10(MAP3K10)在胰腺癌中的表达。方法应用免疫组织化学染色技术,Western blot及定量RT-PCR检测MAP3K10在胰腺癌及癌旁组织中的表达。结果 (1)免疫组化染色阳性细胞计数显示MAP3K10在胰腺癌组织中的阳性细胞数(100%呈强阳性)明显多于癌旁组织(仅25%呈弱阳性)(P<0.05);(2)Western blot检测显示,在91.7%的胰腺癌组织中MPA3K10蛋白的表达量高于癌旁组织;(3)qRT-PCR检测显示,MAP3 K1 0 mRNA在胰腺癌及癌旁组织中均有表达,但前者的表达水平明显高于后者(P<0.0 1)。结论 MAP3K10在胰腺癌中存在异常激活,可能在胰腺癌的发生发展中起重要作用,有望成为胰腺癌新的治疗靶点。; 林凡王敏洪晓泉李旭王欣秦仁义

EGFR、ADAM9在胰腺癌Panc-1微球体细胞中表达的研究: 目的通过无血清培养法体外培养胰腺癌微球体细胞,验证其肿瘤干细胞的富集效果,检测EGFR和ADAM9在胰腺癌微球体细胞中的表达。方法运用无血清条件培养基,悬浮培养胰腺癌Panc-1细胞,并连续传代培养。将培养好的...; 洪晓泉; 关键词：胰腺癌干细胞 EGFR ADAM9; 文献传递

MiR-590-3p在胰腺癌干细胞中的表达被引量：1: 2011年; 目的应用无血清培养基分离胰腺癌干细胞，检测其miR-590—3p的表达。方法运用无血清培养基克隆培养ASPC-1、PANCl细胞，检测其单克隆形成、分化及细胞周期、半数抑制浓度（Ic。）和表面标记物CD24^＋、CD44^＋表达。实时定量PCR法检测细胞miR-590-3p的表达。结果经无血清培养基培养，（0．94±0．53）％的ASPC-1细胞和（0．57±0．12）％的PANCl细胞能存活，呈克隆球样悬浮生长，并可以在体外连续传代。加入血清后细胞球又重新贴壁生长。ASPC-1细胞球G0／G1期比例和CD24^＋、CD44^＋、CD2424^＋CD44^＋的细胞比例及IC50分别为（75．3±5．4）％、0．96％-2．01％、27．52％-34．47％、0．35％-0．44％和（224．37±5．71）μg／ml，均显著高于亲本细胞的（43．7±3．8）％、0．38％～0．42％、17．65％～18．25％、0．05％～0．08％、（11．43±2．10）仙g,／ml（P值均〈0．05）。PANCl细胞球G0／Gl期比例和CD24^＋、CD44^＋、CD24^＋CD44^＋的细胞比例及IC50分别为（80．1±4．7）％、5．31％-9．84％、72．05％～93．06％、4．91％-5．21％、（296．58±4．27）μg／ml，均显著高于亲本细胞的（46．1±5．3）％、4．09％～4．97％、47．71％-55．66％、1．48％～2．63％、（26．17±3．81）μg／ml（P值均〈0．05）。ASPC-1、PANCl细胞球miR-590-3p表达分别是亲本细胞的4．67和4．52倍。结论应用无血清培养基可以从ASPC-1、PANCl细胞系中分离出具有干细胞特性的胰腺癌细胞球，其miR-590-3p表达上调，该基因可能是胰腺癌干细胞特性维持的关键基因。; 宫伟强秦仁义王敏田锐朱峰石程剑张志发李旭洪晓泉; 关键词：胰腺肿瘤肿瘤干细胞微RNAS 细胞球无血清培养基

增强miR-146b-3p表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：1: 2011年; 目的探讨增强miR-146b-3p表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法 Real time PCR检测miR-146b-3p在6种人胰腺癌细胞系(MIA PaCa-2、BxPC-3、AsPC-1、PANC-1、SW1990、PC-3)和手术切除的12对胰腺癌/癌旁组织中的表达。将Pre-miR-hsa-miR-146b-3p Precursor转染MIA PaCa-2细胞,Real time PCR检测转染后miR-146b-3p的表达变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-8的表达变化。结果与正常胰腺组织相比,miR-146b-3p在6种胰腺癌细胞系中均呈低表达,以MIA PaCa-2细胞最为明显;12对胰腺组织中,癌组织miR-146b-3p表达水平均低于癌旁组织。同阴性对照组比较,转染前体组的MIA PaCa-2细胞,miR-146b-3p表达增强383.25倍,细胞增殖能力下降,细胞凋亡率增加,蛋白Bcl-2表达降低(50.0%),Bax表达升高(4.29倍)。结论 miR-146b-3p在胰腺癌细胞系和癌组织中低表达;上调胰腺癌细胞MIA PaCa-2中miR-146b-3p的表达,能够抑制增殖和诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2表达,上调Bax的表达有关。; 林凡王欣俞亚红王敏洪晓泉; 关键词：胰腺癌细胞增殖细胞凋亡

壶腹部周围癌的早期诊断被引量：3: 2009年; 目的探索有效的壶腹部周围癌的早期诊断方法。方法回顾性分析2005年7月至2009年7月收治的32例无明显症状的早期壶腹部周围癌的临床资料。结果本组32例均在手术后痊愈出院。肿瘤学定量检测中CA19-9升高最为显著,与参考值比较,差异有统计学意义(P<0.05)。CEA和CA125的增高幅度相对较小,与参考值相较,差异无统计学意义(P>0.05)。但在胰头癌、胆总管远端肿瘤和十二指肠乳头癌病例间比较,三者间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论对于仅有胆总管增宽和轻度黄疸的壶腹部周围癌病人,多排螺旋CT薄层扫描、MRI和MRCP检查可以弥补B型超声的不足,肿瘤学标记物的定量检查可以提高诊断的准确性。; 王欣朱峰胡道予王敏洪晓泉秦仁义; 关键词：肝胰管壶腹肿瘤

EGFR及ADAM9在胰腺癌干细胞与分化细胞中的表达及意义被引量：4: 2011年; 目的通过微球体培养富集胰腺癌干细胞,检测其表皮生长因子受体（EGFR）和去整合素-金属蛋白酶9（ADAM9）的表达,并探讨其意义.方法运用无血清条件培养基悬浮培养胰腺癌PANC1细胞,并连续传代培养.将部分微球体接种于含血清及胶原底物的培养基中进行分化诱导.收集微球体细胞及分化细胞,流式细胞仪检测侧群（SP）细胞比例;实时PCR及蛋白质印迹法检测细胞EGFR、ADAM9 mRNA和蛋白的表达.结果成功培养出胰腺癌PANC1细胞微球体,并能在体外连续传代.微球体细胞分化诱导后能重新贴壁生长.微球体细胞和分化细胞中SP细胞比例分别为（5.40±0.38）%和（2.80±0.42）%,两者差异具有统计学意义（P＜0.05）.微球体细胞与分化细胞相比,EGFR及ADAM9 mRNA表达分别上调约2.5和3.0倍（P＜0.05）;微球体细胞EGFR及ADAM9蛋白相对表达量分别为0.90±0.09和0.64±0.07,显著高于分化细胞的0.62±0.11和0.48±0.09（P＜0.05）.结论微球体培养能富集胰腺癌干细胞,ADAM9可能通过EGFR信号通路在胰腺癌的发生、发展中起重要作用.; 洪晓泉林凡王敏王欣秦仁义; 关键词：胰腺肿瘤干细胞

miR-590-3p在胰腺癌干细胞中的表达: 目的：应用无血清培养基分离胰腺癌干细胞，检测其miR-590-3p的表达。方法：运用无血清培养基克隆培养ASPC-1，PANC-1细胞，检测其单克隆形成、自我更新及分化、细胞周期、耐药和表面标记物CD24/C...; 宫伟强秦仁义王敏田锐朱峰石程剑张志发李旭洪晓泉; 关键词：胰腺肿瘤细胞培养基因表达病理细胞学; 文献传递

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洪晓泉

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