毛忠贵
- 作品数：246 被引量：1,361H指数：19
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金江苏省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学环境科学与工程更多>>
- 辅助能量物质柠檬酸促进ε-聚赖氨酸的合成
- 2012年
- 为提高ε-聚赖氨酸(ε-PL)合成能力,考察了柠檬酸对Streptomyces sp.M-Z18菌体生长和ε-PL合成的影响。研究发现,柠檬酸作为辅助能量物质,对ε-PL发酵过程影响显著。通过对柠檬酸添加时间、添加量和pH值的优化,确定了最佳柠檬酸添加方式,结合补料-分批发酵工艺,显著提高了ε-PL的产量。实验结果表明,在5L发酵罐中,维持pH为3.8,初始柠檬酸添加量为20 g/L时,分批发酵ε-PL的产量达到9.50 g/L,产率达到4.40 g/(L.d),较未添加柠檬酸发酵分别提高了46.4%和48.1%。采用添加柠檬酸的补料-分批发酵工艺,发酵168 h后ε-PL的产量达到22.89 g/L,是分批发酵的2.41倍。
- 任喜东陈旭升董难李树李凤赵福林唐蕾毛忠贵
- 关键词：Ε-聚赖氨酸STREPTOMYCES柠檬酸
- 燃料乙醇制造的“零能耗零污染”趋势被引量：27
- 2008年
- 酒精蒸馏废液有充足的非淀粉生物质可供沼气转化,沼液营养丰富可作酵母发酵工艺用水。通过酒精高浓度发酵、沼气高效转化、沼气热电联产、差压蒸馏、环形过程工艺等产能、节能、无废技术的研发和集成,将最终完成木薯原料燃料酒精制造向"零能耗、零污染"生产技术的转型。
- 毛忠贵张建华
- 关键词：酒精发酵木薯沼气发酵零能耗零污染
- 极端嗜热菌海栖热袍菌α-葡萄糖醛酸酶的高效表达和重组酶的纯化被引量：5
- 2004年
- α 葡萄糖醛酸酶作为木聚糖降解的限速酶之一 ,在木聚糖类半纤维素的生物转化中起着重要的作用。海栖热袍菌Thermotogamaritima是一个嗜极端高温的厌氧细菌 ,其产生的极耐热性酶类具有非常可观的工业应用前景。但热袍菌属Thermotoga的基因在大肠杆菌中的表达一般较困难。研究了T .maritima中的极耐热性α 葡萄糖醛酸酶基因在大肠杆菌不同菌株中的表达水平及纯化技术。结果表明 ,稀有密码子AGA、AGG和AUA限制了该基因在大肠杆菌中的表达 ,在大肠杆菌BL2 1 CodonPlus(DE3) RIL可得到高效表达 ,重组蛋白表达量达 2 0 % ,比酶活比野生菌株提高 5倍 ;重组蛋白经热处理和金属Ni2 + 的亲和层析提纯后 ,达到了电泳纯 ,提纯倍数为 5 1倍 ,收率为5 5 1 %。对重组菌诱导表达条件的研究表明 ,营养丰富的TB培养基有助于重组菌的生长 ,重组菌生长至OD6 0 0 为0 7～ 0 8时添加IPTG诱导
- 薛业敏毛忠贵邵蔚蓝
- 关键词：海栖热袍菌酶学性质
- 链霉菌M-Z18膜蛋白ε-聚赖氨酸降解酶的分离纯化、酶学性质及应用被引量：6
- 2014年
- 【目的】研究链霉菌Streptomyces sp.M-Z18ε-聚赖氨酸降解酶(Pld)的分离纯化及其生理生化特性,并利用该酶制备低聚合度ε-聚赖氨酸(ε-PL)。【方法】菌体细胞经超声破碎、NaSCN溶解和HiTrapTMButyl HP疏水层析制备到Pld,随后研究了其酶学性质、动力学和降解ε-PL过程,最后利用常量稀释法比较了不同聚合度范围ε-PL的最小抑菌浓度。【结果】从Streptomyces sp.M-Z18细胞膜上分离纯化到Pld,纯化倍数为80.4倍,回收率达到59.3%。以L-赖氨酰对硝基苯胺为底物,酶促反应的最适温度为37℃,最适pH为7.0,动力学常数Km为0.621 mmol/L,Vmax为701.16 nmol/min·mg;酶活在pH 7.0-10.0和50℃以下稳定。降解ε-PL实验发现,纯化到的Pld以内切方式降解ε-PL。抑菌实验表明,高聚合度ε-PL(30-35)对细菌的抑制效果较好,而低聚合度ε-PL(8-20)更有利于抑制酵母菌的生长,各种聚合度ε-PL对霉菌的生长抑制均较差。【结论】从ε-PL产生菌中分离纯化到内切型ε-PL降解酶,发现不同聚合度范围ε-PL对微生物的抑制能力存在显著差异。
- 刘庆瑞陈旭升曾昕韩岱毛忠贵
- 关键词：链霉菌分离纯化最小抑菌浓度
- 酒精-沼气双发酵耦联工艺中SO_4^(2-)的控制被引量：3
- 2011年
- SO42-是"酒精-沼气双发酵耦联工艺"稳定运行的重要抑制物。在耦联工艺中,以中温厌氧出水代替自来水配料进行酒精发酵。通过无预糖化工序的"同步糖化发酵"技术研究,将酒精发酵的初始pH提高到6.0,H2SO4的消耗降低了50%,使SO42-的质量浓度维持在3 g/L的沼气发酵安全范围内。在进行高浓度酒精发酵时,糖化酶的添加量为每克木薯添加140 U,发酵54 h,最终酒精体积分数达14.7%。糖化酶添加量与常规酒精发酵用量相比,每克木薯增加了糖化酶20 U。
- 王欣张成明姜立陈程张建华毛忠贵
- 关键词：木薯燃料乙醇同步糖化发酵
- 谷氨酸分批等电结晶中晶种表面积及其粒径对产品粒度分布的影响
- 2012年
- 在谷氨酸分批等电结晶过程中,添加晶种与否直接影响产品的粒度分布(CSD)。通过在谷氨酸结晶过程中添加不同晶种的方法,研究晶种表面积及其粒径对结晶的影响,以期获得谷氨酸分批等电结晶中添加晶种的最优条件。实验结果表明,对于平均粒径不同的晶种,添加的晶种表面积存在临界值Sc使得此时得到的产品粒度分布均匀,中位径(D50)最大。当晶种平均粒径位于67.3～91.9μm,晶种表面积为50 cm2时得到的产品D50最大、CSD最好,即该晶种粒径对应的Sc不大于50 cm2;晶种平均粒径位于103.7～117.7μm时对应的Sc为100 cm2;晶种平均粒径为154.8μm时对应的Sc不小于250 cm2;当晶种平均粒径大于235.9μm时得到的CSD为双峰。表面积相同时,与粒径小的晶种相比,粒径大的晶种破碎率大、吸收溶质的速率小,所以晶种粒径越大表面积临界值越大。
- 杨飞张建华张宏建毛忠贵
- 关键词：谷氨酸
- 谷氨酸提取产业现状与无废化发展方向被引量：4
- 2009年
- 谷氨酸提取的工艺路线及其技术对味精生产成本、质量和环境等因素的影响最为重要。现有"等电离交"工艺技术收率高,但存在辅料消耗大、废水多等缺陷;"浓缩等电转晶工艺"辅料消耗低、废水少且质量好,但存在谷氨酸收率低的缺点;"喷浆造粒工艺"消除了高浓废水的污染,但又造成严重的废气污染,环境问题随着味精制造规模的扩大而呈加重趋势。"谷氨酸提取无废低耗工艺"在清洁生产思想指导下,吸收现有技术的优点,整体谋求经济、环境和质量的集成,通过开发关键技术,形成成本低、质量好、无污染且易于工程放大的谷氨酸提取新型工艺路线。
- 张建华杨玉岭孙付保毛忠贵
- 关键词：谷氨酸
- 计算流体力学用于不同桨叶组合的ε-聚赖氨酸发酵被引量：1
- 2010年
- 采用计算流体力学(CFD)数值模拟方法研究了2种不同桨叶组合(2个相同六直叶桨组合与上下档位分别为螺旋桨、六直叶桨组合)对5 L气液生物反应器的传质混合效果和剪切力的影响,并将这2种桨叶组合用于实验室规模ε-聚赖氨酸发酵。发酵实验结果表明,不同桨叶组合对微生物发酵特性产生了显著影响。相比1号罐,2号罐的菌体呼吸强度得到显著提高,最大菌体摄氧速率和CO2释放速率分别高出23%和32%;ε-聚赖氨酸合成强度提高了8%;同一时刻菌体干质量相差最大高出40%。
- 曹逸陈旭升张建华张宏健毛忠贵
- 关键词：生物反应器CFD数值模拟
- 嗜热乙醇杆菌中醛/醇脱氢酶的双启动子分析被引量：1
- 2007年
- 克隆了嗜热乙醇杆菌(Thermoanaerobacter ethanolicus)中乙醇代谢的关键酶之一醛/醇脱氢酶(alcohol/acetaldehydedehy drogenase,AdhE)基因的上游假定启动子序列,并进行了结构分析。结果表明,adhE的上游序列是启动子,能启动报告基因在大肠杆菌中持续表达。首次发现adhE的启动子序列中存在两个独立的启动子(P172和P37)和核糖体结合位点(SD172和SD37),分别都具有完整功能,但其活性均低于完整的启动子序列。由此推测嗜热乙醇杆菌中adhE的表达受这两个启动子协同调控。
- 彭惠毛忠贵武国干邵蔚蓝
- 关键词：启动子报告基因系统
- Genome shuffling技术改造ε-聚赖氨酸重组菌Streptomyces sp. Feel-1被引量：4
- 2012年
- 利用Genome shuffling技术对1株融合重组菌Streptomyces sp.Feel-1产ε-聚赖氨酸(ε-PL)进行了育种研究。首先对Feel-1进行了甲基磺酸乙酯(EMS)诱变,以甘氨酸(Gly)和S-2-氨乙基-L-半胱氨酸(AEC)作为抗性指标进行筛选,得到4株正向突变株,ε-PL摇瓶产量分别为1.78 g/L、1.89 g/L、1.85 g/L、1.86 g/L,比原始菌株Feel-1(1.60 g/L)分别提高了11.3%、18.1%、15.6%、16.3%;然后将这4株产量提高株作为出发菌库,采用双亲灭活法进行了3轮递推式原生质体融合(Genome shuffling),最终得到了3株产量大幅提高的重组菌,摇瓶产量分别为2.42 g/L、2.35 g/L和2.37 g/L,比原始菌株分别提高了51.3%、46.9%和48.1%;选择其中1株(G3-67)进行补料分批发酵,192 h时ε-PL产量达到32.2 g/L。
- 刘春梅李树董传亮赵福林毛忠贵
- 关键词：Ε-聚赖氨酸原生质体融合发酵
