殷驰
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 微小隐孢子虫Cp16基因真核表达载体的构建及其免疫保护性研究被引量：4
- 2010年
- 【目的】构建微小隐孢子虫黏附蛋白相关基因Cp16的真核表达载体pVAX1-Cp16,并检测其对小鼠的免疫保护效果。【方法】用PCR方法扩增微小隐孢子虫Cp16基因,构建其真核表达载体pVAX1-Cp16,并用脂质体介导法将其转染Hela细胞,用间接免疫荧光技术、SDS-PAGE及Western-blot检测Cp16蛋白在转染细胞中的表达情况;分别用真核表达载体pVAX1-Cp16、pVAX1空载体及PBS肌肉注射免疫BAILB/c小鼠,共免疫3次,检测血清IgG抗体水平及CD4+和CD8+T细胞亚群的变化,并用微小隐孢子虫卵囊感染免疫小鼠(剂量为1×106个/只),研究真核表达载体pVAX1-Cp16对隐孢子虫感染小鼠的免疫保护作用。【结果】成功构建了pVAX1-Cp16真核表达载体;Western-blot和间接免疫荧光检测结果显示,Cp16基因可以在Hela细胞中表达,且表达产物具有反应原性。pVAX1-Cp16免疫小鼠(试验组)血清中抗体水平及CD4+与CD8+T细胞数目比值升高,与各对照组(pVAX1和PBS对照组)相比差异显著(P<0.05)。各组小鼠经口感染微小隐孢子虫卵囊后,试验组与各对照组相比,卵囊排出量均减少了63.97%,持续排出卵囊时间缩短了2d。【结论】构建了微小隐孢子虫黏附蛋白相关基因Cp16的真核表达载体pVAX1-Cp16,其能刺激机体产生一定的免疫保护作用。
- 肖丹殷驰李建华宫鹏涛张西臣
- 关键词：隐孢子虫真核表达质粒免疫保护性
- 利用间接荧光抗体技术对微小隐孢子虫Cp16蛋白进行抗原定位被引量：1
- 2010年
- Cp16基因是从核糖体展示文库中筛选的微小隐孢子黏附相关基因,为了确定Cp16蛋白是否是微小隐孢子虫卵囊或子孢子表面抗原,构建了Pet-28 a-Cp16原核表达载体,将其转化至BL21大肠杆菌中进行诱导表达,经纯化获得重组蛋白Cp16。将纯化的重组蛋白免疫BAILB/c小鼠,ELISA方法测定IgG抗体滴度。利用间接荧光抗体技术进行抗原定位的初步研究。结果表明:隐孢子虫卵囊表面及子孢子表面富含Cp16蛋白。
- 肖丹殷驰李建华宫鹏涛张西臣
- 关键词：隐孢子虫原核表达抗原定位
- 微小隐孢子虫粘附相关蛋白基因的筛选及免疫特性研究
- 隐孢子虫(Cryptosporidium)是一种引起人和动物腹泻的重要的寄生性原虫,由其引起的隐孢子虫病(Cryptosporidiosis)是重要的公共卫生问题。目前尚无理想预防隐孢子虫病的疫苗。本研究采用新生犊牛小肠...
- 殷驰
- 关键词：微小隐孢子虫
- 文献传递
