目的研究莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对气道黏蛋白5AC(mucin 5AC,MUC5AC)表达的调控作用并探讨可能的机制。方法体外培养人气道上皮细胞A549细胞,分别使用卟啉醇肉豆蔻酸乙酸酯(PMA)和过氧化氢(H_2O_2)刺激A549细胞诱导黏液高分泌模型,使用核因子相关因子2(Nrf2)信号通路的强诱导剂莱菔硫烷为干预因素,实验分为空白对照组(不加任何刺激)、黏液高表达组(PMA组和H_2O_2组)及莱菔硫烷干预组(SFN+PMA组;SFN+H_2O_2组)。莱菔硫烷预先处理30分钟后分别予PMA、H_2O_2干预24小时,分别采用Real time PCR和Western blot方法检测A549细胞MUC5AC、Nrf2及其下游抗氧化基因血红素加氧酶1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)和谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC)的m RNA含量及蛋白表达水平。结果与阴性对照组相比,PMA组和H_2O_2组MUC5AC m RNA和蛋白水平显著升高(P均<0.05)。给予莱菔硫烷处理后,MUC5AC的表达明显降低(P<0.05),而Nrf2及其下游抗氧化基因HO-1表达水平较对照组和黏液高表达模型组升高(P均<0.05)。结论莱菔硫烷明显抑制PMA及H_2O_2诱导的气道黏蛋白MUC5AC基因转录及蛋白合成分泌,可能通过Nrf2/HO-1信号通路参与调控气道黏液高分泌。
目的:研究乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)诱导的气道粘蛋白MUC5AC表达的调控作用并探讨可能的机制。方法:体外培养人气道上皮细胞NCI-H292,实验分为对照组、黏液高表达组(LPS组)及乙酰半胱氨酸干预组(NAC+LPS组),分别采用Real time PCR和Western blot方法检测NCI-H292细胞MUC5AC、Nrf2的m RNA含量及蛋白表达水平。结果:LPS刺激NCI-H292细胞表达MUC5AC,MUC5AC m RNA及蛋白表达分别增加7.169±1.785及1.473±0.098(P均<0.05)。NAC促进NCI-H292细胞Nrf2表达,抑制LPS诱导的MUC5AC表达(P<0.05),以30m M最为显著。结论:乙酰半胱氨酸通过促进Nrf2基因表达,抑制气道上皮细胞粘蛋白MUC5AC分泌。
