杨璞
- 作品数：9 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 颞叶癫痫大鼠模型PSD中SNX3的表达
- 黄志凌肖波吴刘亦文杨璞吴小妹吴军谭利明
- PU-670颞叶癫痫大鼠模型PSD中SNX3的表达
- 黄志凌肖波吴刘亦文杨璞吴小妹吴军谭利明
- 颞叶癫痫大鼠海马CAl区热休克蛋白27的表达被引量：4
- 2012年
- 目的观察热休克蛋白27（HSP27）在颞叶癫痫模型大鼠海马CAl区中的表达，探讨HSP27与颞叶癫痫形成的关系。方法健康成年雄性SD大鼠86只，采用随机数字法分为正常对照组（16只）和建模组（70只）；建模组建立氯化锂一匹罗卡品颞叶癫痫大鼠模型，据建模后30d内有无癫痫发作分为颞叶癫痫自发发作组（STLE组）和非自发发作组（n．STLE），正常对照组用生理盐水替代盐酸匹罗卡品，其他处理同建模组。采用匀浆裂解离心提取法分别提取三组大鼠海马CAl区的总蛋白。用免疫印迹法分别检测HSP27在STLE组、n-STLE组和正常组的表达；用免疫电镜观察HSP27在各组海马CAl区的表达。结果免疫印迹法和免疫电镜观察结果相符：在STLE组、n．STLE组和正常组海马CAl区中，HSP27都有表达；免疫印迹相对光密度值分别为0．912±0．011、0．431±0．叭1和0．428±0．010，免疫电镜金颗粒数分别为50．0±4．2、23．0±2．8和20．0±42．3；STLE组中表达最高，与n—STLE组、正常组比较差异有统计学意义（P=0．0001）；n-STLE组和正常组也有表达，但组间比较差异无统计学意义（P=0．63）。结论海马CAl区中HSP27可能参与了颞叶癫痫的形成。
- 杨璞吴刘亦文吴小妹黄志凌肖波陈应柱
- 关键词：癫痫颞叶海马热休克蛋白类印迹法
- 颞叶癫痫大鼠模型PSD中热休克蛋白27的表达
- 黄志凌肖波杨璞吴刘亦文吴小妹吴军谭利明
- 大鼠脑内突触后致密物蛋白质的提取及鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的提取纯度高、易分离溶解的突触后致密物(PSD)蛋白质。方法应用蔗糖密度梯度离心法,逐次获取P2,突触小体和PSD-1;应用Western blot检测PSD-1蛋白质的纯度;对PSD-1运用膜顺序提取法获取可溶性蛋白PSD-2;应用双向凝胶电泳技术分离PSD-1与PSD-2蛋白质点,PDQuest软件分析比较其数目差异。结果突触后标志分子PSD-95在P2成分、突触体和PSD-1 3组成分中均呈免疫染色阳性,而突触前标志分子突触素在PSD-1成分中呈免疫阴性。从PSD-1蛋白中电泳分离到286±25个蛋白质点而显著低于从PSD-2中分离到720±17个蛋白质点(P<0.01)。结论蔗糖密度梯度离心联合膜顺序提取法可获得纯度高、易分离溶解的PSD蛋白质。
- 周颖黄志凌肖波吴小妹吴刘亦文杨璞
- 关键词：双向凝胶电泳
- 颞叶癫痫大鼠突触后致密物中差异性表达蛋白的筛选和鉴定
- 2008年
- 目的筛选和鉴定颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy,TLE)大鼠模型突触后致密物(postsynaptic density,PSD)中差异性表达的蛋白质。方法建立氯化锂-毛果芸香碱TLE大鼠模型,收集TLE组和健康对照组大鼠新鲜全脑组织,联合应用蔗糖密度梯度离心和膜顺序提取技术提取PSD蛋白质,进行双向凝胶电泳,通过PDQuest图像分析软件筛选TLE组差异性表达的蛋白质点,并应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对其进行鉴定。结果与健康对照组比较,TLE组存在70个差异性表达PSD蛋白质点,其中表达上调的蛋白质主要包括果糖二磷酸醛缩酶、肌酸激酶和热休克蛋白27,表达下调的蛋白质主要包括微管蛋白、肌动蛋白、中间丝蛋白α和脯氨酰顺反异构酶。结论TLE大鼠PSD中存在差异性表达蛋白质,其异常表达可能与TLE的形成、发作或神经元保护有关。
- 黄志凌周颖肖波吴小妹吴刘亦文杨璞
- 关键词：颞叶癫痫蛋白质谱双向凝胶电泳
- PU-671颞叶癫痫大鼠模型PSD中热休克蛋白27的表达
- 黄志凌肖波杨璞刘亦文吴小妹吴军谭利明
- 颞叶癫痫相关突触后致密物蛋白质的蛋白质组学筛选研究被引量：2
- 2008年
- 目的筛选颞叶癫痫（TLE）相关突触后致密物（PSD）蛋白分子。方法建立氯化锂-匹罗卡品颞叶癫痫大鼠模型；收集颞叶癫痫组（TLE组）、非颞叶癫痫组（非TLE组）以及正常对照组（Norm）3组的新鲜全脑组织，联合应用蔗糖密度梯度离心和膜顺序提取技术提取PSD；进行双向凝胶电泳，并通过PDQuest图像分析软件比较分析，筛选TLE组特异性和差异性表达的蛋白质点；选取部分差异蛋白质点进行取MALDI—TOF—MS质谱鉴定；应用Western验证部分所鉴定蛋白质在PSD中的表达状况。结果与Norm和非TLE组比较，TLE组中存在40个差异表达蛋白质点，表达上调的主要有热休克蛋白27（HSP-27）、果糖二磷酸醛缩酶（FBA）、肌酸激酶（CK）、甲状腺受体相互作用蛋白6（TRIP6）、髓鞘碱性蛋白S（MBP）、LIM结构域（LIM）；表达下调的主要有细胞骨架蛋白、肽酰-脯氨酰-顺反式异构酶（PPIase）、分选连接蛋白3（SNX3）、乌头酸水合酶（ACO）、甘油醛三磷酸脱氢酶（GAPDH）、琥珀酸辅酶A连接酶（SCOAL）。HSP27和微管蛋白仅、SNX3在TLE、非TLE和Norm3组PSD中均免疫染色阳性。结论TLE组PSD蛋白质差异性表达可能是脑损伤后可塑性反应的结果，但其表达量改变的程度可能与颞叶癫痫形成有关，可视为促／抗TLE形成的重要候选分子。
- 黄志凌周颖肖波吴军吴小妹杨璞吴刘亦文
- 关键词：癫痫颞叶蛋白质组学
