杨玉英 作品数:83 被引量:309 H指数:9 供职机构: 黑龙江八一农垦大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 黑龙江省自然科学基金 黑龙江省教育厅科学技术研究项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 文化科学 更多>>
hIL-18基因真核表达载体的构建及序列分析 2007年 在获得人白细胞介素18(hIL-18)基因重组质粒pGEM-T-hIL-18的基础上,用EcoRⅠ、SalⅠ双酶切该质粒,回收小片段hIL-18基因;同时双酶切真核表达质粒pECFP-C1,回收大片段,二者连接转化大肠埃希菌感受态细胞。对重组质粒pECFP-C1-hIL-18进行PCR扩增、酶切鉴定及序列测定,测序结果表明,克隆至pGEM-T中的IL-18 cDNA包含成熟IL-18的全部编码序列。本研究获得了融合有报告基因pECFP-C1的真核表达载体,为下一步进行hIL-18在真核细胞中的表达打下了良好的基础,亦为在基因水平上探讨hIL-18的生物学功能提供了物质基础。 纪丽丽 杨玉英 李士泽关键词:白细胞介素18 真核载体 用SPA-ELISA检测牛结核乳清抗体的研究 被引量:3 1997年 从用牛PPD皮试阳性奶牛中采取18头份牛乳,不稀释,做SPA-ELISA检测,进行了SPA-ELISA条件优选工作,建立了检测牛乳清中结核抗体的ELISA工作程序。检测结果表明:18份PPD皮试阳性牛乳,经SPA-ELISA检测阳性为15份,阴性为3份,结果附合率为8333%。 杨玉英 黄苏西 刘军 李士泽 李宁 栾富权关键词:SPA-ELISA 结核病 牛病 乳牛 急性冷暴露和冷习服对大鼠和雏鸡某些内分泌活动影响的比较生理学研究 被引量:6 2008年 目的:探讨冷应激对哺乳类和禽类某些内分泌活动影响的比较生理学机制。方法:Wistar大鼠和罗曼雄性雏鸡进行急性冷暴露和冷习服实验,探讨急性冷暴露和冷习服对大鼠和雏鸡某些内分泌活动的影响。结果:大鼠在急性冷暴露后血清T3水平在4-36 h有不同程度的升高,而雏鸡的T3浓度则在冷暴露后除12 h有所升高外,其他时间均低于冷暴露前的水平;大鼠血清T4在冷暴露后2 h时升高,而后逐渐降低,而雏鸡冷暴露后2~4 h升高,12 h降低,而后又升高;血清胰岛素(Insulin)的变化趋势大鼠和雏鸡基本一致,均在冷暴露2 h升高,而后渐降;皮质醇(Cortisol)的变化,大鼠为冷暴露后2 h明显升高,而后渐降,而雏鸡则一直保持较高水平;冷习服后大鼠和雏鸡血清的几种激素水平变化趋势基本一致,即冷习服后血清T3升高,T4下降,胰岛素降低,而皮质醇则呈升高趋势。结论:冷应激对哺乳动物和禽类的内分泌活动具有差异性。 李士泽 杨玉英 杨焕民 倪江关键词:冷暴露 冷习服 内分泌 过氧化氢对小鼠消化系统影响初探 2007年 牛乳营养丰富,微生物极易在其中大量繁殖。人们采用在牛乳中添加防腐剂的方法增加原料乳的保存期限,以解决牛乳在收购、保存、运输等过程中由于高温环境及不良的卫生条件所导致的牛乳变质问题。过氧化氢做为防腐剂的一种,无色、无味,并且很容易得到,加入少量不影响牛乳的气味,其强力氧化作用能破坏微生物,而且处理后过氧化氢容易排除,因此可用于乳品包装材料的杀菌。 杨玉英 徐淑明 邓洪宇 鲍丽霞关键词:过氧化氢 小鼠 营养丰富 卫生条件 高温环境 包装材料 牛大肠杆菌灭活疫苗(K_(99)、F_(41)兼型)的研制与免疫研究 被引量:4 2002年 应用分离鉴定的兼有K99、F41菌毛抗原的产ST肠毒素的O142血清型大肠杆菌作菌种,制备出菌毛、全菌体和菌毛与菌体混合等3种灭活疫苗。疫苗物理性状良好,接种怀孕母牛产生良好的免疫反应,接种疫苗14 d后,抗体效价K99 为4.7~6log2, F41 为2.1~5.5 log2;28 d后K99 为6.5~8log2,F41 为2.6~6.5 log2。产犊后8~10 h,对犊牛口服攻毒800亿菌/mL O142大肠杆菌,结果3种疫苗均能使犊牛获得一定保护,保护率分别为89.1%、55.6%和94.6%,对照组为16.3%。菌毛苗和混合苗免疫效果均优于全菌体苗,K99免疫效果优于F41,两次免疫效果优于一次免疫。现地试验取得了良好的免疫效果,证明制备的油乳剂灭活疫苗安全, 免疫原性良好。 崔玉东 朱战波 侯喜林 余丽芸 杨玉英 朴范泽关键词:K99 F41 大肠杆菌 灭活疫苗 免疫 长白猪RBM3基因及其重组慢病毒载体的构建和应用 本发明涉及一种长白猪RBM3基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了含有该基因的重组慢病毒载体和构建方法以及在提高猪的抗寒能力中的应用。本发明成功的构建了含RBM3基因的慢病毒载体plenti6/v... 李士泽 李俭 杨玉英 杨焕民 计红 李玉恒 孟宇 李静辉 张雪 李云龙文献传递 Ⅱ型猪圆环病毒SYBR Green Ⅰ模式实时定量PCR检测方法的建立 2007年 登录GenBank下载猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV-2)的全基因组序列,根据其保守区域,设计1对特异性引物,采用SYBR Green Ⅰ随机结合渗入法,建立该模式的实时定量PCR检测方法,构建了检测PCV-2型的标准DNA模版,循环阈值(Ct)与标准DNA模板在1.0×102~1.0×107拷贝·μL-1浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.999。该方法用于猪圆环病毒2型的检测具有很高的特异性,其敏感性与常规PCR相比可以提高100倍,可以用于猪圆环病毒2型的快速检测。 曹涤非 贾赟 胡传伟 吴斌 任月 岳慧 吕品 杨玉英关键词:SYBR 实时定量PCR RBM3重组慢病毒载体的构建、包装和鉴定 被引量:1 2014年 构建含有冷休克蛋白RNA结合基序蛋白3(RBM3)基因的慢病毒表达载体,产毒感染ST细胞,以评价重组慢病毒载体提高RBM3蛋白表达的效果.应用分子生物学技术提取仔猪脾脏组织的总RNA,通过反转录方法扩增RBM3基因,将其连入慢病毒载体Plenti6/v5-DEST中,在感受态细胞DH5α中扩增培养,并进行RBM3基因的测序鉴定,将重组的慢病毒质粒转染293T细胞,收获病毒液,感染293T细胞并提取细胞RNA,用逆转录PCR方法检测RBM3 mRNA在感染病毒的293T细胞中的表达,用含有慢病毒空载体pLenti6/V5-DEST的病毒液、含有重组慢病毒载体pLenti6/V5-RBM3的病毒液和无菌去离子水分别感染ST细胞后通过Western blot方法检测RBM3蛋白在感染病毒的ST细胞中的表达.结果表明:构建的慢病毒载体Plenti6/v5-RBM3经测序分析证实基因序列正确.包装后的慢病毒滴度为107 PFU/mL.逆转录PCR方法检测到感染病毒的293T细胞中,RBM3基因在转录水平上有表达,Western blot方法检测到感染病毒的ST细胞中,空载体组与空白对照组相比,RBM3蛋白表达量接近相同(分别为0.312±0.022和0.282±0.028);过表达组与空白对照组相比,RBM3蛋白表达量(0.568±0.045)显著增加(P<0.05),RBM3蛋白在翻译水平有表达.因此,本研究构建的携带RBM3基因的重组慢病毒能够感染ST细胞,并使其RBM3蛋白表达量增加. 李俭 杨玉英 李玉恒 郭景茹 计红 郭丽 李鹏 杨焕民 李士泽关键词:冷休克蛋白 慢病毒载体 WESTERN BLOT 急性冷暴露对仔猪比目鱼肌GSK3β及凋亡蛋白Caspase-3表达的影响 被引量:3 2020年 气候条件与畜牧业的发展密切相关,尤其在我国北方寒区,养殖动物极易受到寒冷刺激的危害,但寒冷刺激引起动物机体损伤的机制尚不明确,因此本研究旨在探究急性冷暴露对仔猪比目鱼肌糖原合酶激酶3β(GSK3β)及凋亡蛋白半胱天冬酶-3(Caspase-3)表达的影响。将12只仔猪随机分成3组,分别为常温对照组、冷暴露4 h组和冷暴露8 h组,采集各组仔猪比目鱼肌样本进行Western blot分析。结果显示,冷暴露组Cleaved Caspase-3和GSK3β磷酸化显著高于对照组,B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)/Bcl-2-Associated X蛋白质(Bax)比值与对照组相比显著降低。结果表明,急性冷暴露引起Cleaved Caspase-3和GSK3β磷酸化水平的升高和Bcl-2/Bax比值的降低,推测可能是机体通过抑制GSK3β的磷酸化来减弱急性冷暴露诱导的细胞凋亡。 刘鹏 史宏昭 姚睿智 刘洋 杨玉英 李士泽关键词:仔猪 比目鱼肌 GSK3Β CASPASE-3 凋亡 TAD-3鸡传染性法氏囊病弱毒细胞疫苗的研究 1995年 将TAD鸡传染性法氏囊病鸡胚弱毒疫苗适应于鸡胚成纤维细胞制成TAD-3弱毒细胞疫苗,其毒价稳定在107·5TCID50/mL以上;28日龄雏鸡免疫接种后14d抗体琼扩(AGP)阳性率为100%,雏鸡接种105TCID50证明安全,现场使用效果理想。但不宜以大剂量的TAD-3(≥3×104TCID50)和新城疫疫苗同时。服免疫接种,以免干扰新城疫的免疫效果。 魏德庆 王忠林 崔玉东 赵殿军 王玲 赵淑兰 侯喜林 朴范泽 苗莲清 杨玉英 赵德龙关键词:免疫接种 鸡病 IBD