杨恒
- 作品数：32 被引量：57H指数：4
- 供职机构：昆明理工大学更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学化学工程金属学及工艺医药卫生更多>>
- 猪传染性胃肠炎病毒基因工程疫苗研究进展被引量：3
- 2011年
- 猪传染性胃肠炎是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起猪的一种高度接触性肠道疾病,可导致仔猪发生严重的呕吐、腹泻与脱水,死亡率可达100%。口服疫苗是TGEV基因工程疫苗研究的主要方向,目前已在腺病毒、细菌、转基因植物及DNA疫苗中对TGEV的S基因进行了表达,并对其口服免疫后的免疫原性进行研究。现针对TGEV基因工程疫苗近年来研究的概况进行综述,分析其优点与不足,并对其未来的发展进行展望。
- 杨恒夏雪山李盛陶陈伟
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒基因工程疫苗口服免疫
- 树鼩IgG的三抗体夹心ELISA检测方法
- 本发明公开一种树鼩IgG的三抗体夹心ELISA检测方法，并将其应用于检测树鼩血浆中总IgG含量。以鼠抗树鼩IgG单克隆抗体包被于酶标板作为捕获抗体，结合待检测树鼩IgG；进而用兔抗树鼩IgG多克隆抗体为二抗，以商品化的羊...
- 夏雪山温志刚冯悦刘丽魏大巧杨恒
- 文献传递
- 一种微孔片状银粉的制备方法
- 本发明涉及一种微孔片状银粉的制备方法，在原料固体硝酸银中加入非金属晶核物质，再经还原、球磨及脱除非金属晶核物质等过程，生产制备一种微孔网状结构的片状银粉。微孔网状结构在涂料中具有流体可透过性，树脂很容易穿透小孔，将片状银...
- 朱晓云杨显万杨恒龙晋明徐瑞东
- 文献传递
- 猪传染性胃肠炎病毒S-N融合双基因疫苗的构建及其免疫原性分析被引量：4
- 2012年
- 为了构建TGEV S-N融合双基因疫苗并分析其免疫原性,从S、N基因克隆质粒中以PCR扩增了S基因(2.1kb,含A、B、C、D抗原位点)和N基因(1.2kb),将S基因插入pVAX1载体构建了pVAX-S质粒,再将N基因插入pVAX-S中S基因末端,构建了融合表达S、N双基因的重组质粒pVAX-S-N,将pVAX-S-N转染COS7细胞以免疫荧光试验进行S、N双基因的表达鉴定。用纯化的pVAX-S-N和作为对照的pVAX-S、pVAX1、PBS免疫BALB/c小鼠,共免疫3次,分别测定免疫后第0、14、28、42天的小鼠血清IgG抗体,测定免疫后第42天小鼠外周血T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)的数量。结果,融合质粒pVAX-S-N可在COS7细胞特异性表达S、N两个蛋白,pVAX-S-N免疫小鼠后第14天即可诱导产生抗TGEV的特异性IgG,但pVAX-S-N诱导的抗体水平一直低于pVAX-S诱导的抗体水平,在免疫后第42天差异极显著(P<0.01);pVAX-S-N可激发小鼠产生细胞免疫应答,但pVAX-S-N组的CD3+、CD4+、CD8+数量均低于pVAX-S免疫组。研究结果表明,融合双基因疫苗pVAX-S-N具有免疫原性,但免疫效果却不如单基因疫苗pVAX-S的理想。
- 黄小波杨恒曹三杰文心田李春松廖晓丹张鑫淼
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒DNA疫苗免疫原性
- 猪传染性胃肠炎病毒S、N基因核酸疫苗的构建与免疫原性研究
- 本研究采用RT-PCR扩增TGEV SC-H株S基因5’端主要抗原位点片段和N基因,并将其插入真核表达载体pVAX1,构建单独与嵌合表达S、N基因的pVAX-S、pVAX-N、pVAX-S-N三种重组质粒.通过脂质体将重...
- 杨恒曹三杰黄小波文心田
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒S基因N基因核酸疫苗免疫原性
- 文献传递
- TGEV双基因嵌合表达质粒pVAX-S-N的构建及体外表达被引量：2
- 2009年
- 采用RT-PCR扩增猪传染性肠胃炎病毒(TGEV)SC-H株S基因5′端主要抗原位点片段和N基因,插入pMD19-T载体,经酶切与测序鉴定后,构建重组质粒19T-N与19T-S。从T载体上将S、N基因切下,以亚克隆方法插入真核表达载体pVAX1,构建嵌合表达S、N基因的重组质粒pVAX-S-N。对重组质粒PCR与酶切鉴定后,以脂质体转染法转染COS7细胞,间接免疫荧光检测转染后细胞外源基因的表达情况。结果表明,重组质粒构建正确且在COS7细胞中得到表达,转染的细胞呈现特异性荧光。真核表达质粒pVAX-S-N的成功构建为进一步研究TGEV核酸疫苗奠定了物质基础。
- 杨恒曹三杰黄小波文心田秦学远
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒S基因N基因
- 干湿循环下云南红土的渗透特性研究
- 本文以云南红土为研究对象,针对云南干湿分明、降雨集中的气候特点以及红土型大坝存在的渗漏问题,结合国家自然科学基金项目“云南红土型大坝的干湿循环效应研究”(项目编号:51568031),提出了“干湿循环下云南红土的渗透性研...
- 杨恒
- 关键词：干湿循环含水率
- 猪传染性胃肠炎病毒DNA疫苗的构建与免疫原性研究
- ＜正＞猪传染性胃肠炎（TGE）是由猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）引起猪的一种高度接触性肠道传染病。该病对两周龄以内新生仔猪危害尤为严重,可导致感染仔猪发生严重的呕吐、腹泻与脱水,死亡率可达100%。该病现已遍及世界各主要...
- 杨恒曹三杰黄小波文心田
- 文献传递
- 达克罗涂液制备中金属粉混合工艺的研究
- 本文介绍在达克罗涂液制备中金属粉的混合工艺。研究了混粉处理前后粉末和涂层的性能。结果表明，混合处理后的粉末，颜色呈现均匀的银灰色，粉体的松装比重降低，比表面积增大，两种粉的漂浮值趋于一致。混合处理后的粉末，易润湿分散，水...
- 朱晓云杨恒郭忠诚蔡军
- 关键词：片状锌粉
- 文献传递
- 携带猪传染性胃肠炎病毒S/N融合双基因的减毒沙门氏菌的构建与鉴定被引量：1
- 2012年
- 旨在构建携带猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S/N融合双基因的减毒沙门氏菌,并鉴定该疫苗菌株的生物学特性,为开展TGEV口服免疫研究奠定材料基础。采用PCR方法从克隆质粒19T-S和19T-N中分别扩增了TGEV的S基因(含主要抗原位点,2.1kb)和N基因(1.2kb),将S基因和N基因插入pVAX1载体,构建携带S/N融合双基因的真核表达质粒pVAX-S/N。将pVAX-S/N电转化减毒沙门氏菌SL7207,筛选获得重组菌株SL7207(pVAX-S/N),并对重组菌株SL7207(pVAX-S/N)的体外稳定性、目的基因在体内的转录、口服接种小鼠的安全性及在体内稳定性等特性进行了鉴定。结果表明,真核质粒pVAX-S/N构建成功,该质粒转染COS7中能表达2个目的蛋白,重组菌SL7207(pVAX-S/N)在Kan+抗性下体外培养稳定性好,口服接种小鼠3d可从回肠组织检测到目的基因的转录,以0.5×109、1×109和2×109 CFU口服对小鼠均具有安全性,重组菌在接种小鼠的肝、脾于4周左右逐渐被机体清除。结果表明成功构建TGEVS/N双基因疫苗SL7207(pVAX-S/N),该疫苗具有良好的稳定性与安全性等特点,为开展TGEV口服免疫研究奠定了基础。
- 黄小波李春松杨恒曹三杰文心田廖晓丹张鑫淼
- 关键词：减毒沙门氏菌猪传染性胃肠炎病毒生物学特性
