李艳东
- 作品数:5 被引量:38H指数:4
- 供职机构:华东师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学环境科学与工程农业科学更多>>
- 三种抗氧化剂对氯化镉所致河蟹精子DNA损伤的保护作用被引量:4
- 2007年
- 采用单细胞凝胶电泳技术与CASP软件检测和分析了3种抗氧化剂(VC,VE和Zn2SO4)对氯化镉所致河蟹离体精子DNA损伤保护作用的量效关系。以5mmol.L-1氯化镉处理河蟹精子DNA,表征DNA损伤程度的4个参数(L tail,TailDNA,TM,OTM)值与空白组相比显著增加,表明该氯化镉浓度下已对河蟹精子的DNA造成严重损伤。在此基础上,将河蟹精子加入到分别含有不同浓度抗氧化剂的氯化镉(5mmol.L-1)溶液中,研究不同浓度抗氧化剂对精子DNA的保护作用。其中VC的浓度分别为:400μmol.L-1,1mmol.L-1,3mmol.L-1,5mmol.L-1;VE的浓度分别为:50μmol.L-1,100μmol.L-1,200μmol.L-1,400μmol.L-1;Zn2+的浓度分别为:400μg.mL-1,1mg.mL-1,2mg.mL-1,4mg.mL-1。结果发现,上述3种抗氧化保护剂均对精子DNA具有一定的保护效果,其中VE和Zn2+添加组均随其浓度的增加,保护作用不断增强,当VE达到400μmol.L-1,Zn2+达到4mg.mL-1时,均表现出很好的保护效果;然而,VC在低浓度时保护作用随其浓度增加而加强,至3mmol.L-1时细胞拖尾率最低,即保护效果最佳,但在5mmol.L-1时细胞拖尾率又明显增加,即精子DNA又受到严重损伤,表明VC对精子DNA的保护作用具有一定的浓度范围。此外,与VC和Zn2+的保护作用相比,VE在400μmol.L-1浓度时表现出更好的保护效果。
- 范丽君曲迪贾林芝李艳东赵云龙王群
- 关键词:氯化镉彗星实验DNA损伤单细胞凝胶电泳技术
- 兔血清白蛋白和IgG的分离纯化与鉴定被引量:7
- 2007年
- 目的:以兔血清白蛋白和IgG的分离纯化与鉴定实验为例,阐述了血清蛋白制备与分析的过程。方法:使用了硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤层析、DEAE离子交换层析、亲和层析、醋酸纤维薄膜电泳、SDS-PAGE、HPLC等分离纯化鉴定蛋白质的方法。结果:制备了兔血清白蛋白和γ-球蛋白(IgG),测定被分离物质的相对分子量,鉴定纯化产品的均一性。结论:该实验作为一门生物综合性大型实验,非常有利于培养学生掌握蛋白质制备与分析的综合技能。
- 韦莹珏彭灿张敏孙敏林爱福李艳东
- 关键词:分离纯化白蛋白
- 保存液中Ca^(2+)、Mg^(2+)、K^+对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)精子体外保存存活率的影响被引量:4
- 2007年
- 提要以伊红染色法检测样品精子存活率为依据,研究了4℃下5种保存液及Ca2+、Mg2+离子对中华绒螯蟹精子体外保存效果的影响。5种保存液分别为人工海水(ASW)、2倍钙离子人工海水(2×Ca2+-ASW)、无镁离子人工海水(Mg2+-FASW)、无钾离子人工海水(K+-FASW)、无钙离子人工海水(Ca2+-FASW),经4天保存后,各保存液中精子样品的存活率和精子密度均出现明显差异,K+-FASW、ASW及2×Ca2+-ASW三种保存液中的精子因发生顶体反应而大量死亡,而Mg2+-FASW、Ca2+-FASW的保存效果较好。在此基础上,进一步探讨了不同Mg2+和Ca2+浓度对精子存活率的影响,结果发现,经24h保存后各实验组精子存活率均随着两种离子浓度的增加而明显下降。上述结果表明:K+-FASW、ASW及2×Ca2+-ASW不适合精子保存,而Mg2+-FASW和Ca2+-FASW均可作为该蟹精子的保存液;Ca2+因可引起精子顶体反应而造成保存液中精子的大量死亡,其浓度与存活率呈明显的负相关;无K+的保存液中,Ca2+、Mg2+的存在与否对精子的保存效果起关键作用;无Mg2+人工海水之所以具有较好的保存效果,可能与Mg2+的缺乏而导致Ca2+逆浓度差转运受阻,避免了因Ca2+进入而诱发顶体反应有关。
- 陈东华李艳东贾林芝厉小波王立人孙菊香王群
- 关键词:中华绒螯蟹精子保存液MG^2+K^+
- 冷冻保护剂及预冷时间对河蟹精子体外冷冻保存的影响被引量:17
- 2008年
- 本文以甘油、二甲亚砜(DMSO)为冷冻保护剂,采用两步降温法,以精子存活率和DNA损伤程度为检验其冷冻效果的评价指标,研究了冷冻保护剂和预冷时间对河蟹Eriocheir sinensis精子冷冻保存效果的影响。胰蛋白酶消化法获得河蟹游离精子,液氮冷冻保存8h以上,精子保存密度为107个/mL,伊红染色法检测精子存活率,单细胞凝胶电泳(SCGE)检测精子DNA损伤。实验共设置10个组,分别为不同浓度的单一冷冻保护剂(每种保护剂的体积百分比分别为5%、10%、12.5%、15%)和两种保护剂组合(两种保护剂在同一实验组中的体积百分比含量均为5%、10%)。结果显示,12.5%甘油的保存效果最佳,精子存活率达到62.60%。在此基础上,以10%甘油作为冷冻保护剂,设置5、10、20、30、40min 5个时间梯度,研究了预冷时间对精子冷冻保存效果的影响。结果显示预冷时间的长短对精子冷冻保存效果的影响显著,当预冷时间低于20min时,精子大量死亡,且精子DNA严重损伤;当预冷时间超过30min时,精子存活率明显提高,精子DNA损伤明显减弱。
- 陈东华李艳东贾林芝厉小波王立人曲迪王群
- 关键词:河蟹精子冷冻保存冷冻保护剂二甲亚砜单细胞凝胶电泳
- 水体镉对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)亲体毒性作用研究
- 本论文以我国重要经济甲壳动物中华绒螯蟹亲体为研究对象,运用酶学分析法及精子质量评价指标研究了不同浓度水体Cd2+暴露,对中华绒螯蟹亲体生殖毒性,肝胰腺中消化酶、代谢酶和抗氧化酶系统活性的影响。以期弄清镉对中华绒螯蟹亲体消...
- 李艳东
- 关键词:肝胰腺代谢酶毒性
- 文献传递