李宝剑
- 作品数：5 被引量：21H指数：4
- 供职机构：温州医学院药学院更多>>
- 发文基金：浙江省中医药科学研究基金温州市科技计划项目浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 细脚拟青霉多糖抗乙型肝炎病毒的体外实验研究被引量：10
- 2007年
- 目的:探讨细脚拟青霉多糖(PtPs)体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的活性。方法:通过CCK-8试剂盒检测PtPs对HepG2.2.15的细胞毒性。以无或低毒浓度的PtPs作用于HepG2.2.15细胞,采用ELISA法检测细胞内和培养上清的HBsAg,HBeAg水平;采用荧光定量PCR法检测细胞内和培养上清中HBV DNA的水平。结果:随着PtPs浓度的增加细胞内的HBeAg和上清中的HBeAg、HBV DNA的水平显著下降。PtPs对细胞内和上清中HBeAg的抑制率高度相关,r=0.994,P<0.01。PtPs作用24 h后细胞内和上清中的HBeAg的治疗指数分别为5.63和3.30。结论:PtPs在体外对HBeAg和HBV DNA的合成与分泌有抑制作用。
- 李宝剑金丽琴左江成
- 关键词：细脚拟青霉多糖乙型肝炎病毒
- 细脚拟青霉多糖PTPS-1的结构特征和抗肿瘤活性的初步研究被引量：5
- 2008年
- 目的分析鉴定细脚拟青霉多糖PTPS-1的理化性质和结构特征,并观察其抗肿瘤活性。方法采用DEAE-纤维素及Sephadex G-100柱色谱分离纯化得到PTPS-1;利用HPLC、GC、IR、部分酸水解及NMR分析PTPS-1的相对分子质量、组成和结构特征;采用CCK-8检测观察PTPS-1对小鼠脾细胞和PTPS-1刺激培养的小鼠腹腔巨噬细胞上清对Sp2/0细胞的增殖活性。结果PTPS-1的纯度为98.977%,平均相对分子质量为1.84×104,由甘露糖和半乳糖组成,二者摩尔比为1.3∶1,糖链结构中主链含有α-(1→6)、α-(1→2)和β-(1→3)连接的糖苷键,支链含有Gal-(1→3)连接。PTPS-1可明显促进小鼠脾细胞的增殖(P<0.01),PTPS-1刺激培养的小鼠腹腔巨噬细胞上清能抑制Sp2/0细胞的增殖(P<0.01)。结论PTPS-1是从细脚拟青霉中分离出的具有免疫调节和抗肿瘤活性的中性杂多糖。
- 金丽琴左江成吕建新李宝剑李东
- 关键词：细脚拟青霉多糖类抗肿瘤活性
- 细脚拟青霉多糖对肝星状细胞体外活化的影响被引量：3
- 2008年
- 目的探讨细脚拟青霉多糖(PtPs)对原代分离培养的新生大鼠肝星状细胞(HSC)活化的影响。方法将不同浓度的PtPs作用于新生大鼠的HSC,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HSC中转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA和白介素10(IL-10)mRNA的表达,细胞免疫组织化学检测在不同培养时间HSC中α-平滑肌肌动蛋白(SMA-α)、细胞角蛋白18(CK-18)和Ⅰ型胶原的表达,检测单胺氧化酶(MAO)在HSC的培养上清和线粒体中的活性,检测羟脯氨酸(Hyp)在HSC的培养上清和胞浆中的含量。结果与对照组比较,各浓度PtPs组TGF-β1mRNA的表达均显著增加(P<0.01),IL-10mRNA的表达均显著下降(P<0.01);随着HSC培养时间的延长,PtPs各组较对照组CK-18的表达下降,SMA-α和Ⅰ型胶原的表达增强;与对照组比较PtPs 250 mg/L组培养上清和线粒体中的MAO活性最高(P<0.01),PtPs 62.5 mg/L组胞浆中Hyp含量最高(P<0.05)。结论PtPs能促进新生大鼠HSC体外活化。
- 李宝剑金丽琴
- 关键词：细脚拟青霉多糖肝星状细胞肝纤维化
- 细脚拟青霉多糖对乙醇诱导L-02细胞损伤的保护作用研究被引量：5
- 2007年
- 目的探讨细脚拟青霉多糖(PtPs)对乙醇诱导肝细胞损伤的体外保护作用。方法采用RT-PCR分别检测乙醇诱导损伤的乙醇组、PtPs处理组(PtPs+乙醇)及正常对照组L-02细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA和热休克蛋白90(HSP90)mRNA的表达;检测细胞培养上清液中黄嘌呤氧化酶(XOD)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)活性及丙二醛(MDA)含量;检测细胞匀浆中三磷酸腺苷酶(ATPase)活性,并对各组细胞进行Annexin-FITC标记染色观察凋亡细胞情况。结果与乙醇组比较,乙醇+PtPs组细胞内TNF-α mRNA表达下降(P<0.01),HSP90 mRNA表达增加(P<0.05或P<0.01);细胞培养上清液中SOD活性升高、XOD及LDH活性下降、MDA含量下降(P<0.05或P<0.01);细胞匀浆中ATPase活性上升(P<0.05或P<0.01);PtPs处理后可见乙醇诱导的L-02细胞凋亡和坏死被明显抑制。结论PtPs对乙醇诱导肝细胞的损伤具有保护作用。
- 胡云良李宝剑金丽琴
- 关键词：细脚拟青霉多糖L-02细胞乙醇
- 细脚拟青霉多糖对抗四氯化碳诱导的急性肝损伤被引量：4
- 2008年
- 目的:观察细脚拟青霉粗多糖(cPtPs)及其纯化多糖(PtPs)对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠急性肝坏死的影响。方法:将Wistar大鼠分为4组(对照组、CCl4组、cPtPs+CCl4组和PtPs+CCl4组),分别用生理盐水、cPtPs和PtPs灌胃15 d,最后2 d,腹腔注射CCl4,16 h后全自动生化分析仪检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)和间接胆红素(IBIL);肝组织苏木素-伊红(HE)染色观察病变程度;黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法分别检测肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA);甲基百里香酚蓝比色法测定肝细胞线粒体中Ca2+浓度;免疫组织化学法检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果:与对照组比较,CCl4组血清中ALT、AST、TBIL、DBIL和IBIL的含量显著增加(P<0.05),HE染色肝组织变性坏死累及全小叶。与CCl4组比较,PtPs+CCl4组血清中ALT、AST、TBIL、DBIL和IBIL的含量显著下降(P<0.05);PtPs+CCl4组HE染色病变程度较轻,变性坏死局限于肝小叶的Ⅲ区;PtPs+CCl4组胞浆中SOD活性提高,MDA水平降低(P<0.05);PtPs+CCl4组和cPtPs+CCl4组线粒体中Ca2+浓度均下降(分别为P<0.05,P<0.01);PtPs+CCl4组α-SMA在肝组织的坏死区几乎无表达。结论:PtPs能显著减轻CCl4诱导的肝损伤,可能与PtPs抗脂质过氧化作用相关,效果优于cPtPs。
- 金丽琴李宝剑吕建新
- 关键词：拟青霉多糖类四氯化碳肝损伤
