李国强
- 作品数：101 被引量：393H指数：12
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- 自发免疫耐受大鼠移植肝内调节性T细胞的生物学特性被引量：3
- 2007年
- 目的 研究大鼠肝移植后自发免疫耐受的形成与移植肝内CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Tr细胞）的关系。方法 按供、受者不同将实验分为3组。急性排斥组：DA大鼠为供者，LEW大鼠为受者；自发耐受组：LEW大鼠为供者，DA大鼠为受者；同基因组：供、受者均为DA大鼠。各组均建立大鼠原位肝移植模型。分别在肝移植术后4、7、14、30和90d时采用密度梯度离心法分离移植肝内淋巴细胞，免疫磁珠分离（MACS）法分选出CD4^＋CD25^＋Tr细胞；用流式细胞术（FCM）检测细胞纯度，同时分析CD4^＋CD25^＋Tr细胞比例的变化；体外细胞增殖试验研究CD4^＋CD25^＋Tr细胞对CD4^＋CD25^-T细胞的免疫抑制作用。结果 肝移植早期，急性排斥组和自发耐受组移植肝内CD4^＋CD25^＋Tr细胞比例均明显增加，其中急性排斥组增加更为明显；移植后4d左右，两组CD4^＋CD25^＋Tr细胞比例开始下降，急性排斥组的下降幅度较大；移植后30d，自发耐受组受者的移植肝内CD4^＋CD25^＋Tr细胞比例达到第2次高峰，约在移植后90d时下降至正常生理水平。移植后7d左右，急性排斥组受者均因发生排斥反应而死亡，而自发耐受组受者均存活。此外，CD4^＋CD25^＋Tr细胞能有效抑制CD4^＋CD25^-T细胞的增殖。结论 CD4^＋CD25^＋Tr细胞是一种具有特异免疫调节功能的T细胞亚群，其主动的免疫抑制功能可能是诱导大鼠肝移植自发免疫耐受的机制之一。
- 吕凌张峰浦立勇姚爱华俞悦孙倍成李国强王学浩
- 关键词：肝移植免疫耐受
- 4-1BBL基因真核表达载体构建及在肝癌细胞中表达的研究被引量：4
- 2003年
- 目的 研究含鼠源性 4 1BBL真核表达载体体系的构建及其在大鼠肝细胞癌 (HCC)细胞系CBRH7919中获得稳定、高效表达的方法。方法 将 4 1BBL全长cDNA亚克隆到真核表达载体PCI neo中 ,获得 4 1BBL定向插入重组子PCI neo 4 1BBL ,采用酶切法和测序法鉴定。用阳离子脂质体将PCI neo 4 1BBL转染CBRH7919,经G4 18筛选 ,获得阳性克隆 ,命名为PCI neo 4 1BBL CBRH7919+细胞。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测 4 1BBL在CBRH7919中的表达。结果 PCI neo 4 1BBL经限制性内切酶切 ,电泳后显示有 980bp的 4 1BBL目的基因片段和 5 .4kb的线性化PCI neo载体片段 ;重组子测序结果与Genbank中 4 1BBLcDNA序列相符 ,证实构建成功。RT PCR检测到 4 1BBL在PCI neo 4 1BBL CBRH7919+细胞中获得稳定表达。结论 重组 4 1BBL真核表达载体构建正确 ,并在PCI neo 4 1BBL CBRH7919+细胞中获得稳定、高效表达。
- 李国强王学浩印洁俞悦
- 关键词：肝癌4-1BBL基因真核表达载体基因表达
- C/EBP同源蛋白(CHOP)调控ERO1α信号通路在急性肝损伤中的作用
- 饶建华张峰钱晓峰浦立勇李国强王学浩吕凌
- 急诊成人右半肝活体肝移植治疗重型肝炎九例报告
- 2007年
- 目的探讨急诊成人右半肝活体肝移植治疗重型肝炎的疗效。方法 2002年9月至2005年8月期间共施行急诊成人右半肝活体肝移植治疗重型肝炎患者9例,回顾性分析所有患者的临床和随访资料。结果 9例患者术前肝功能均为 Child C 级,MELD 评分为26.7±8.8,术前主要并发症为肝性脑病5例,严重电解质紊乱3例,肾功能衰竭2例,消化道出血1例。供、受者手术均顺利。术后主要并发症:急性肾功能衰竭3例,肺部感染2例,肝移植相关性脑病1例。未出现原发性肝脏无功能及血管、胆道系统并发症。1年生存率为55.6%。全组供者未出现严重并发症及死亡。结论急诊成人活体肝移植治疗重症乙型肝炎可明显提高患者生存率,供者术前评估必须充分以确保安全。
- 张峰王学浩李相成孔连宝孙倍成李国强钱晓峰成峰陆森吕凌
- 关键词：肝移植活体供者
- 活体肝移植的临床经验被引量：1
- 2002年
- 王学浩李国强张峰李相成
- 关键词：供体手术改进并发症预防活体肝移植
- B7.1和B7.2基因真核表达载体的构建及在肝癌细胞中表达的实验研究被引量：1
- 2004年
- 目的 构建含鼠源性B7 1和B7 2真核表达载体体系 ,研究其在肝癌细胞系CBRH7919中获得高效、稳定表达的方法。方法 将目的基因全长cDNA分别亚克隆到真核表达载体PCI neo中 ,获得B7 1和B7 2正向单拷贝插入重组子PCI neo B7 1和PCI neo B7 2 ,采用酶切法和测序法鉴定。采用阳离子脂质体将PCI neo B7 1/B7 2分别转染CBRH7919,经G4 18筛选 ,获得阳性克隆 ,命名为PCI neo B7 1/B7 2 CBRH7919+细胞。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测目的基因在CBRH7919中的表达。结果 PCI neo B7 1/B7 2酶切后 ,电泳显示 918bp和 94 2bp的目的基因片段和 5 4kbp的线性化PCI neo载体片段 ;重组子测序结果与Genebank中B7 1和B7 2序列相符 ,证实构建成功。RT PCR检测结果显示B7 1和B7 2均在PCI neo B7 1/B7 2 CBRH7919+中获得稳定表达。结论 重组真核表达载体构建正确 ,并在肝癌细胞系CBRH7919中获得高效、稳定表达 ,为其在肝癌分子免疫治疗研究中应用奠定基础。
- 李国强王学浩印洁俞悦
- 关键词：B7.1B7.2基因真核表达载体肝癌
- miRNA-155对调节性T细胞表型和功能的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨微小核糖核酸(miRNA)-155对调节性T细胞(Treg)的两种亚型诱导性Treg(iTreg)和天然性Treg(nTreg)的影响。方法采用健康成人外周血分离获取的外周血单个核细胞(PBMC),利用磁性细胞分选法分别获取幼稚T细胞和nTreg。培养阶段将细胞分为3组:对照组(幼稚T细胞加入白细胞介素-2培养)、iTreg组(幼稚T细胞加入白细胞介素-2和转化生长因子-β培养)和nTreg组(nTreg加入白细胞介素-2培养)。每组再分为3个亚组:未处理亚组、scramble亚组和miRNA-155拮抗剂亚组(每亚组3个孔)。采用低密度芯片分析方法检测3组中的未处理亚组细胞中miRNA-155的基因表达水平。采用流式细胞术检测3组中各亚组细胞的表面标志物CD25、Foxp3、CD127水平。采用流式细胞术检测3组中各亚组细胞的CD4+CD25+Foxp3+SOCS1+Treg比例;采用流式细胞术检测3组中各亚组细胞的Treg抑制功能。结果与对照组和iTreg组比较,nTreg组细胞的miRNA-155表达水平明显降低,差异有统计学意义(均为P<0.05)。与对照组和iTreg组比较,nTreg组的SOCS1表达水平明显升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。加入miRNA-155拮抗剂后并未导致Foxp3、CD127和CD25等Treg重要表面标志物发生明显的变化。与对照组和iTreg组比较,nTreg组的SOCS1表达水平明显升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。iTreg组中的未处理亚组细胞miRNA-155表达水平较低,而拮抗剂抑制其表达之后(miRNA-155拮抗剂亚组),能够使其SOCS1表达升高。iTreg组中,与未处理亚组比较,miRNA-155拮抗剂亚组的Treg抑制功能在1∶8、1∶16、1∶32的比例时,显示出了更强的抑制功能(均为P<0.05)。结论体外拮抗miRNA-155对nTreg的抑制功能无明显影响,但是能够增加iTreg的SOCS1表达水平和体外抑制功能。
- 范烨陆云杰鲁皓张峰李国强吕凌
- 关键词：调节性T细胞
- 再论活体肝移植被引量：4
- 2003年
- 王学浩李国强
- 关键词：活体肝肝移植免疫抑制剂供体急诊
- 活体肝移植的历史、现状和发展前景被引量：9
- 2004年
- 20世纪70年代以来,供肝匮乏一直是影响肝移植深入发展的世界性难题.在欧美国家,由于供肝来源严重不足,每年只能有1/5～1/4的患者能获得移植的机会;在尚未制定"脑死亡法"的国家,供肝缺乏的矛盾更加突出,每年数以万计的患者在等待供肝的过程中死亡或病情加剧.
- 王学浩李国强
- 关键词：活体肝移植伦理学
- 活体肝移植围手术期处理被引量：9
- 2003年
- 目的 总结活体肝移植围手术期处理的经验。方法 对该院 2 0 0 1年 1月至 2 0 0 2年 12月完成的 15例次(13例 )活体肝移植围手术期的处理情况进行回顾性分析。结果 所有病例手术均获成功。 13例供体术后均顺利康复 ,除 1例在手术后 1个月因拔除T管发生胆瘘外 ,其余均未出现严重并发症 ;受体生存率为 92 .3 % (12 /13 ) ,已健康生存 2个月～ 2年 ;移植物存活率为 86.7% (13 /15 )。 1例成人肝豆状核变性患者于术后 72d死于不可逆转的严重排斥反应。术后并发肝动脉血栓形成 2例 ,另 1例再次行减体积肝移植 ,1例再次行全肝移植 ,均获长期生存 ;发生严重排斥反应 1例 ,ARDS 2例 ,细菌和 (或 )病毒感染 6例 ,大量胸腔积液 7例 ,胆瘘 1例。结论 围手术期处理是活体肝移植术的关键之一 ,完善的围手术期处理是肝移植成功的必要条件。
- 李国强王学浩李相成张峰钱建民孔连宝张浩成峰孙倍成
- 关键词：活体肝肝移植急诊围手术期
