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人类精子发生相关基因表达谱系的构建及功能研究: 沙家豪周作民李建民林敏朱虎黄晓燕王晖尹岚岚陆丽霍然; 2000年4月1日～2003年12月20日，由国家重大基础研究“973”规划、2项国家自然科学基金、江苏省重点项目基金、江苏省教育厅、江苏省计划生育委员会等资助，进行了研究。人类精子发生是一个极其复杂的由多基因参与时空和...; 关键词：; 关键词：精子发生基因组学基因表达细胞谱系

假两性畸型小鼠睾丸胆固醇侧链裂解酶mRNA的异常表达被引量：1: 1998年; 为了解假两性畸型（Ｔｆｍ）小鼠睾丸胆固醇侧链裂解酶（Ｐ４５０ｓｃｃ）ｍＲＮＡ的水平及影响其转录的机理，用反转录－多聚酶链反应比较了５ｄ、２０ｄ、２５ｄ和３０ｄ正常小鼠、Ｔｆｍ小鼠及３０ｄ手术隐睾小鼠睾丸Ｐ４５０ｓｃｃ的ｍＲＮＡ水平，正常小鼠在５～２０ｄ时，Ｐ４５０ｓｃｃｍＲＮＡ水平较低，从２５ｄ起明显增高，至３０ｄ时ｍＲＮＡ水平是５ｄ时的７５倍；Ｔｆｍ小鼠在５ｄ时，Ｐ４５０ｓｃｃｍＲＮＡ水平稍高于正常小鼠，但随后直至３０ｄ其水平未见明显增高，在３０ｄ时，Ｐ４５０ｓｃｃｍＲＮＡ总量低于正常小鼠１／１０；３０ｄ手术隐睾小鼠的Ｐ４５０ｓｃｃｍＲＮＡ水平低于正常３０ｄ小鼠１／２，高于Ｔｆｍ小鼠５倍。结果提示，２５ｄ的Ｌｅｙｄｉｇ细胞功能的形成需要受体介导的雄激素作用，而Ｔｆｍ小鼠由于编码雄激素受体基因突变，间接导致青春期Ｐ４５０ｓｃｃｍＲＮＡ的低水平。; 沙家豪周作民王黎熔林敏朱虎; 关键词：P450SCC MRNA 假两性畸形睾丸胆固醇

精子发生相关基因DYS1的分析被引量：6: 1998年; 用ＰＣＲ方法检测了核型正常（４６，ＸＹ）的９５例无精子症患者和３５例严重少精子症患者基因组ＤＮＡ中的ＤＹＳ１，发现４例无精子症患者有ＤＹＳ１的丢失，严重少精子患者中发现３例有ＤＹＳ１的丢失。结果表明：应用ＰＣＲ法检测ＤＹＳ１基因片段是切实可行的，对无精子症和严重少精子症患者的病因诊断具有一定的应用价值。; 周作民沙家豪林敏王黎熔周亚东朱虎; 关键词：无精子症聚合酶链反应

运用cDNA芯片鉴定人睾丸新的与发育相关的选择性剪接体: 前体RNA的选择性剪接是增加蛋白质多样性的一种重要的调节机制。在睾丸,选择性剪接尤为重要,因为生殖细胞扩增和分化需要许多细胞变化和调节步骤。为了鉴定新的睾丸发育相关的选择性剪接体,我们用33P标记的胚胎睾丸、成人睾丸和成...; 黄晓燕陆丽徐珉肖俊华朱虎李建民周作民沙家豪; 文献传递

DAZ及DAZH基因与精子发生的相关性分析被引量：8: 1998年; ＤＡＺ基因（ｄｅｌｅｔｅｄｉｎａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ）是无精子因子（ＡＺＦ）的重要候选成分，它的缺失可致无精子或严重少精子症。人第３号染色体上存在着ＤＡＺ的同源基因ＤＡＺＨ（ＤＡＺｈｏｍｏｌｏｇｕｅ），为探讨ＤＡＺ和ＤＡＺＨ基因在精子发生中的作用，我们用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测了６６名正常生育男性和９０例原发性不育男性基因组ＤＮＡ的ＤＡＺ、ＤＡＺＨ基因。结果：原发性不育男性中１２例ＤＡＺ缺失（无精子症８例，严重少精子症４例）；正常男性ＤＡＺ无一缺失；在正常男性和不育男性中均有ＤＡＺＨ缺失。结果进一步证实ＤＡＺ为ＡＺＦ的候选成分，而ＤＡＺＨ基因与精子发生似无直接的相关性。; 郑英周作民王黎熔林敏朱虎沙家豪; 关键词：精子发生 DAZ基因聚合酶链反应

精子发生相关基因的克隆及功能研究: 哺乳动物的精子发生是一个极其复杂的过程.在曲精小管中的生精细胞经过漫长的分化过程,最终生成精子.生精过程中发生了许多生物学的变化,如精原细胞的自我更新,精母细胞的减数分裂和精子细胞的变形.精子发生是成年睾丸的一项重要的功...; 朱虎; 关键词：CDNA微阵列精子生成精子发生; 文献传递

荧光PCR在男性不育相关DAZ基因检测中的运用被引量：2: 2000年; 以带有荧光标记的SpectrumOrange dUTP作为材料 ,应用荧光PCR技术诊断男性精子发生障碍患者外周血DNA中的DAZ基因 ,证实DAZ基因Sy2 5 4片段的缺失与无精症和少精症存在联系 ,为运用分子技术诊断DAZ基因异常等男性不育疾病提供了一种新的方法。该方法可用于临床检测 ,稳定可靠 ,对实验人员更为安全。; 郭金虎王黎熔朱虎林敏周作民沙家豪; 关键词：不育症 DAZ基因

人睾丸发育/精子发生表达谱系的构建: 成年和胚胎人睾丸差异表达基因的筛选和研究对于发现与睾丸发育,特别是精子发生相关的新基因有重要意义。本研究构建了人睾丸 cDNA 表达芯片,并用于人睾丸发育/精子发生相关基因的筛选。首先,从人睾丸 cDNA 文库中随机挑选...; 周作民沙家豪李建民林敏周亚东王黎熔祝辉朱虎; 关键词：精子发生睾丸发育 UNIGENE; 文献传递

无精子症配偶宫颈粘液内的抗精子抗体分析: 1998年; 应用ＥＬＩＳＡ方法检测宫颈粘液中的抗精子抗体，４００例有精子男子配偶中９２例为抗精子抗体阳性（２３％），在２００例无精子症患者配偶中，４２例为抗精子抗体阳性（２１％），两组相比无显著性差异。; 周作民林敏王黎熔周亚东朱虎祝辉沙家豪; 关键词：无精子症抗精子抗体宫颈粘液

表达人泛素样修饰子基因细胞株的构建及其鉴定被引量：1: 2004年; 目的:构建人泛素样修饰子(hUBL)基因的逆转录病毒载体并转染293T细胞,以探讨其生物学功能。方法:将hUBL克隆到原核表达质粒PET28a中,构建重组质粒PET28a-hUBL,转化BL21菌,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。用其纯化蛋白免疫小鼠,获得多克隆抗体。重组蛋白用Western blot.鉴定。将hUBL基因克隆到逆转录病毒质粒中并转染293T细胞,用免疫组化染色法鉴定hUBL基因的表达。结果:hUBL在大肠杆菌中获得高效表达,并纯化了hUBL-PET28a的融合蛋白,以此为抗原制备了高效价的抗hUBL蛋白的小鼠多克隆抗体。免疫组化染色表明,hUBL重组逆转录质粒可在293T细胞中高效表达hUBL蛋白。结论:成功地构建了hUBL重组逆转录病毒载体,使得其在293T细胞中表达,获得稳定表达的细胞株。; 鲁可可朱虎胡艳秋袁娲周作民沙家豪李建民; 关键词：蛋白表达逆转录病毒载体 293T细胞

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朱虎