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富含RNA酶组织总RNA提取方法的改良被引量：7: 2005年; 目的:简化富含RNA酶组织RNA的抽提方法. 方法:健康SD大鼠10只,随机分成液氮组及改良组,每组5只,用乙醚麻醉后,分别取胰腺组织约50 mg,液氮组组织迅速放入液氮中,改良组组织放入一预装RNAguard 100μL的1.5 mL EP管中,放入-70℃冰箱保存.液氮组将胰腺组织从液氮中取出,立即放入预装适量液氮的研钵中迅速研磨至粉末(研磨过程中始终保持研钵内有适量液氮),移入另一1.5 mL EP管中,加入1 mL Trizol, 按Trizol法提取总RNA;改良组取眼科剪在酒精灯上消毒后冷却,从-70℃冰箱中取出冻存的组织,在冰盒上,加入1 mL Trizol,用眼科剪迅速剪切3 min(剪切过程组织不解冻),剧烈振荡混匀30 s,以后步骤按Trizol法. 结果:改良法抽提RNA的效果与液氮研磨法无显著差异(P>0.05),但方法简单方便. 结论:改良法提取RNA简单方便,结果稳定。; 张传仓刘卫鹏朱德新杜江封志纯; 关键词：酶组织胰腺组织抽提方法冰箱保存消毒后

X-连锁淋巴细胞异常增生症2例报告并文献复习被引量：2: 2005年; 目的:通过报告一家系中2例X-连锁淋巴细胞异常增生症(X LP)患儿,对X LP临床表现及诊断等进行初步研究。方法:根据患者的病史、症状、血清学检查、肝脏及肠系膜淋巴结活组织病理检查结果,结合文献进行综合分析。结果:两患儿兄1岁2个月,弟1岁5个月发病,以发热起病,继而出现淋巴结、肝脾肿大,肝功能受损,肝脏穿刺病理检查提示E B病毒(±),淋巴结活检为慢性淋巴结炎伴有E B病毒感染。两患儿入院后均给予抗病毒、抗感染治疗及化学治疗,但病情均无缓解,逐渐出现进行性贫血、肝功能衰竭、肝性脑病,在起病40d左右死于多器官功能衰竭。两兄弟均诊断为慢性E B病毒活动性感染,X LP。结论:两兄弟最终死于E B病毒感染引起的一种少见的通常是致命的遗传性疾病———X LP。; 朱德新常平封志纯; 关键词：X-连锁文献复习慢性淋巴结炎肝功能受损进行性贫血 XLP

X-连锁淋巴细胞异常增生症两例被引量：2: 2005年; 朱德新常平封志纯; 关键词：压痛异常增生入院咽部充血皮肤粘膜

恙虫病东方体Karp株相对分子质量为47蛋白基因的克隆与表达: 2005年; 目的了解恙虫病东方体Karp株相对分子质量为47蛋白的表达,检测其抗原性和免疫原性。方法采用PCR扩增恙虫病东方体Karp株相对分子质量为47蛋白成熟肽全基因序列并TA克隆,酶切PCR产物构建pGEX-47原核表达质粒,转化BL21,IPTG诱导表达相对分子质量为47重组蛋白,并检测其抗原性及免疫原性。结果1.扩增PCR产物约1300bp,测序结果与相对分子质量为47蛋白基因序列相同;2.构建原核表达质粒pGEX-47,纯化的重组蛋白SDS-PAGE分析在相对分子质量为47处,薄层扫描分析表达率为15.8%;3.Dot blot分析显示其有抗原性,小鼠免疫实验证实其有免疫原性。结论扩增相对分子质量为47蛋白的成熟肽全基因序列,在原核细胞得到表达,表达产物具有抗原性和免疫原性。; 常平朱德新杜江封志纯; 关键词：恙虫病蛋白表达

人脐带血间充质干细胞体外诱导分化为神经元样细胞的可行性被引量：8: 2006年; 目的探讨人脐带血来源间充质干细胞(MSCs)在体外诱导分化为神经元样细胞的可行性及条件。方法采用Fi- coll-Paque(1.077 g/mL)分离液密度梯度分离人脐带血中MSCs,体外扩增纯化后,二甲基亚砜、巯基乙醇及丁羟茴醚等试剂诱导其向神经细胞分化,显微镜下观察,细胞免疫化学法鉴定。结果诱导后脐血MSCs具有典型神经元形态细胞,免疫细胞化学显示神经丝蛋白(NF-M)染色呈强阳性,占(81．86±4．06)％;Nestin染色呈阳性细胞占(39．99±4．60)％;GFAP染色阴性。结论人脐带血MSCs在体外培养及诱导条件下可定向分化为神经元样细胞。; 王斌洪小杨杜江朱德新田兆方封志纯; 关键词：胎血间充质干细胞诱导分化人脐带血神经元样细胞体外诱导分化

X-连锁淋巴细胞异常增生症一个中国人家系的临床和基因研究被引量：4: 2007年; 目的证实中国人 X-连锁淋巴细胞异常增生症(XLP)发病及其遗传规律。方法临床研究对象为先证者双亲家族三代成员共14人;回顾分析其中发病者的住院病史;现场询问无病者的生长发育史、既往史,进行体格检查,并建卡追踪。基因研究对象为先证者同胞姐姐、弟弟和双亲共4人,提取单个核淋巴细胞基因组 DNA,PCR 扩增获得 SH2D1A 基因片段,单链构象多态性分析(SSCP)检测获得发生突变的外显子片段,纯化后测序,检测基因突变情况。结果先证者及其胞兄发生伴病毒相关性噬血细胞综合征(VAHS)的致死性传染性单核细胞增多症(IM),均于病程40 d 左右死亡。基因分析结果显示:先证者之胞弟 SH2D1A 基因 cDNA 第462位核苷酸 C 碱基突变为 T 碱基,形成终止密码 TGA,随后临床确诊为朗格罕细胞组织细胞增多症(LCH)。先证者之母亲在SH2D1A 基因同样部位为 C 碱基和 T 碱基的杂合子。先证者之父和胞姐未发现 SH2D1A 基因突变,他们及其家族其他成员无类似病史。结论 (1)先证者及其胞兄弟可临床诊断为 XLP 患者。(2)先证者之胞弟可明确诊断为 XLP 患者,LCH 可能也是 XLP 的一种新的临床表型。(3)先证者之母亲为突变基因的携带者。此家族 XLP 发病符合 X 性连锁隐性遗传规律。(4)本研究建立的 SH2D1A 基因检测分析方法可适用于我国 XLP 的诊治和研究。; 朱德新杜江兰和魁余力封志纯; 关键词：淋巴组织增殖性疾病爱泼斯坦巴尔病毒感染

两种连续血液净化置换液的比较被引量：17: 2005年; 目的探索及评估一种更理想的置换液配方。方法将两种自配方和使用方法与Port配方进行比较,分动物实验和临床观察两部分,比较其在连续血液净化(CBP)中对电解质、渗透压及酸碱平衡维持的优劣。结果两种自配方的葡萄糖浓度、总分子浓度分别为13.8mmol L、307.3mmol L,比Port配方的59.1mmol L、351mmol L更接近生理状况;动物实验显示自配方组3h血糖、血钙浓度分别为(7.2±0.7)mmol L、(7.4±0.8)mmol L及(2.3±0.2)mmol L、(2.3±0.5)mmol L,明显好于Port方组的(14.2±1.0)mmol L、(1.8±0.2)mmol L(P<0.01);治疗中Port方组渗透压显著上升[由(298.0±8.0)mOsm L至(317.0±8.0)mOsm L,P<0.05],自配方组无显著变化;临床资料也显示了相似的变化趋势;自配方2组使用更方便。结论两种自配方在血糖、血钙及渗透压调控方面较优于Port方,其中自配方2在易操作性方面又优于自配方1,似有进一步验证和应用的价值。; 常平朱德新陶少华胡艳群封志纯; 关键词：连续血液净化葡萄糖浓度酸碱平衡生理状况血钙浓度

连续血液净化治疗先天性代谢缺陷病重症有机酸血症被引量：8: 2004年; 目的　分析、评价连续血液净化 (continuousbloodpurification ,CBP)对先天性代谢缺陷病 (inbornerrorsofmetabolism ,IEM )重症有机酸血症的治疗效果 ,探讨其治疗机制。方法　用BaxterBM 2 5机对 9例IEM重症有机酸血症患儿行CBP治疗 ,对比治疗前后血气、生化值 ,并比较症状、体征改善情况。结果　 9例患儿入院时 pH值 (6 87± 0 2 5 )、BB(1 6± 0 0 8)mmol/L、SB(4 0± 0 5 8)mmol/L、BE(- 2 6 1± 2 80 )mmol/L、乳酸 (15 2± 3 6 4 )mmol/L ,血氨 (2 87 5 3± 132 4 3) μmol/L ,呈重度代谢性酸中毒。经 1～ 2次 ,9～ 32hCBP治疗 ,患儿症状、体征好转 ,酸碱平衡部分纠正 ,pH(7 33± 0 18)mmol/L、BB(18 0± 2 5 6 )mmol/L、SB(19 1± 2 2 5 )mmol/L、BE(- 3 4± 1 6 2 )mmol/L、乳酸 (3 1±0 5 5 )mmol/L ,血氨 (39 2 1± 2 2 85 ) μmol/L ,较治疗前显著好转。结论　临床观察提示。; 常平朱德新胡艳群封志纯曾其毅; 关键词：连续血液净化连续静脉-静脉血液滤过有机酸血症

人脐带血间充质干细胞体外分离培养研究被引量：7: 2005年; 目的:探讨人脐带血来源间充质干细胞体外分离及培养方法。方法:采用F ico ll-paque(1.077 g/m l)分离液密度梯度离心法结合直接贴壁分离人脐带血单个核细胞中间充质干细胞(M SC s),20%FBS/DM EM培养,培养至48 h换液并将其上清加入另一培养皿继续培养。观察2个时期细胞贴壁情况;应用流式细胞仪检测各时期细胞。结果:密度梯度法分离来脐血单个核细胞进行培养,可观察12 h即可见少量细胞贴壁生长,绝大部分M SC s在96 h内完成贴壁,经传代纯化第1、2个48 h贴壁细胞均可培养出形态呈较均一长梭形细胞。流式细胞仪检测:单个核细胞中CD44+细胞比例占7.1%、CD34+占28.9%,而在第1个48 h贴壁细胞CD44+、CD34+比例分别占47.2%、6.7%;而第2个48 h贴壁细胞CD44+、CD34+分别占53.3%、4.6%。结论:人脐血间充质干细胞能在体外分离培养,贴壁细胞稳定表达M SC s相关抗原。; 洪小杨王斌杜江朱德新封志纯; 关键词：间质干细胞细胞分离

X-连锁淋巴细胞异常增生症一个中国人家系的临床和基因研究: 目的:证实国人X-连锁淋巴细胞异常增生症(XLP)发病及其遗传规律。方法:临床研究对象为行先证者双亲家族三代成员共22名;回顾分析其中发病者的住院病史文书;现场询问无病者的生长发育史、即往史,进行体格检查,并建卡追踪。基...; 朱德新杜江兰和魁余力封志纯; 文献传递

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