曾伟伟
- 作品数：137 被引量：215H指数：11
- 供职机构：中国水产科学研究院珠江水产研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家现代农业产业技术体系建设项目公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 草鱼呼肠孤病毒HZ08株VP4蛋白多克隆抗体的制备及其特性分析
- 目的：表达草鱼呼肠孤病毒(GCRV)HZ08株VP4蛋白及制备VP4蛋白高效价多克隆抗体并对其特性进行初步分析。方法：采用PCR方法扩增草鱼呼肠孤病毒HZ08株s6基因(表达VP4蛋白)部分节段，经BamHI和Xho I...
- 曾伟伟王庆刘宝芹刘永奎石存斌吴淑勤
- 关键词：草鱼呼肠孤病毒蛋白基因多克隆抗体
- 一株Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒强毒株的分离鉴定及全基因组序列分析
- 2013年7月份,从湖南株洲市采集的具有典型草鱼出血病症状的草鱼样品,取临床症状明显病鱼肝、脾和肾组织,经研磨、过滤除菌处理后接种草鱼吻端成纤维细胞(PSF).接种后,PSF细胞未出现明显细胞病变;感染细胞固定后经电镜观...
- 曾伟伟王英英尹纪元李莹莹任燕石存斌刘春王庆
- 关键词：草鱼出血病呼肠孤病毒全基因组序列分析
- 水生呼肠孤病毒基因组研究进展被引量：4
- 2013年
- 水生呼肠孤病毒隶属于呼肠孤病毒科水生呼肠孤病毒属,可感染多种淡水或海水水生动物并造成不同程度危害,严重影响了水产养殖业健康发展。水生呼肠孤病毒基因组为分11个节段的双链RNA,推测编码12种结构多肽。论文综述了近年来水生呼肠孤病毒基因组序列测定及其应用的研究进展,为进一步了解水生呼肠孤病毒基因组的多样性,推测其编码蛋白的功能及检测方法的建立,基因工程疫苗的研制,以及抗病毒研究提供借鉴和参考。
- 殷亮王庆曾伟伟李永刚王英英石存斌吴淑勤
- 关键词：基因组
- 重组质粒pMDMcherry、其构建方法和红色荧光蛋白基因标记鮰爱德华菌的方法
- 本发明公开了一种重组质粒pMDMcherry、其构建方法和红色荧光蛋白基因标记鮰爱德华菌的方法，重组质粒pMDMcherry具有如SEQ ID NO:7所示的碱基序列。将PMDMcherry重组载体导入到鮰爱德华菌中，在...
- 刘春王芳李凯彬王庆曾伟伟石存斌
- 文献传递
- 一株鳢科鱼源弹状病毒的分离及鉴定被引量：10
- 2013年
- 为研究近来鳢科鱼类疫病频发的病因,实验对采集的患病杂交鳢病料分别从细菌学和病毒学两方面进行病原分离和鉴定。排除细菌感染的可能后,通过细胞培养技术、回归感染实验、电镜技术、分子生物学技术等进行病毒学分析,最终分离到一株弹状病毒,命名为HSHRV-C1207(Hybrid Snakehead Rhabdovirus-C1207)。实验结果显示,该病毒在EPC、FHM、GSB、SFC、CIK等8种细胞中都能复制,并对其中6种细胞产生明显的细胞病变效应(CPE)。用分离的病毒进行回归感染实验,可使感染的杂交鳢复制出自然发病鱼的相同症状,且死亡率达90%。感染病料组织液的EPC细胞固定后经电镜观察,发现细胞质内有大量子弹状病毒聚集,直径约60 nm,长度约为160 nm,形态和排列方式与已报道的鱼类弹状病毒相似。参考OIE中传染性造血器官坏死病毒(IHNV)、病毒性出血性败血症病毒(VHSV)、鲤春病毒血症病毒(SVCV)的检测引物及根据乌鳢弹状病毒(SHRV)、鳜鱼弹状病毒(SCRV)、比目鱼弹状病毒(HIRRV)的G蛋白基因设计特异性引物,分别对自然发病病料组织、接种病料组织的细胞进行RT-PCR扩增,仅针对SCRV的引物能扩增出大小约350 bp的片段。对HSHRV-C1207株的G基因进行序列测定和分析,结果表明其核苷酸序列同SCRV和SHRV的同源性分别为93.8%和20.4%,推导的氨基酸序列同源性分别是93.7%和18.3%。用G基因推导氨基酸序列与其它弹状病毒的G蛋白进行系统进化树分析,表明该毒株与水泡性病毒属聚为一支,其中与SCRV的亲缘关系最近,而与属于诺拉弹状病毒属的SHRV相距甚远,可能为SCRV的变异株或一个新的毒株。
- 曾伟伟王庆王英英刘春谭爱萍石存斌吴淑勤
- 关键词：杂交鳢弹状病毒
- 一株梭鲈源无乳链球菌的分离、鉴定及分子分型分析被引量：6
- 2018年
- 为查明梭鲈(Lucioperca lucioperca)凸眼病病原,从患病梭鲈病灶眼、肝、脾和肾分离纯化病原菌,进行了生理生化特性测定及16S rRNA基因序列分析,并开展人工感染试验,测定其血清型及MLST分型,并利用纸片扩散法进行药敏特性分析。结果显示:分离菌株(命名为SL1701株)为本次引发梭鲈病害的致病菌,Ib-ST261型。回归感染实验证实,分离得到的细菌SL1701对健康梭鲈具有非常强的致病性,4.5×105CFU/m L时可使80%受感染梭鲈死亡,并可复制出自然发病鱼的症状。菌株SL1701革兰氏染色为阳性链球菌,γ溶血,生理生化特性与普通无乳链球菌基本一致,16S rRNA基因序列与无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)同源性最高,综合判定分离菌株为无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)。药敏试验结果显示:分离菌株SL1701对氟苯尼考、氟罗沙星等17种抗生素高度敏感,对青霉素、磷霉素等8种抗生素耐药。结果表明,分离菌株SL1701为Ib-ST261型无乳链球菌,养殖时可选用氟苯尼考及氟罗沙星等药物进行防控。
- 赵长臣江小燕江小燕张德峰刘春花曾伟伟张德峰罗霞
- 关键词：RRNA
- 一种便于排污的鱼缸
- 本发明公开了一种便于排污的鱼缸，其包括缸体，所述缸体的底壁整体向下凹陷，且在凹陷处设有排水孔，所述排水孔设有阀门机构。本发明的缸体底壁整体向下凹陷，并在凹陷处设置排水孔，这样的话，在养殖鱼类过程中所产生的污物就可以沉积并...
- 李凯彬刘春吴淑勤王芳王庆石存斌常藕琴梁慧丽曾伟伟王英英马必勇林韶丰
- 草鱼呼肠孤病毒HZ08株S4基因序列分析被引量：4
- 2012年
- 草鱼呼肠孤病毒HZ08株是本实验室从患出血病草鱼体内分离到的一个新毒株,已完成部分基因序列的分析,其氨基酸序列的同源性和873株相比,仅为20%～30%之间。因序列差异较大,无法通过设计特异性引物来扩增和分析其基因序列,采用单引物扩增技术,对HZ08株S4基因进行序列分析表明:S4全长为2263 bp,最大的ORF编码717个氨基酸,推导出其表达的蛋白约为79 kDa。正如其他基因节段,基因末端也含有保守碱基序列5'(GUAAUUU…UUCAUC),3'。S4基因推导的氨基酸序列与同宿主的其他呼肠孤病毒的非结构蛋白NS1同源性最大,其次是和哺乳动物正呼肠孤病毒的非结构蛋白mu-NS以及禽呼肠孤病毒非结构蛋白NS1同源性较大,表明S4可能表达细胞骨架相关蛋白。基于S4推导出的氨基酸序列构建的系统进化树HZ08株单独作为一个分支,与同宿主的其他呼肠孤病毒亲缘关系比较近,而与其他呼肠孤病毒则相对较远。这提示HZ08株可能是多个毒株的遗传信息经长期的遗传进化而得,综合其它已知序列信息,推测HZ08株可能为呼肠孤病毒的一个新成员。
- 曾伟伟王庆张超张乐生刘宝芹刘永奎石存斌吴淑勤
- 关键词：草鱼呼肠孤病毒遗传进化树
- 检测罗非鱼血清中抗罗湖病毒IgM特异性抗体间接ELISA方法的建立及应用
- 前期研究表明罗非鱼湖病毒(Tilapia lake virus,TiLV)基因节段8(S8)编码蛋白是一种具有高免疫原性的结构蛋白,大小约为20kD,暂命名为VP20.目前,由于缺乏TiLV免疫原性抗原和易获取的抗罗非鱼...
- 曾伟伟胡虎子王英英王庆尹纪元李莹莹吴杰兴高彩霞张德峰刘春任燕石存斌
- 关键词：免疫球蛋白M
- 剑尾鱼脑细胞系的建立及细胞色素P4501A的诱导表达被引量：2
- 2013年
- 为了构建剑尾鱼脑细胞系并探讨其细胞色素P4501a(CYP1A)基因的诱导效应,实验通过胰蛋白酶消化法对剑尾鱼脑组织进行体外培养,经连续继代培养,建立了可稳定传代的脑细胞系,命名为SFB。SFB最适培养液为含有15%胎牛血清(FBS)的DMEM/F-12和L-15等比混合培养液,培养条件为27℃,5%CO2。生长特性研究表明,第65代细胞的群体倍增时间为43.048h,显示出旺盛的生长和分裂能力。染色体分析发现,培养细胞的染色体众数为48条,SFB核型公式为2n=2st+46t,臂指数(NF)=48,与剑尾鱼一致。诱导实验表明,SFB在10-8～10-5mol/L的苯并(a)芘诱导下,CYP1A mRNA表达量显著提升,且表现出良好的剂量效应关系。脑细胞系的建立为剑尾鱼的毒理学评价研究提供了便利,也为其系统的生态毒理学应用打下基础。
- 王英英李凯彬刘春王庆曾伟伟石存斌吴淑勤
- 关键词：剑尾鱼
