施鑫鹤
- 作品数：25 被引量：56H指数：5
- 供职机构：兰州大学第二医院更多>>
- 发文基金：甘肃省科技支撑计划甘肃省自然科学基金教育部“春晖计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗菌肽MSI-78基因在大肠埃希菌DH5α中的克隆及阳性重组体鉴定
- 2009年
- 目的研究抗菌肽MSI-78基因的克隆及鉴定方法,为抗菌肽MSI-78基因的表达及抗菌活性研究奠定基础。方法根据MSI-78氨基酸序列及大肠埃希菌(ECO)偏爱密码子,推出MSI-78编码基因,化学合成获得MSI-78基因,ECORⅠ和PstⅠ消化后与pUC18载体连接并转化大肠埃希菌DH5α,α-互补筛选阳性重组菌,单酶切、双酶切、PCR鉴定阳性重组体。结果通过ECORⅠ单酶切、ECORⅠ和PstⅠ双酶切抽提的阳性重组质粒,证实阳性重组质粒中含有抗菌肽MSI-78基因,特异性引物PCR扩增也证实阳性重组质粒中含有抗菌肽MSI-78基因,说明MSI-78基因成功在大肠埃希菌DH5α克隆。结论MSI-78基因的克隆为后期的表达、纯化及生物活性研究奠定了基础。
- 施鑫鹤王应芳耿哲
- 关键词：抗菌肽基因克隆
- C反应蛋白和纤维蛋白原水平与急性缺血性脑卒中的相关性研究
- 2017年
- 探讨C反应蛋白(hs-CRP)、纤维蛋白原(Fib)与急性缺血性脑卒中的相关性。选取就诊于兰大二院发病72h内入院的124例急性缺血性脑卒中患者,依据NIHSS评分将入组患者分为轻、中、重度3组,另选取年龄、性别相匹配的健康体检者40例为对照组,分析各组间hs-CRP和Fib水平,探讨hs-CRP、Fib与急性缺血性脑卒中患者神经功能损伤程度的相关性。(1)急性脑梗死组hs-CRP和Fib水平均高于对照组(P<0.01);(2)轻、中、重度脑梗死组hs-CRP和Fib水平依次升高,组间两两比较差异存在统计学意义(P<0.05);(3)hs-CRP和Fib水平与神经功能缺损程度均呈正相关(r=0.54,P<0.05;r=0.38,P<0.05)。hs-CRP、Fib水平可反映急性缺血性脑卒中患者的神经功能损伤程度。
- 施鑫鹤闫俊
- 关键词：急性缺血性脑卒中C反应蛋白纤维蛋白原神经功能缺损评分
- RNA干扰下调骨肉瘤Saos-2中MBP-1表达及增殖转移凋亡的影响
- 施鑫鹤耿哲施星臣马克君朱宏文任雯周雅丽李菲菲
- 该研究课题通过RNA干扰下调骨肉瘤Saos-2细胞中抑癌基因MBP-1的表达，已经成功获得了一些确定在骨肉瘤细胞增殖、转移与凋亡方面的实验结果。明确了MBP-1对肿瘤细胞的增殖、转移及凋亡等的影响。进一步揭示MBP-1在...
- 关键词：
- 关键词：骨肉瘤细胞增殖分子生物学
- TNF-α及其受体基因多态性与类风湿性关节炎易感性和血清学指标相关性分析被引量：7
- 2012年
- 目的探讨TNF-α及其受体基因多态性与中国西北地区汉族人群类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis,RA)易感性及其血清学指标的相关性。方法利用高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)技术对452例RA患者和匹配的356例正常对照人群的TNF-α及其受体6个SNP位点(TNFA-857C>T、TNFA-863C>A、TNFA-308G>A、TNFA-238G>A、TNFR1-383A>C、TNFR2-exonT>G)的基因多态性进行病例-对照研究。此外,采用临床常规方法测定RA患者的抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)和类风湿因子(RF),分析其与6个SNP位点的相关性。结果 TNFA-308GA和-863CA基因型在RA病例组和正常对照组中频率分布差异有统计学意义(P=0.001,P=0.002),TNFA-238GA、TNFA-238AA及TNFR2-exonTG、TNFR2-exonGG基因型在两组间频率分布差异无统计学意义(P=0.701,P=0.999,P=0.825,P=0.330)。由TNFA 3个位点构成的单倍型-238G/-308A/-863C(GAC)、-238G/-308G/-863A(GGA)和-238G/-308G/-863C(GGC)在两组间的频率分布差异均有统计学意义(P=0.016,P=0.033,P=0.023)。TNF-α及其受体基因多态性与RA血清学指标(RF、anti-CCP)未见明显相关性。结论 TNFA-308GA和TNFA-863CA与中国西北地区汉族人群RA易感性相关;TNFA单倍型GAC、GGA和GGC与RA易感性相关;TNF-α及其受体基因多态性与RA患者血清学指标未见明显相关性。
- 郭心灵尤崇革王丽萍马克君周雅丽施鑫鹤李菲菲郜莉娜
- 关键词：类风湿性关节炎疾病易感性血清学
- 基质金属蛋白酶-7和组织型金属蛋白酶抑制因子-1在胃癌中的表达及意义被引量：1
- 2009年
- 胃癌的发生、发展是一个多因素、多步骤的过程，涉及到癌基因、抑癌基因表达的失调，细胞凋亡、细胞运动和迁移调控的异常等多方面机制。细胞外基质和基底膜降解是恶性肿瘤浸润和转移的关键环节，基质金属蛋白酶是人体内降解细胞外基质（extracel clular matrix，ECM）的主要酶类，在肿瘤发展等众多生理和病理过程中均发挥重要的作用。
- 施鑫鹤王应芳高才凤梁成胡雪剑
- 关键词：基质金属蛋白酶7金属蛋白酶类组织抑制剂胃肿瘤
- IL1和TNF基因启动子SNP高分辨熔解分子诊断新技术的建立及临床应用评价
- 尤崇革呼志斌王丽萍郜莉娜施鑫鹤王芳芳李菲菲
- 课题通过消化吸收国外新技术，再创新实现PCR-HRM检测反应体系酶系统和荧光染料组合的本土化，以细胞因子IL-1-511C＞T、-31T＞C和外显子+3954C＞T，IL-6-597G＞A，TNF-863C＞A、-857...
- 关键词：
- 关键词：药物基因组学基因分型方法
- 高分辨熔解技术检测类风湿关节炎患者IL-1β和IL-1Ra基因多态性
- 2012年
- 目的探讨IL-1β和IL-1Ra基因多态性与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)易感性及其血清学指标的关系。方法应用高分辨率熔解(high resolution melting,HRM)技术对452例RA患者和360例对照进行IL-1β和IL-1Ra基因多态性的病例-对照研究,并分析IL-1β和IL-1Ra基因多态性与血清学指标的相关性。等位基因频率比较采用SPSS软件,单倍型构建采用在线SHEsis软件。结果成功建立了IL-1B-511、-31、+3954和IL-1RN(rs4251961)4个位点的PCR-HRM检测方法。结果显示在女性中,IL-1B+3954位点等位基因频率在病例组和对照组之间存在有统计学差异(χ2=5.0,P=0.03),IL-1B-31位点等位基因频率和单倍型IL-1B-511*T/IL-1B-31*C/IL-1B+3954*C/IL-1RN*T(TCCT)在抗-MCV阳性组和阴性组之间存在统计学差异(χ2=5.0,P=0.02;χ2=5.3,P=0.02),单倍型IL-1B-511*T/IL-1B-31*C/IL-1B+3954*C/IL-1RN*C(TCCC)在RF、抗CCP和抗MCV 3个指标均为阳性和3指标非全阳性的2组之间存在统计学差异(χ2=5.1,P=0.02)。结论 PCR-HRM技术是一种值得推广的常规化基因分型新方法。IL-1B+3954*C与女性RA易感性相关,IL-1B-31*C和单倍型TCCT与女性抗MCV阳性相关,单倍型TCCC与女性血清学指标全阳性相关。
- 李菲菲尤崇革王丽萍呼志斌马克君周雅丽施鑫鹤郜莉娜
- 关键词：白细胞介素-1Β白细胞介素-1受体拮抗剂类风湿关节炎基因多态性
- RNA干扰下调MBP-1对骨肉瘤Saos-2细胞生物学的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨c-myc启动子结合蛋白1(MBP-1)基因沉默对人骨肉瘤Saos-2细胞生长的影响。方法实验分为3组:正常对照组(未转染骨肉瘤细胞)、阴性对照组(转染错义序列组)和沉默组(转染MBP-1 sh RNA组)。设计2条MBP-1基因的RNA干扰片段及1条阴性对照si RNA,并与p SIREN-retro Q质粒连接。将重组p SIREN-retro Q质粒通过Lipofectamine 2000脂质体转染骨肉瘤Saos-2细胞。实时PCR和Western blot分别检测MBP-1表达。CCK-8法对MBP-1沉默后骨肉瘤Saos-2细胞生长进行检测。Western blot检测对照组和沉默组cyclin D1和cyclin E的表达。结果通过PCR扩增及测序,说明已成功构建MBP-1沉默及对照重组p SIREN-retro Q质粒。实时PCR结果显示,沉默组MBP-1 m RNA相对表达量与对照组相比显著下调(P<0.05)。Western blot结果显示,沉默组MBP-1蛋白表达量与对照组相比也显著下调。CCK-8法结果表明,沉默组细胞在48、72和96 h时增殖能力均比对照组显著升高(P<0.05)。沉默组cyclin D1和cyclin E的表达显著高于对照组(P<0.05)。结论 MBP-1基因沉默后骨肉瘤Saos-2细胞生长被明显促进,为寻找骨肉瘤基因治疗新靶点打下基础。
- 施鑫鹤耿晢施星臣马克君朱宏文任雯周雅丽
- 关键词：RNA干扰
- 慢性乙型肝炎患者不同病毒载量与乙肝三系统及前S_1抗原相关性研究被引量：7
- 2010年
- 目的研究慢性乙型肝炎患者不同病毒载量与乙肝三系统及前S1抗原（Pre—S1Ag）之间的相关性分析。方法血清HBVDNA检测采用荧光定量PCR法（FQ-PCR），乙肝三系统及前S1抗原（Pre-S1Ag）检测采用ELISA法；对87例慢性乙型肝炎患者血清进行乙型肝炎病毒载量检测，以乙型肝炎病毒载量为标准，分为A组：（10^3～10^4）拷贝／mL，B组：（10^5～10^5）拷贝／mL，C组：〉10^7拷贝／mL，检测乙肝三系统及Pre～S1Ag。结果A组：（10^3～10^4）拷贝／mL，检出率最高的模式为小三阳、Pre-S-Ag（-）；B组：（10^5～10^6）拷贝／mL，检出率最高的模式为小三阳、PreS1Ag（＋）；C组：〉10^7拷贝／mL，检出率最高的模式为大三阳、Pre—S1Ag（＋）。结论乙肝三系统、前S1抗原与HBV DNA定量水平之间具有良好的相关性，能敏感地反映乙型肝炎病毒复制情况。
- 张红杨海珍施鑫鹤尤崇革石瑞芳
- 关键词：抗原DNA
- 骨肉瘤Saos-2细胞Set7/9基因沉默及基因治疗靶点构建被引量：1
- 2016年
- 目的:构建沉默的人Set7/9的真核表达载体,筛选其稳定转染的骨肉瘤Saos-2细胞株,评价干扰效果以及对骨肉瘤相关基因表达和细胞增殖的影响,为临床骨肉瘤基因治疗提供新靶点。方法:依据靶向序列,构建人Set7/9基因的sh RNA和对照载体,稳定转染骨肉瘤细胞Saos-2。应用Real-time PCR以及Western-blot方法检测其基因和蛋白质水平,确定该基因的沉默情况。结果:构建载体Set7/9-sh RNA,Real-time PCR和Western-blot结果显示,沉默后Set7/9基因和蛋白表达明显被抑制,而与其相关的Sirt1、Suv39h1蛋白表达水平提高,细胞增殖率增加。结论:沉默Set7/9基因后,上调与其相关的Sirt1和Suv39h1蛋白表达水平,Set7/9基因在骨肉瘤Saos-2细胞系中可能调控其的表达。此外,细胞增殖效率增加表明Set7/9具有抑制骨肉瘤Saos-2细胞增殖的作用。
- 施星臣耿哲施鑫鹤
- 关键词：SAOS-2细胞WESTERN-BLOT
