方宇辉 作品数:22 被引量:65 H指数:5 供职机构: 延边大学医学院附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 吉林省卫生厅课题 吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
SEB对人HaCaT细胞株S100A8和S100A9表达的影响 2019年 目的金黄色葡萄球菌肠毒素B(Staphylococcus aureus enterotoxin B,SEB)刺激HaCaT细胞后观察S100A8、S100A9、白介素-1α(IL-1ɑ)和白介素-17 (IL-17)表达的影响。进一步阐明机体组织损伤相关分子模式(damage associated molecularpatterns,DAMP)与先天免疫对AD发病的影响。方法采用MTT法检测SEB对HaCaT细胞的细胞毒性。通过蛋白免疫印迹法测定细胞内外DAMP分子S100A8、S100A9蛋白表达。用酶联免疫吸附实验检测HaCaT细胞培养液中的IL-1α、IL-17的表达情况。结果在24、48、72 h,不同浓度SEB对HaCaT细胞无毒性作用。SEB刺激组细胞内外S100A8、S100A9蛋白表达较对照组增多。在不同浓度的SEB处理下IL-1α表达水平呈上升趋势。100 ng/mL SEB刺激组较对照组相比,IL-17表达水平明显升高。结论 SEB可能通过上调DAMP分子S100A8、S100A9蛋白以及IL-1α、IL-17炎症因子的表达,参与AD的发病机制。 崔晶 金珊 金承龙 方宇辉 朱莲花 元星花 金哲虎关键词:特应性皮炎 金黄色葡萄球菌肠毒素B S100A8 S100A9 骨髓间充质干细胞与胰岛细胞共培养对胰岛功能的影响 被引量:4 2019年 背景:骨髓间充质干细胞能分泌多种生长因子并支持造血,但能否保护和修复胰岛细胞功能尚不明确。目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞与其胰岛细胞共培养对胰岛功能的影响。方法:从八九周龄的雄性SD大鼠中提取股骨骨髓,采用密度梯度离心法和贴壁培养法相结合提取骨髓间充质干细胞;另取八九周龄的雄性SD大鼠,从胆总管插管注入1 g/L胶原酶P 10 mL,剪下胰腺,采用Histopaque不连续密度梯度离心法分离与纯化胰岛细胞,在显微镜下用1 mL的pipet移液器手工挑取筛选薄膜完整的胰岛细胞。将第3代骨髓间充质干细胞与胰岛细胞进行共培养,共分为4组:对照组(单纯大鼠胰岛细胞培养)、直接共培养组(接种有骨髓间充质干细胞的培养板内加入胰岛细胞进行共培养)、间接共培养组1(利用transwell培养皿进行间接共培养)、间接共培养组2(利用骨髓间充质干细胞培养液培养胰岛细胞)。培养过程中观察胰岛形态及生长状况,在培养后第3,7,14天用ELISA法检测胰岛素分泌量。实验方案经延边大学附属医院医学伦理委员会批准。结果与结论:(1)4组之间采用方差分析,骨髓间充质干细胞与胰岛细胞共培养能明显提高胰岛素的分泌量,而且共培养第7天胰岛素分泌量达高峰;(2)在培养后第7天时,间接共培养组1的胰岛素分泌量明显高于直接共培养组,差异有显著性意义(P<0.05);(3)结果表明,骨髓间充质干细胞与胰岛细胞利用transwell培养皿进行间接共培养可以明显提高胰岛素的分泌量,而且共培养7 d效果较好。 杨慧明 俞星 方宇辉关键词:骨髓间充质干细胞 胰岛细胞 胰岛素 SD大鼠 延边朝鲜族和汉族IL-13RaI基因SNPs与特应性皮炎的相关性研究 目的探讨IL-13Ral基因单核苷酸多态性(SNPs)与延边地区朝鲜族和汉族特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)发生的相关性。方法利用SnaPshot单碱基延伸技术检测IL-13Ral基因5个SNPs(... 方宇辉 南美兰 崔正伟 杨康娟 金哲虎关键词:特应性皮炎 单核苷酸多态性 文献传递 西罗莫司软膏对小鼠特应性皮炎的治疗作用及其机制 被引量:8 2018年 目的观察西罗莫司软膏对小鼠特应性皮炎的治疗作用并探讨其作用机制。方法将36只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、0.1%西罗莫司组、0.2%西罗莫司组、0.5%西罗莫司组及他克莫司组。除正常组外,其余各组采用二硝基氯苯诱导制作特应性皮炎模型。模型组、0.1%西罗莫司组、0.2%西罗莫司组、0.5%西罗莫司组、他克莫司组从实验第15天开始,于皮损处分别涂抹不含西罗莫司的软膏基质、0.1%西罗莫司软膏、0.2%西罗莫司软膏、0.5%西罗莫司软膏及他克莫司软膏,连续涂抹14天。各组于实验第0、7、14、21、28天行皮损严重程度评分。实验第28天,观察各组皮损处临床表现及组织病理形态,眼球取血,采用ELISA法检测血清Ig E;实验第28天,取各组皮损组织,采用实时荧光定量PCR法检测IL-4、IL-5、IFN-γmRNA表达。结果 0.1%、0.2%、0.5%西罗莫司组均能降低皮损严重程度评分,改善皮损处临床表现及组织病理形态,降低血清Ig E水平,并呈剂量依赖性,以0.5%西罗莫司效果最佳。0.1%西罗莫司组皮损组织IL-4、IFN-γmRNA相对表达量均低于模型组(P均<0.05);0.2%西罗莫司组皮损组织IL-4、IL-5、IFN-γmRNA相对表达量均低于模型组及0.1%西罗莫司组(P均<0.05);而0.5%西罗莫司组皮损组织IL-4、IL-5、IFN-γmRNA相对表达量均低于模型组、0.1%西罗莫司组和0.2%西罗莫司组(P均<0.05)。结论西罗莫司软膏对小鼠特应性皮炎具有较好的治疗效果,且具有剂量依赖性和系统效应;其机制与抑制皮损组织IL-4、IL-5、IFN-γmRNA表达有关。 金文玉 方宇辉 朱莲花 高钟镐 金哲虎关键词:特应性皮炎 西罗莫司 他克莫司 小鼠 人瘢痕疙瘩成纤维细胞裸鼠荷瘤模型的建立 被引量:2 2014年 目的 建立一种简单、成功率高的人瘢痕疙瘩裸鼠荷瘤模型.方法 27只雌性BALB/c裸鼠随机分为5组,A、B、C组每组5只,在每只裸鼠腋窝下接种人瘢痕疙瘩成纤维细胞和Matrigel胶混悬液0.1 ml,细胞浓度分别为1.0×10^4个/μl Matrigel胶(A组)、3.0×10^4个/μl Matrigel胶(B组)、5.0×10^4个/μl Matrigel胶(C组).取C组成形瘤块修剪成若干个5 mm×5 mm×5 mm大小的组织块移植于D组裸鼠(8只)的腋窝皮下;E组裸鼠(4只)皮下注射100μl Matrigel胶作为对照组.A、B、C组出瘤后30 d、D组瘤块移植后30 d肉眼观察瘤体的形成过程及变化,并在第31天处死裸鼠进行组织病理学检查,分析其移植后成形的瘤体组织学变化及裸鼠的心、肝、脾、肺、肾组织的变化.结果 A、B、C组裸鼠成瘤率为100%,出瘤时间分别为(90.20±3.96)d、(61.00±2.92)d、(39.60±3.20)d.出瘤30 d时3组瘤体体积分别为(288.34±25.29) mm3、(1 370.63±105.24) mm3、(1 940.98±184.37) mm3,3组差异有统计学意义(F=138.74,P< 0.05).D组裸鼠成形瘤块移植后瘤块体积先略增大后逐渐减小,移植第14天始持续增大,8只中7只成瘤.E组裸鼠未见瘤体形成.组织病理学检查,各组瘤体的组织形态在镜下一致,与人瘢痕疙瘩组织相似,未见其他脏器组织学改变及转移瘤灶.结论 裸鼠皮下接种人瘢痕疙瘩成纤维细胞可建立瘢痕疙瘩裸鼠荷瘤模型,而且已成瘤组织修剪成一定体积再次移植于裸鼠皮下也可以建立瘢痕疙瘩裸鼠荷瘤模型. 朱莲花 万红双 金明姬 方宇辉 李周娜 金哲虎 高钟镐关键词:瘢痕疙瘩 成纤维细胞 坏疽性臁疮1例 被引量:1 2017年 1临床资料
患者男,65岁,左下肢皮疹伴痒痛1周。1周前无明显诱因左下肢出现红色皮疹。皮疹渐化脓、溃烂,伴疼痛。病程中有发热、寒战,体温最高达39.0℃。 方宇辉 金珊 金英姬 李美玲 南美兰关键词:坏疽性 臁疮 红色皮疹 左下肢 小鼠耳廓软骨细胞微囊化大鼠胰岛细胞制备软骨细胞薄膜人工生物胰对糖尿病小鼠血糖水平的影响 2019年 [目的]观察小鼠耳廓软骨细胞微囊化大鼠胰岛细胞制备软骨细胞薄膜人工生物胰对糖尿病小鼠血糖水平的影响.[方法]取8~9周龄雄性C57BL/6小鼠,在无菌条件下切取两耳并分离耳廓软骨细胞,取第2代软骨细胞备用.实验分为两组:1)取耳廓软骨细胞与500~600个胰岛细胞共同加入6 cm Hydrocell Plate中进行振荡培养5 d,制备软骨细胞薄膜人工生物胰;2)在384孔Hanging Drop Plate内放入1个胰岛细胞和5 000个软骨细胞静培养3 d,制备软骨细胞薄膜人工生物胰.将两组人工生物胰分别移植入用链脲佐菌素制作的糖尿病模型小鼠的肾被膜下,观察移植后糖尿病模型小鼠血糖水平的变化.[结果]利用两种方法制备的软骨细胞薄膜人工生物胰均可稳定地将糖尿病模型小鼠血糖水平控制在正常范围内,其中利用Hydrocell Plate培养方法制备的软骨细胞薄膜人工生物胰回收量较利用Hanging Drop Plate培养方法制备的更多,实验人员工作量更少,且利用Hydrocell plate培养方法制备的软骨细胞薄膜人工生物胰降低血糖作用较利用Hanging Drop Plate培养方法制得的更为明显.[结论]小鼠耳廓软骨细胞微囊化大鼠胰岛细胞制备的软骨细胞薄膜人工生物胰可稳定地将糖尿病模型小鼠血糖水平控制在正常范围内. 杨慧明 俞星 方宇辉关键词:胰岛细胞 小鼠 瘢痕疙瘩药物治疗研究进展 被引量:16 2016年 瘢痕疙瘩具有持续增生力,其实质是纤维组织肿瘤,不仅影响皮肤外观且其不断增生引发皮肤破溃、炎症反应,且影响身心健康。目前针对瘢痕疙瘩的治疗主要为手术、药物、激光等治疗方法,但手术后复发却严重影响治疗效果,因此药物综合治疗现在成为目前治疗热点。药物治疗一般用于小面积增生性瘢痕,目前治疗瘢痕疙瘩的药物很多,主要包括三类:第一类是细胞外基质靶向药物,第二类是细胞靶向药物,第三类是生化微环境靶向药物。本文就三种瘢痕疙瘩药物治疗的发展现状及最新药物的研究进展做一综述。 李周娜 朱莲花 方宇辉 金哲虎关键词:瘢痕疙瘩 药物治疗 慢性自发性荨麻疹与外源性凝血系统启动因子TF的关系研究进展 被引量:2 2020年 慢性自发性荨麻疹(CSU)的特征是在6周或更长的时间内,全身各部位自发地出现风团和瘙痒症状.荨麻疹的特征性症状是在皮肤肥大细胞和嗜碱性细胞被各种刺激激活后出现的,这些细胞释放几种生物活性物质,其中最重要的是组织胺.组织胺局部释放及组织胺H1受体拮抗剂(抗组织胺剂)可诱导血管舒张,增加血管通透性,刺激感觉神经末梢[1],从而导致出现红斑、丘疹和瘙痒等症状. 李岐 方宇辉 金哲虎关键词:外源性凝血系统 特应性皮炎的新型靶向治疗药物研究进展 被引量:6 2019年 特应性皮炎(AD)是慢性、复发性、炎症性皮肤病,常伴明显瘙痒,严重影响患者生活质量。传统的治疗药物往往存在许多局限性,且对中重度AD患者疗效不佳。近年来AD的新型靶向治疗药物对其目标分子具有较高的特异性,从而减少了具有广泛生物学作用的免疫抑制剂非靶点效应所引起的不良副作用。本文将对近年来用于治疗特应性皮炎的小分子拮抗剂、生物制剂、其他新型靶向治疗药物以及其相关靶点研究进展进行综述。 金文玉 朱莲花 方宇辉 高钟镐 金哲虎关键词:特应性皮炎 生物制剂 皮肤屏障 瘙痒