方孝东
- 作品数：14 被引量：78H指数：5
- 供职机构：海南大学更多>>
- 发文基金：“九五”国家科技攻关计划教育部科学技术研究重点项目海南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 通过cDNARDA法分离和识别盐藻(Dunaliella salina)盐胁迫相关基因被引量：19
- 2004年
- 采用cDNA代表性差异分析 (RDA)技术 ,对盐藻在盐胁迫时差异表达的基因进行了分离鉴定 .在分离到的 10个基因中 ,有 5个与已知基因同源 (包括叶绿素a b结合蛋白基因、蛋白磷酸酶I催化亚基基因和 3个核糖体蛋白基因 ) ,还有 5个未知功能基因则是首次在盐藻中被分离 .值得注意的是 ,所有这 5个已知基因的功能都与细胞分裂或盐胁迫有关 .结果表明 :取样时盐藻细胞仍处于恢复阶段 ,所分离到的基因对于盐藻耐盐可能具有重要意义 ;蛋白磷酸酶I的下调表达可能是盐藻调节离子平衡的一个重要过程和细胞分裂受阻的原因所在 ;盐藻减缓细胞分裂速度可能是为了减少能量消耗 ,以留出足够的能量来应对盐胁迫 ;其它 5个未知基因可能也与盐藻适应盐胁迫机制有关 .
- 方孝东黄薇林栖凤李冠一屈良鹄
- 关键词：盐藻盐胁迫
- 盐藻线粒体GIY-YIG族归巢内切酶基因受到盐胁迫时增强转录被引量：4
- 2003年
- 盐藻 (Dunaliellasalina (Chlorophyta) )极强的耐盐能力使之成为研究植物耐盐分子机制的重要模式生物 .在前期分离到的一个盐藻基因片段在盐胁迫时增强表达的基础上 ,通过RACE获得了该基因 5′端cDNA序列及部分 3′端cDNA序列 .序列分析结果表明 ,该基因是一个编码线粒体GIY YIG族归巢内切酶的Ⅰ型内含子基因 .RNase freeDNase处理及Northern杂交结果表明 ,盐藻线粒体DNA在盐处理组中可能发生了扩增 .这些结果结合前人的研究成果说明 ,该内含子基因的增强表达可能并非盐藻对抗盐胁迫的一种手段 ,而是盐藻对抗盐胁迫的副产品 .被该内含子基因插入的基因是盐藻对抗盐胁迫所需要增强表达的 .
- 方孝东林栖凤李冠一屈良鹄
- 关键词：盐藻线粒体盐胁迫
- 耐盐植物红树cDNA文库的构建
- 我们选择海岸耐盐植物红树作为基因供体,开展耐盐植物分子育种研究.将红树总DNA通过花粉管通道导入普通茄子、辣椒等作物已获得耐盐能力明显增强的后代.红树(Rhizophora apiculata)是红树群落的一种,分布于热...
- 林栖凤张帆方孝东李冠一
- 文献传递
- 用Total RNA进行cDNA RDA
- cDNA RDA是一种分离两个cDNA群体之间差异DNA片段的有效方法,具有灵敏度高、假阳性率低等优点,在分离差异表达基因研究中得到了广泛的应用.然而,当研究材料为原核生物或材料十分有限时,由于没有有效的方法纯化mRNA...
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- 文献传递
- 玉米耐盐突变体的培育及耐盐相关基因的标记定位
- 汤华林栖凤罗红丽方孝东陈银华邓用川
- 玉米是重要的粮食和饲料作物，但在盐碱地上很难获得高产。研究玉米在盐胁迫下的性状表现，建立玉米耐盐筛选的技术指标体系，对耐盐机理及分子育种研究有重要意义。该项目采用花粉管通道法，向玉米中导入耐盐植物红树的外源DNA，培育耐...
- 关键词：
- 关键词：玉米饲料作物
- cDNA RDA方法的改良及盐生植物耐盐基因的研究
- 影响农作物生长和产量的最主要因素是环境胁迫,其中又以盐胁迫和干旱胁迫最为严重.解决这一问题最直接、最有效的途径是利用基因工程手段、培育耐盐作物品种.由于盐生植物可能具有进化上与非盐生植物截然不同的信号传导途径和调节控制机...
- 方孝东
- 关键词：盐藻秋茄耐盐相关基因
- 文献传递
- 红树植物秋茄中液泡膜内在蛋白(TIP)全长cDNA的克隆和表达分析(英文)被引量：15
- 2003年
- 利用cDNA快速末端扩增 (RACE )技术获得红树植物秋茄液泡膜内在蛋白 (TIP)的全长cDNA (GenBank登录号 :AF5 2 1135 )。该cDNA全长为 1 1kb ,含有一个 75 6个核苷酸的完整开放阅读框 ,编码 2 5 2个氨基酸 ,等电点为5 77,分子量为 2 6 3kD。该氨基酸序列含有 6个跨膜区和两个高度保守的Asparagine proline alanine (NPA)基序。与冬葡萄、花椰菜、拟南芥的TIP相比 ,氨基酸的一致性达到 77%～ 79%。Northern分析表明盐分抑制该基因在红树 3个种中的表达 ,这种下调表达可能降低液泡膜水分渗透 ,有利于盐胁迫下细胞的保水。
- 黄薇方孝东林栖凤李冠一赵文明
- 关键词：红树秋茄CDNA
- 对代表性差异分析方法的改进被引量：6
- 2003年
- 对常用的代表性差异分析(RDA)方法进行了改进.利用模式系统进行的实验结果表明:改进后的RDA方法不仅保留了原有的优点,而且大大降低了实验成本,简化了实验操作,只需1周即可完成原本需要3周的实验操作,增强了该技术的实用性.
- 方孝东林栖凤李冠一
- 关键词：基因克隆差异表达基因差减杂交
- 分离差异表达基因的方法被引量：32
- 2002年
- 了解不同细胞或同类细胞在不同发育阶段、不同生理状态下的基因表达状况 ,可以为研究生命活动过程提供重要信息。以差别筛选 ,扣除杂交等基本方法为出发点 ,研究基因表达差异的方法不断完善 ,先后出现了DDRT PCR ,RDA ,SSH ,cDNA微阵列 (基因芯片 )等技术。这里着重对这些方法的优缺点及改进进行了论述和评介 ,并对技术的发展趋势进行了分析。
- 黄薇方孝东赵文明林栖凤
- 关键词：差异表达基因CDNA微阵列
- 红树的抗盐性及其在分子育种中的应用
- 土壤的盐渍化是影响农业与生态环境的一个严重问题。全世界约有土地1.3亿hm2,我国的陆地面积953.3万km2,几乎与欧洲的面积相等,居世界第三,其中33%的国土是干旱和荒漠地区。耕地总面积19.5亿亩,其中20%存在不...
- 林栖凤方孝东黄薇李冠一
- 文献传递
