徐华
- 作品数：10 被引量：9H指数：2
- 供职机构：山东省医药生物技术研究中心更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 自身抗体平行检测液相芯片及其制备方法与应用
- 自身抗体平行检测液相芯片及其制备方法与应用，属于免疫技术及临床检测技术领域。主要由微球，自身抗原，生物素化的二抗，链霉亲和素-藻红蛋白组成，所述自身抗原分别与相应的各号微球形成偶联体，以红色激光激发其球形基质上的红色分类...
- 高雪芹张华宁韩金祥徐华
- 文献传递
- 自身抗体平行检测液相芯片及其制备方法与应用
- 自身抗体平行检测液相芯片及其制备方法与应用，属于免疫技术及临床检测技术领域。主要由微球，自身抗原，生物素化的二抗，链霉亲和素－藻红蛋白组成，所述自身抗原分别与相应的各号微球形成偶联体，以红色激光激发其球形基质上的红色分类...
- 高雪芹张华宁韩金祥徐华
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- 利用APES修饰玻片制备蛋白质、DNA及脂类微阵列的方法
- 本发明公开了一种利用APES(3-氨丙基三乙氧基硅烷)修饰玻片制备蛋白质、DNA及脂类微阵列的方法，由下述方法组成：(1)将玻片分别用强碱和浓硫酸浸洗，双蒸水冲洗至玻片洁净，离心机甩干；(2)将上述洗净的玻片放入体积比为...
- 韩金祥徐华高雪芹刘毅
- 文献传递
- 制备蛋白质微阵列的玻璃表面修饰方法比较被引量：2
- 2006年
- 目的探讨用于制备蛋白质微阵列的5种不同修饰方法的玻片对蛋白质的固定能力,通过对荧光信号强度的大小以及蛋白芯片检测的灵敏度的比较确定一种蛋白质固定效果好、信噪比高的玻片。方法将系列稀释的人IgG分别点在5种不同修饰方法[包括氨基、多聚赖氨酸、3-氨丙基三乙氧基硅烷(APES)、醛基-磷酸盐缓冲液、醛基-H2O]修饰的玻片上制备蛋白质微阵列,比较不同玻片修饰方法荧光信号强度的大小以及蛋白芯片检测的灵敏度。结果5种玻片中APES修饰的玻片蛋白质固定效果最好,信噪比最高。结论APES修饰的玻片比较适合制备蛋白质微阵列。
- 徐华韩金祥高雪芹李钿黄海燕潘继红
- 关键词：蛋白质微阵列
- 质粒DNA抗原芯片检测抗双链DNA抗体的初步研究
- 2006年
- 目的:建立以质粒DNA作为抗原的检测血清中抗双链DNA(dsDNA)抗体的芯片方法,并与酶联免疫吸附实验比较,初步探讨用芯片法检测抗dsDNA抗体的临床价值。方法:将原核表达载体质粒pcDNAⅡ用质粒DNA快速抽提试剂盒提取纯化DNA后按1∶2稀释,用点样仪点在经3-氨丙基三乙氧基硅烷(APES)修饰的玻片上,温孵后用含有1%小牛血清白蛋白和2.5%蔗糖的PBST封闭,以Cy3标记的人IgG为二抗,建立检测dsDNA抗体的芯片方法,并与德国欧蒙公司生产的抗双链DNA检测ELISA试剂盒做比较,对包括58例系统性红斑狼疮(SLE)、25例干燥综合征(SS)、10例皮肌炎(DM)和7例类风湿关节炎(RA)在内的病人和60例健康人对照进行了抗dsDNA的对比检测。结果:对阳性标本的检测,与现用常规检测方法ELISA相比,芯片检测抗dsDNA的灵敏度为91.3%,特异度为90.7%,阳性预测值为89.3%,阴性预测值为92.5%;对健康对照的检测,2种方法均为阴性,符合率为100%。结论:与ELISA相比,用质粒DNA作为抗原建立的芯片方法的灵敏度和特异度较高,为今后建立同时检测多个自身抗体的芯片奠定了基础。
- 徐华韩金祥高雪芹黄海燕潘继红王传玺
- 关键词：生物芯片质粒DNA抗双链DNA抗体
- 利用APES修饰玻片制备蛋白质、DNA及脂类微阵列的方法
- 本发明公开了一种利用APES(3－氨丙基三乙氧基硅烷)修饰玻片制备蛋白质、DNA及脂类微阵列的方法，由下述方法组成：(1)将玻片分别用强碱和浓硫酸浸洗，双蒸水冲洗至玻片洁净，离心机甩干；(2)将上述洗净的玻片放入体积比为...
- 韩金祥徐华高雪芹刘毅
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- 自身免疫性疾病抗体检测微阵列制备条件的优化和初步应用被引量：2
- 2006年
- 目的优化制备蛋白质微阵列的几个关键因素,初步建立自身免疫性疾病抗体检测微阵列,以期用于自身免疫性疾病的诊断。方法选择与制备蛋白质微阵列有关的4个因素,即温育时间、封闭剂、封闭时间和与二抗结合时间,进行正交优化,得出制备蛋白质微阵列的最优化条件,并根据该条件,进一步确定6种自身抗原适合的点样浓度及血清的最佳稀释度。根据优化条件,制备出同时检测6种自身抗体的微阵列,并初步应用,与间接免疫荧光(IIF)法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法加以比较,对结果进行评价。结果制备蛋白质微阵列的最佳优化条件是温育2h,封闭剂采用含有1%小牛血清白蛋白和2．5%蔗糖的PBST,封闭时间为30min,与二抗反应30min,6种自身抗原适合点样浓度从100μg/ml到300μg/ml不等,最佳血清稀释浓度是1∶2。微阵列法对抗核抗体(ANA)的检测与IIF法相比,灵敏度是88．6%,特异度是83．3%,微阵列法对其他5种自身抗体的检测与ELISA法相比,灵敏度在80．0%～88．2%之间,特异度在90．2%～98．6%之间。结论上述优化条件适合于制备自身免疫性疾病抗体检测微阵列,微阵列检测结果与现有常规方法检测结果比较一致,值得推广应用。
- 徐华韩金祥高雪芹黄海燕李钿潘继红刘灿兰
- 关键词：蛋白质阵列分析免疫系统疾病自身抗体
- 蛋白芯片技术对自身免疫性抗体的检测及评价被引量：4
- 2006年
- 目的 探讨蛋白芯片技术检测自身抗体的临床价值。方法 用酶联免疫吸附试验（ELISA）、蛋白芯片法检测抗dsDNA、抗Ro-60／SSA、抗Ro-52／SSA、抗SSB、抗Jo-1、抗磷脂IgG抗体．用间接免疫荧光法（IIF）、蛋白芯片法检测抗核抗体（ANA），分别统计两种方法检测均阳性、均阴性和单阳性的标本数目．并进行评价。结果 芯片法检测ANA的灵敏度为89％、特异度为60％．芯片法对其他6种自身抗体检测的灵敏度为70．0%～87．5%、特异度为92．7％～98．9％。结论 蛋白芯片法检测自身抗体与常规方法比较，特异度较高，有待进一步改善技术提高其灵敏度。
- 徐华韩金祥高雪芹刘灿兰李钿黄海燕潘继红
- 关键词：蛋白芯片自身抗体间接免疫荧光法酶联免疫吸附实验
- 几种基因的单核苷酸多态性与类风湿关节炎被引量：1
- 2005年
- 单核苷酸多态性(SNPs)是新一代的基因分子标记,随着人类基因组图谱的绘制成功,SNPs被应用于寻找各种致病基因。类风湿关节炎(RA)是一种全身自身免疫性疾病,到目前为止,其发病机制尚未完全清楚。本文简要介绍了SNPs及几种基因的SNPs与RA的关系。
- 徐华韩金祥高雪芹
- 关键词：单核苷酸多态性类风湿关节炎
- 脑脊液病原体抗体诊断蛋白芯片的研制
- 韩金祥高雪芹刘毅郭大东黄海燕潘继红徐华黄海南张华宁朱波王传玺王国强庞靖祥
- 脑脊液病原体抗体检测芯片的研制是山东省科技厅科技厅科技攻关计划项目（项目编号：2004GG2202150），经过两年多的研究和课题组成员的努力，基本按照原计划完成。该课题相关内容申请国家发明专利2项，实用新型1项，均已公...
- 关键词：
- 关键词：病原体脑脊液抗体芯片
