张鸿彦
- 作品数:9 被引量:44H指数:5
- 供职机构:哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生理学更多>>
- 重组人腺病毒基因工程疫苗的基础研究
- 曲章义袁晓辉赵月辉王鹏张鸿彦
- 1.用生物信息学方法对不同型别人腺病毒六邻体蛋白的同源性和抗原性进行系统分析,寻找型间共同抗原。2.用同源建模方法构建六邻体蛋白三维结构模型,结合进化轨迹方法对其中和抗原表位进行分析和预测。3.用肽ELISA实验对预测的...
- 关键词:
- 关键词:基因工程生物信息学
- 人呼吸道腺病毒通用特异检测试剂的研究及应用被引量:1
- 2008年
- 目的建立一种特异性强、灵敏度高、操作简便的呼吸道腺病毒检测方法,为临床呼吸道腺病毒通用特异诊断试剂的研发奠定实验基础。方法用生物信息学软件DNAMAN5.2.2、GeneRunner3.05、BLAST对GenBank中已收录的10个型别人呼吸道腺病毒核酸全序列进行比对分析,找m高度保守序列,设计5对腺病毒通用特异引物,同时确保PCR产物具有型别特异性。用NP-40裂解法制备模板,对引物的有效性、特异性及灵敏忡进行验证.并应用于64例急性呼吸道感染患儿咽拭子标本的检测,阳性标本的PCR产物直接测序鉴定血清型.将阳性标本接种HeLa细胞,光镜下观察细胞病变,电镜下观察病毒形态。结果BLAST结果表明,5对引物与其他病毒、细菌及人类基因组等无高度同源性,是腺病毒特异性引物。用5对引物扩增人3型腺病毒DNA,均出现阳性目的条带,但不能检测呼吸道合胞病毒和柯萨奇病毒,验证了引物的有效性和腺病毒特异性。模板稀释、病毒稀释均可检测到10。梯度,说明引物具有较高的灵敏性,同时验证了NP-40裂解法的稳定性。64例临床咽拭子标本巾检测出2例阳性标本,阳性率为3.13%(2/64)。阳性标本接种HeLa细胞,光镜下可见细胞变圆、聚集成葡萄串状、脱落等腺病毒所致细胞病变,电镜下可见细胞核内有典型的品格状排列的腺病毒颗粒。PCR产物测序结果表明,2株病毒均为B组腺病毒。结论成功设计了腺病毒通用的、特异的,同时扩增产物又具有腺病毒型别特异性的引物。用该引物建立的PCR方法检测呼吸道标本中的腺病毒DNA具有灵敏和特异的特点,适用于临床常规诊断腺病毒感染。
- 陈晶曲章义魏凤香张鸿彦王鹏王迎晨姜海英
- 关键词:聚合酶链反应
- 人3型腺病毒六邻体蛋白同源建模及其进化轨迹分析被引量:9
- 2009年
- 用同源建模方法构建了人3型腺病毒六邻体完整的空间结构,对此结构模型的合理性进行检验,并通过基于多重序列比对的进化轨迹分析发现,不同型别的人腺病毒六邻体型特异性序列主要存在于六邻体的塔区上,结合二级结构分析,预测位于六邻体塔区表面的几个环区是型特异性中和表位的所在区域.
- 袁晓辉曲章义吴晓敏王迎晨魏凤香张鸿彦刘蕾杨志伟
- 关键词:同源建模中和表位
- 人腺病毒六邻体蛋白保守区抗原性分析被引量:12
- 2007年
- 目的 阐明人腺病毒(HAdV)六邻体蛋白保守区的抗原性的特征,为鉴定六邻体的抗原表位奠定基础。方法 用生物信息学软件ANTHEPROT5.0和DNAMAN对HAdV3六邻体氨基酸序列进行抗原性预测分析和二级结构的分析,然后由SWISS-MODEL Protein Modelling Server预测出HAdV3六邻体蛋白三维结构。结果 抗原性预测分析显示,在六邻体的前段和中段,该区域含有大量的保守区,可能具有较强的抗原性,而六邻体后段总体抗原性较弱。根据HAdV2六邻体蛋白三维结构模型预测出HAdV3六邻体蛋白三维结构。结论 六邻体的前段和中段的部分保守区域在腺病毒颗粒上可能具有较好的暴露性并可能含有抗原性较强的型间或组特异性抗原表位。
- 王鹏曲章义张鸿彦陈晶魏凤香
- 关键词:人腺病毒抗原性分析
- 腺病毒六邻体蛋白结构、功能及疫苗研究被引量:17
- 2006年
- 腺病毒在自然界分布广泛,可引起多种疾病。腺病毒是儿童呼吸系统疾病的常见病原,它有51个血清型,3、7型常引起严重的呼吸道疾病。腺病毒的主要结构蛋白为五邻体和六邻体,其中六邻体—Loop1、Loop2是重要的中和抗原,可以刺激机体产生中和抗体。目前已对腺病毒的中和抗原六邻体蛋白的结构、功能进行了广泛的研究,可为基因工程疫苗的开发奠定良好的基础。
- 张鸿彦曲章义王鹏陈晶郑红霞魏凤香
- 关键词:腺病毒疫苗
- 松针油体外抗腺病毒作用研究被引量:11
- 2007年
- 魏凤香商蕾曲章义陈晶高虹王鹏张鸿彦
- 关键词:急性呼吸道疾病下呼吸道感染体外风湿性关节炎
- 人腺病毒五邻体基因重组质粒的构建及鉴定被引量:8
- 2009年
- 目的构建腺病毒五邻体基因重组表达质粒。方法通过PCR方法扩增获得腺病毒五邻体基因的完整序列,将此片段定向克隆到pQE30载体的多克隆位点区,筛选重组阳性菌株,提取重组质粒,利用酶切鉴定方法与核酸序列测定验证重组质粒构建的正确性。结果用PCR法获得了人腺病毒的五邻体基因,将该基因正确地重组到表达质粒pQE30中,构建出腺病毒五邻体基因重组表达质粒pQE30-penton。结论构建腺病毒五邻体基因重组表达质粒pQE30-penton。
- 姜海英曲章义张鸿彦王鹏王迎晨
- 关键词:腺病毒重组质粒
- 地塞米松对儿童自身免疫病患者外周血淋巴细胞早期凋亡的影响
- 目的:为了观察儿童自身免疫病患者(以SLE为代表)在应用地塞米松24h前后细胞凋亡情况,对其外周血淋巴细胞早期凋亡率进行了检测.方法:应用最新的AnnexinV检测试剂盒及流式细胞仪检测早期凋亡细胞.结果:儿童SLE初发...
- 张鸿彦
- 关键词:自身免疫病红斑狼疮地塞米松淋巴细胞
- 文献传递
- 儿童呼吸道感染病毒的流行病学调查及腺病毒重组疫苗基础研究
- 癫痫是神经系统常见的慢性疾病,在中国其患病率为7‰左右。其中约70%~80%的患者经正规的抗癫痫药物治疗可有效控制其发作,然而仍有近20%~30%的癫痫病人经抗癫痫药物的联合治疗后,仍不能有效控制其发作,即所谓的难治性癫...
- 张鸿彦
- 关键词:流行病学腺病毒重组疫苗