张雪
- 作品数:86 被引量:874H指数:13
- 供职机构:第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生自动化与计算机技术生物学文化科学更多>>
- 注重生物信息学在检验医学中的应用被引量:4
- 2004年
- 府伟灵扬茜张雪
- 关键词:生物信息学基因诊断技术基因组序列
- 压电石英晶体传感器检测血浆纤维蛋白原方法的研究及应用被引量:4
- 2004年
- 目的 建立一种压电石英晶体传感器检测血浆纤维蛋白原 (Fib)的方法。方法 采用AT切向、基频 1 0MHz的银膜石英晶体作为压电元件 ;观察血浆凝集过程中晶体振荡频率的变化 ,确定血浆凝集反应的起点和终点。结果 (1 )检测池加入凝血酶原待频率稳定后 ,血浆标本加入反应体系后 ,晶体振荡快速下降 ,由于反应中形成的纤维蛋白原凝块的质量、体积与晶体接触的面积以及血清产生的量不同 ,造成频率瞬时的上升、下降 ,或频率稳定 ,直至反应结束频率平稳 ,加样后频率下降的起点为血浆凝集反应的起点 ,频率上升、下降 ,稳定的起始点为反应的终点 ,计算两点的时间即为反应时间 ,查标准曲线得纤维蛋白原的含量。(2 )该方法的检测结果与STAGO磁珠检测法的相关性好 (r =0 .95 7)。结论 压电石英晶体传感器检测血浆纤维蛋白原是一种实时在线检测的方法 ,在线观测凝集反应的终点 ,反应的起点和终点的判别方便、可靠、准确。且操作简单 ,快速 ,成本低廉 ,是一种敏感性高、重复性好的方法 。
- 屈玲张雪陈鸣府伟灵
- 关键词:压电石英晶体传感器纤维蛋白原
- 预防术后感染的新型外固定装置研制被引量:2
- 2009年
- 目的为降低骨科外固定架使用中术后感染的发生率,自行研制出扣合式全环外固定装置并进行其力学稳定性测试。方法运用Solidworks软件设计外固定架,并用三维有限元方法和万能材料试验机对设计的全环外固定架进行测试,判断其抗轴向、侧向、扭转力稳定性,进而对全环外固定架的各项参数进行生物力学优化。结果在力学性能上,发明的扣合式全环外固定装置在抗轴向稳定性上与现有的半环槽式外固定架差异无统计学意义(P>0.05),但是前者在抗侧向、扭转力稳定性上要显著性由于后者(P<0.05);综合上述结果,证明发明的扣合式外固定装置的力学稳定性显著性优于半环槽式外固定架;其稳定性随着固定圆环个数、圆环间距、克氏针夹角的增加而增加,当克氏针夹角达到90度时固定效果最好。结论扣合式全环外固定架在保留半环外固定架安装便捷的基础上,极大提高了其力学稳定性,不仅可极大缩短手术时间,减少围手术期医院感染的发生,而且可降低骨折愈合过程中发生针道感染的发生率。
- 罗阳张雪王旭全侯天勇张泽华叶青汪广杰府伟灵
- 关键词:骨折外固定稳定性
- 医学检验教学网络资源
- 2000年
- 黄庆府伟灵张雪
- 关键词:教学网络
- 压电石英晶体传感器检测血浆凝血酶时间的实验研究
- 目的建立一种检测血浆凝血酶时间(TT)的压电石英晶体传感器。方法采用AT切向、基频10MHz的银膜石英晶振作为压电元件;探讨反应体系密度和粘度与晶体振荡频率变化的关系,观察血浆凝集过程中晶体振荡频率的变化规律,确定判断血...
- 张波府伟灵张雪杨新陈庆海俞凡
- 关键词:压电石英晶体传感器凝血酶时间
- 文献传递
- 压电石英晶体免疫传感器在前列腺特异抗原检测的实验研究被引量:13
- 2003年
- 目的 构建一种检测前列腺特异抗原 (PSA)的新型压电石英晶体免疫传感器。方法采用AT切型、基频 10MHz的金膜电极石英晶体用金属夹具和乳胶套圈固定形成检测池 ,抗人PSA单克隆抗体采用巯基化方法固定在金膜电极表面制成抗体识别膜 ,构成压电PSA免疫传感器 ,同时对 5 6例临床血清标本进行检测 ,并与化学发光免疫分析法进行比较。结果 构建的压电PSA免疫传感器对PSA的响应特性良好 ,其线性检测范围为 1 2 5~ 5 0ng/ml,批内、批间变异系数 (CV)分别小于 4 0 %和 6 0 % ,与化学发光免疫分析法具有良好的相关性 (r =0 95 ,P >0 0 5 ) ,癌胚抗原(CEA)、甲种胎儿球蛋白 (AFP)、人绒毛膜促性腺激素 (hCG)等对PSA的检测基本无干扰 ;传感器可再生后重复使用 5次。结论 压电PSA免疫传感器具有灵敏度高、特异性好、不需标记、操作简单、省时、能实时在线检测和重复使用等优点 ,是一种检测PSA的新方法 ,适用于临床检测 ,有推广价值。
- 张波府伟灵毛琼国张雪陈鸣蒋天伦俞凡
- 关键词:前列腺特异抗原前列腺肿瘤
- 压电胰岛素-C肽微阵列免疫传感器研究被引量:6
- 2004年
- 以 AT切型、基频 10 MHz的镀金膜石英晶体作为换能器 ,将抗人胰岛素和 C肽单克隆抗体固定在石英晶体电极表面 ,用 2× 5检测池固定夹具构建一种新型压电胰岛素 - C肽微阵列免疫传感器 .研究了抗体固定方法、抗体工作浓度、固定量、一致性以及传感器的响应参数如检测温度、时间和特异性等的影响 .该微阵列传感器在胰岛素浓度为 2 .5~ 16 0 .0 m IU/ L、C肽浓度为 0 .375~ 12 .0 ng/ m L范围内响应特性良好 ,压电晶体频率偏移值与胰岛素和 C肽浓度呈良好的线性关系 .将此微阵列传感器用于人血清标本的测定 ,结果与放射免疫法符合 ( r为 0 .92和 0 .94 ) .此微阵列传感器具有灵敏度高、特异性好 ,低密度阵列结构 ,检测通量较高 ,不需标记 ,操作简单、能实时在线检测和重复使用等优点 ,能用于临床实验诊断 ,具有临床推广应用价值 .
- 张波府伟灵毛琼国张雪汤万里俞凡
- 关键词:压电免疫传感器微阵列胰岛素C肽
- 抗内毒素噬菌体抗体库的构建及筛选
- 2001年
- 目的 :构建一个鼠源性的抗内毒素单链噬菌体抗体库 ,从中筛选出对内毒素具有较高亲和力的单链抗体。方法 :从小鼠脾细胞中提取总RNA ,通过RT PCR技术扩增出小鼠抗体重链、轻链可变区基因 (VH,VL) ,用Linker将VH,VL 交联形成单链抗体可变区片段 (ScFv)。经NotⅠ ,SfiⅠ双酶切后与经同样双酶切的pCANTAB5E载体相连 ,转化入大肠杆菌TG1以构建鼠抗内毒素单链噬菌体抗体库。在援救噬菌体抗体库后 ,用内毒素淘筛特异性的ScFv ,富集的噬菌体阳性克隆重新感染TG1。在 96孔板分别援救单个含特异性ScFv的TG1菌落 ,最后随机挑选出 190个菌落经ELISA检测抗内毒素ScFv。结果 :小鼠血清中抗内毒素的效价为 1∶12 80 0。提取的总RNA浓度为 12 .3 813 μg/ml,纯度较好。扩增出的VH 长约 3 4 0bp ,VL 约 3 2 0bp ,ScFv约 80 0bp。转化入TG1后有约 1.9× 10 7个菌落。淘筛一轮过后即有 3× 10 4阳性菌落长出 ,190个菌落经ELISA检测有 2个阳性克隆。结论 :成功地构建了一个库容量为 1.9× 10 7的鼠抗内毒素单链噬菌体抗体库 ,并从中筛选出了 2株抗内毒素ScFv。
- 陈鸣陆建华府伟灵俞丽丽张雪张波
- 关键词:噬菌体抗体库内毒素单链抗体
- 运用荧光分光光度仪观测结核杆菌耐链霉素耐药rpsL 43密码子发夹探针液相杂交信号
- 2009年
- 目的设计针对结核杆菌耐链霉素(SM)rpsL43密码子的发夹型DNA探针,尝试运用荧光分光光度仪直接观测液相中发夹探针与rpsL43密码子扩增产物杂交后荧光信号,从而检出该位点突变。方法运用软件Beacon designer设计针对rpsL43密码子的发夹探针,应用荧光分光光度仪检测rpsL43密码子扩增片段与探针杂交后荧光信号,并比较扩增产物测序结果。结果通过荧光分光光度仪观测到结核杆菌标准株及SM耐药rpsL43密码子扩增产物杂交荧光信号存在显著差异;20株SM耐药组与10株H37RV标准株对照组荧光信号强度比较,SM耐药组rpsL43密码子突变检出率为70%,测序法突变检出率为65%,发夹探针杂交法假阳性株1例(504S)。结论应用荧光分光光度仪直接观测发夹探针液相杂交荧光信号具有简单、灵敏等优特点;rpsL43密码子点突变是重庆地区SM耐药的主要因素之一。
- 陈庆海华兴张波张雪黄君富匡红府伟灵
- 链置换扩增技术的影响因素研究被引量:3
- 2002年
- 目的 探索限制酶、聚合酶、缓冲体系和DTT等对链置换扩增 (SDA)实验的影响 ,以期在商品化试剂条件下组建SDA系统。方法 以结核菌IS61 1 0序列为扩增对象设计SDA引物 ,利用商品化的BsoBI和exo Bst为实验用酶建立SDA实验系统。对比在不同BsoBI、exo Bst浓度条件下SDA产物的电泳条带亮度来观察限制酶、聚合酶对SDA效率的影响 ;对比SDA在pH 7.6的磷酸盐缓冲液和以Tris HCl为缓冲体系的NEBuffer2、ThermoPolBuffer和EcoPolBuffer中的产物电泳条带的方法来观察不同缓冲体系对SDA效率的影响 ;对比加入DTT和不加DTT时SDA产物的电泳条带亮度来观察DTT对SDA效率的影响。结果 ①在 0 .1~ 0 .4U μl浓度范围内 ,SDA的扩增率与BsoBI含量正相关 ,而 0 .8U μlBsoBI反而使SDA受到抑制。②在 0 .0 8~ 0 .3 2U μl浓度范围内exo Bst用量对SDA的扩增能力没有显著影响 ;③SDA可以在pH 7.6的磷酸盐缓冲液和ThermoPolBuffer中进行 ,而不能在NEBuffer2和EcoPolBuffer中进行 ;④DTT对SDA的扩增率和特异性都没有显著影响。结论 以上实验结果表明在商品化试剂条件下可以构建SDA系统 。
- 蒋天伦府伟灵张波陈鸣张雪赵树铭
- 关键词:核酸结核菌压电石英晶体传感器DNA传感器基因诊断