张小飞
- 作品数：32 被引量：108H指数：6
- 供职机构：北京市兽药监察所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市优秀人才培养资助北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 黑线仓鼠及其白化突变系TYR、TYRP1的基因表达水平比较分析被引量：10
- 2012年
- 目的本研究旨在研究TYR、TYRP1基因在黑线仓鼠与白化突变系皮肤组织中的表达情况,探索其与白化毛色性状的产生是否具有相关性。方法以黑线仓鼠和白化突变系皮肤组织为研究对象,采用实时荧光定量PCR技术,分别得到黑线仓鼠与白化突变系TYR和TYRP1基因的相对表达量。结果黑线仓鼠皮肤中的TYR和TYRP1基因的mRNA相对表达量分别是白化突变系皮肤组织中的2.5倍和5.3倍。结论表明黑线仓鼠皮肤中TYR、TYRP1的基因表达水平存在表达差异,白化突变系TYR、TYRP1基因发生表达下调,揭示出了TYR、TYRP1基因的表达量与白化突变系白化性状的产生有关。
- 赵彦斌孙兆增白杰英张小飞李爱学柳巨雄隋丽华胡仲明曾林
- 关键词：实时荧光定量PCR
- Ⅰ型牛疱疹病毒TK^-/gE^-基因双缺失突变株生物学特性
- 2012年
- 目的构建Ⅰ型牛疱疹病毒(BHV-1)的TK-/gE-双缺失突变株,检测其生物学功能,为治疗牛传染性鼻气管炎提供参考。方法构建了带有EGFP表达盒的BHV-1 TK-/gE-双缺失突变株。通过southern杂交、蛋白质斑点印迹、空斑试验、MDBK细胞增殖实验等技术方法,对重组基因所构成病毒突变株的生物学特性进行鉴定。结果 Southern杂交及蛋白斑点印迹表明,课题组成功构建了带有EGFP表达盒的双缺失突变株;该突变株具有与野生株相当的繁殖力,但TK-/gE-成功缺失,毒力大幅减弱;BHV-1 TK-/gE-遗传稳定,不会返强。结论本项目组成功构建了Ⅰ型牛疱疹病毒(BHV-1)的TK-/gE-双缺失突变株,该缺失株具有良好的安全性和稳定性,为该突变株进一步作为生物安全疫苗和多价病毒载体提供了依据,为预防和治疗牛传染性鼻气管炎提供了技术支持。
- 定明范强时彦胜张小飞张广州李春白杰英刘正飞
- 关键词：牛疱疹病毒生物学特性
- 猴B病毒囊膜蛋白gB特异性抗原表位的筛选与表达鉴定
- 目的：筛选和鉴定猴B病毒囊膜蛋白gB的特异性抗原表位,将其应用于B病毒的检测。方法：利用蛋白序列比较和表位预测技术筛选猴B病毒囊膜蛋白gB的特异性抗原表位,经PCR扩增后原核表达,纯化,Western-blot鉴定融合蛋...
- 张小飞叶华虎赵彦斌王冬平赵洪卫曾林
- 关键词：蛋白序列
- 不同直径山羊卵泡卵母细胞的发育特征及体外发育能力被引量：9
- 2008年
- 目的研究山羊卵巢表面不同直径卵泡卵母细胞的发育特征及体外发育能力,优化山羊早期胚胎体外生产系统。方法收集繁殖期和非繁殖期山羊卵巢,采集表面直径小于1.5 mm、1.5-2.5 mm、2.5-3.5 mm和大于3.5 mm4种卵泡卵母细胞,以Hoechst33342染色检查核发育阶段;同时,利用体外培养方法观察不同直径卵泡卵母细胞的成熟、受精和早期胚胎发育能力。结果直径小于1.5 mm卵泡卵母细胞主要处于GVI期;1.5-2.5 mm卵泡卵母细胞以GVⅠ、GVⅡ和GVⅢ期为主;2.5-3.5 mm卵泡卵母细胞在GVⅡ到GVⅣ期间平均分布;大于3.5mm卵泡卵母细胞主要为GVⅢ到GVBD期。体外培养实验发现,直径小于1.5 mm卵泡卵母细胞仅有个别能完成成熟和卵裂;大于1.5 mm卵泡卵母细胞具有核成熟能力,能完成成熟和受精,但1.5-2.5 mm卵泡卵母细胞的受精卵通常阻滞于4-8细胞期;当卵泡直径大于2.5 mm时,卵母细胞才能较好地支持胚胎继续发育,其桑/囊胚的比例达到30%以上。卵泡卵母细胞的发育特征和体外发育能力与动物所处的繁殖季节无关。结论山羊卵巢上直径大于1.5 mm卵泡卵母细胞具有核成熟能力,大于2.5 mm卵泡卵母细胞能支持早期胚胎继续发育。
- 叶华虎袁菊芳刘宏伟张小飞隋丽华陈旖胡娟峰曾林
- 关键词：卵母细胞发育能力山羊
- 环介导等温扩增技术的研究进展和微生物检测应用被引量：4
- 2011年
- 环介导等温扩增（Loop-mediated isothermal amplification, LAMP）是一种新型的核酸扩增技术。本文概述其反应原理、技术特点、相关技术、微生物检测应用及发展前景。
- 张小飞白杰英赵爽袁菊芳曾林
- 关键词：环介导等温扩增微生物
- 中兽药散剂中非法添加酰胺醇类药物的检测方法研究被引量：15
- 2019年
- 建立了高效液相色谱测定中兽药散剂中甲砜霉素、氟苯尼考、氯霉素3种非法添加药物的方法。采用Waters Atlantis T3色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速为1. 0 m L/min,检测波长为224和278 nm。该方法选取4种常见中药散剂:健胃散、止痢散、球虫散、胃肠活。经验证,甲砜霉素的检测限为3 g/kg、氟苯尼考及氯霉素的检测限均为4 g/kg,对照溶液的线性范围为10~500μg/m L,峰面积的相对标准偏差分别为0. 11%、0. 11%、0. 13%。按外标法计算其回收率,三种药物的回收率均在98. 0%~103. 0%,变异系数均在0. 6%~1. 6%。与传统的标准检测方法相比,研究最终完成了几种中兽药制剂中同时检测三种酰胺醇类药物,突破了原有标准中一种药物的检测方法,提高了检测工作效率,同时该方法具有较好的灵敏度、准确度和稳定性,能够满足对三种药物常规检测的要求。在实际工作中,通过对不同类别固体兽药制剂进行实验探索验证,得出该方法具有很好的适用性,为相关检测单位的检测工作提供了一定的技术支持,提高违法添加的检出率。
- 高婷李应超王亚芳张连彦张小飞钟昆芮
- 关键词：非法添加高效液相色谱
- 高效液相色谱法测定板蓝根颗粒中腺苷的含量被引量：5
- 2018年
- 建立了兽用板蓝根颗粒中腺苷含量测定的高效液相色谱法。以Symmetry C18柱为固定相,甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(10∶90)为流动相,检测波长260 nm,流速为1.2 m L/min,柱温30℃。采用外标法定量计算含量。腺苷的线性范围为4~20μg/m L,回归方程y=71169x-6732,R2=0.9999;平均回收率96.62%,RSD为1.08%。方法操作简单、精密度高、稳定性好,测定结果准确可靠,可用于板蓝根颗粒中腺苷的质量控制。
- 王亚芳钟昆芮李应超周艳飞张小飞高婷秦俊杰王海军王海军
- 关键词：腺苷板蓝根颗粒高效液相色谱法
- 金黄地鼠与白化地鼠遗传生化基因位点概貌被引量：1
- 2014年
- 目的建立金黄地鼠和白化地鼠遗传生化基因位点。方法选用小鼠和大鼠的遗传生化基因位点,采用蛋白质和同工酶醋酸纤维电泳的方法,对金黄地鼠和白化地鼠进行生化基因位点检测。结果建立了金黄地鼠和白化地鼠25个生化基因位点,分析金黄地鼠和白化地鼠遗传生化基因位点的多态性,为进一步研究金黄地鼠白化突变系的遗传机理奠定基础。结论金黄地鼠生化基因位点存在多态性,白化地鼠与金黄地鼠生化基因位点存在差异。
- 王冬平崔晓霞尚世臣陈旖张小飞陈振文王全新黄斌尙玉璞李桂军
- 关键词：金黄地鼠生化基因位点
- 巴贝西虫感染黑线仓鼠生物学特性的变化被引量：2
- 2016年
- 目的建立巴贝西虫感染的黑线仓鼠模型,明确感染后黑线仓鼠生物学特性的变化规律,为巴贝西虫病的检测与防治提供基础数据资料。方法腹腔注射含巴贝西虫的血液感染黑线仓鼠,感染的第0、2、4、6、8、10、12、14、16、23、30、37天每次取5只动物采集抗凝血和全血,制备血涂片,通过吉姆萨染色检测虫体繁殖情况;分离血液总DNA,用REAL-TIME PCR检测巴贝西虫的在宿主体内的繁殖规律;用全自动生理生化检测仪测定血液生理生化指标;处死动物后分别采集心、肝、脾、肺、肾等器官,称重测定脏器系数;用ELISA法检测感染动物血清中IL-2浓度。结果感染后第4天黑线仓鼠体内的巴贝西虫数量最多,之后整体呈下降趋势,在第12天有一个短暂升高。感染动物的脏器系数变化最大的属于肝脏和脾脏,心、肺和肾脏系数在整个感染期内稍有波,均在正常值范围内。感染动物的血细胞均有波动,在第10、23天两次达峰值,其中白细胞变化最为剧烈;检测到变化的血液生化指标在第12天达峰值。感染动物血清中的IL-2在第10天达峰值,之后连续下降。结论感染巴贝西虫的黑线仓鼠具有典型的蜱传寄生虫病特点,病原侵入一周内达繁殖顶峰,且病原可在宿主体内长期潜伏。宿主免疫响应在第2周达到峰值,与免疫相关的脏器及血细胞有明显的应激反应。据此,可有针对性的开展巴贝西虫病的诊断与防治。
- 叶莉马帅王昱佳郑珺文王冬平李桂军范君文时彦胜张小飞白杰英
- 关键词：黑线仓鼠脏器系数细胞因子
- 恒河猴五日热巴尔通体的分离和柠檬酸合成酶基因的序列分析被引量：2
- 2012年
- 目的初步研究巴尔通体在恒河猴体内的存在情况,并分析其柠檬酸合成酶(gltA)的基因序列,判断巴尔通体的种属。方法 16只来自福建的恒河猴,用血琼脂培养基分离可能存在的巴尔通体。根据NCBI数据库上的巴尔通体gltA的基因序列,设计一对引物,以巴尔通体菌落为模板进行扩增,将获得的序列进行克隆测序。结果从3只恒河猴体内成功分离到了巴尔通体病原,并获得了巴尔通体gltA全长基因序列,测序结果表明该序列与五日热巴尔通体同源性99%。结论福建来源的恒河猴种群携带巴尔通体病原,巴尔通体流行地区可能存在鼠与灵长类动物之间病原体的流行和传播。
- 隋丽华曾林张广州白杰英赵彦斌张小飞陈旖赵爽孙兆增
- 关键词：柠檬酸合成酶
