张双全 作品数:172 被引量:957 H指数:20 供职机构: 南京师范大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 南京师范大学校科研和教改项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 化学工程 更多>>
狗B淋巴细胞刺激因子cDNA及其克隆方法和重组应用 狗B淋巴细胞刺激因子(dogBAFF)cDNA及其克隆方法和重组应用,涉及生物基因工程领域。狗B淋巴细胞刺激因子的基因具有SEQIDNO.1所示的序列。其克隆方法如下:TRIzol法提取狗脾脏总RNA并进行逆转录;通过C... 张双全 沈月芬 王书乐文献传递 膜糖蛋白在动物受精过程中的作用 1989年 动物的受精包括三个不同的膜融合过程,即顶体反应(精子),精子和卵的融合,以及皮质反应(卵)。近年来的研究表明,动物受精过程的实质是性细胞表面的糖蛋白及其受体相互作用的结果,这一过程包含着专一的细胞间的识别、粘着和最终细胞融合。不同种属的动物,这些膜糖蛋白的性质也有所不同,故推测受精作用的种属专一性及其受精过程可能与这些糖蛋白有关。棘皮动物海胆卵的受精作用是高度专一的。海胆精子与同种卵混合后,精子发生顶体反应,卵迅速从质膜释放受体,可观察到初始的配偶子结合,膜融合,最终精子进入卵内。若精子与异种卵混合后,虽然可看到顶体反应,但看不到精子与卵的结合和膜融合。 张双全关键词:膜糖蛋白 受精 动物 少棘蜈蚣毒腺RACE cDNA文库的构建及β-actin基因的克隆与序列分析 被引量:6 2005年 运用SMART技术首次构建了少棘蜈蚣(Scolopendrasubspinipes)毒腺cDNA文库。经琼脂糖电泳检测,文库所含全长cDNA主要分布在5 0 0bp以上,大于2 0 0 0bp的区域尚有很长拖尾,中间有几条高丰度mRNA亮带。以此文库为模板,通过5′RACE(RapidamplificationofcDNAends,快速扩增cDNA末端)方法获得了细胞质肌动蛋白βactin基因5′末端5 98bp片段,其中包括开放阅读框5 46bp ,编码1 82个氨基酸。将该基因片段推导的氨基酸序列通过BLAST软件与蛋白质公共数据库Swissprot比对,发现与蜜蜂(Apismellifera)的βactin基因同源性高达96% ,说明本实验所构文库质量完全可以满足用RACE方法进行功能基因的cDNA克隆。通过基于双参数模型的NJ法对部分动物βactin基因进行系统重建,较好地反映了这些动物的系统发生关系。 任文华 张双全 宋大祥 周开亚关键词:RACE 毒腺 快速扩增CDNA末端 系统发生关系 双参数模型 低功率微波(2450MHZ)辐射对离体人红细胞膜的损伤效应 被引量:9 1998年 本文采用2450MHz低功率微波辐射离体人红细胞,从分子水平研究微波对红细胞膜的影响。选择功率密度为0mW/cm2,5mW/cm2,10mW/cm2,辐射时间为30min,结果显示,10mW/cm2的微波对离体人红细胞有较为明显的损失。表现为红细胞的渗透脆性升高,膜脂流动性下降,膜丙二醛(MDA)含量明显升高,但红细胞溶血度未增加,红细胞膜SOD。 赵东红 李建宏 张双全 秦德安关键词:微波辐射 细胞膜 自由基 人体污染监测 乙酰基转移酶2基因单核苷酸多态性与男性不育发病风险的相关性研究 被引量:1 2016年 目的:探讨乙酰基转移酶2基因(NAT2)的rs1799930和rs1799931单核苷酸多态性与南京地区男性不育发病风险的相关性。方法:采用病例-对照研究,选取636例特发性男性不育患者作为病例组,年龄20~44(28.45±4.38)岁;442例有生育史的健康男性作为对照组,年龄21~35(28.30±3.46)岁。取外周静脉血,用Sequenom Mass Array技术检测这2个位点的基因型,Logistic回归模型分析不同基因型与男性不育的相关性,单倍型分析2个位点连锁效应和4种基因型组合与男性不育的关系。结果:病例组和对照组精子浓度[(32.32±45.49)×10~6/ml vs(72.77±45.21)10~6/ml]、前向运动精子百分率[(15.29±5.06)%vs(42.02±9.04)%]、卵泡刺激素水平[(14.69±12.37)U/L vs(4.72±2.51)U/L]差异有统计学意义(P均〈0.01),其他参数病例组与对照组无统计学意义的差异。2个位点各基因型频率和等位基因频率在各种模型中均与男性不育无统计学意义的相关性;单倍型分析表明,rs1799930和rs1799931存在连锁效应(D'=0.998,r_2=0.05),但4种基因型组合与男性不育也无明显相关性。结论:NAT2基因的rs1799930和rs1799931位点的单核苷酸多态性与特发性男性不育的发病风险无相关性。该位点与男性不育具体关系有待更大样本量加以证实。 蒋卫军 刘帅妹 曹芳 张静 倪梦霞 周青 朱培冉 李卫巍 吴秋月 曹进 李伊 夏欣一 张双全关键词:男性不育 单核苷酸多态性 马肿瘤坏死因子超家族成员13B的cDNA序列及其克隆方法和重组应用 马肿瘤坏死因子超家族成员13B(horseTNFSF13B)cDNA及其克隆方法,涉及生物基因工程领域。马肿瘤坏死因子超家族成员13B的cDNA和蛋白质,分别具有SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示的序列。其克隆方... 张双全 吴海涛文献传递 L-肉毒碱体外对人精子活率及运动参数的影响 被引量:8 2006年 目的:研究L-肉毒碱体外对人精子活率及运动参数的影响,分析L-肉毒碱对维持和提高精子质量的效果,并探讨其在男性不育症治疗中的作用。方法:选取10例精液质量参数正常、健康的生育男性和20例弱精子症不育患者精液,分别加入不同浓度的L-肉毒碱并于37℃孵育,镜检观察精子的形态变化,并采用计算机辅助精液分析系统检测各组精子的活率、活力(a+b级精子百分率)、前向性(STR)、直线性(LIN)、直线速度(VSL)、曲线速度(VCL)以及平均路径速度(VAP)参数,同时对检测结果进行统计学分析。结果:正常生育男性精子体外加入L-肉毒碱后,可明显减缓精子活率、活力及VSL、VCL以及VAP的下降趋势,且随着L-肉毒碱加入浓度的增加,这种减缓作用增强。但当L-肉毒碱浓度超过1 200μmol/L时,减缓作用减小,较为适宜的L-肉毒碱浓度为400μmol/L。弱精子症患者精液体外加入L-肉毒碱浓度在400μmol/L^1 200μmol/L、孵育时间为30 min^60 min时,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)地提高体外精子的活率、活力及VSL、VCL以及VAP等参数。体外加入L-肉毒碱,能显著提高因精浆L-肉毒碱水平低下所致弱精症患者精子的活率、活力及运动参数,并可显著减缓正常生育精子活率、活力及运动参数的降低。结论:体外添加适宜浓度的L-肉毒碱,能显著提高因精浆L-肉毒碱水平低下所致弱精症患者精子的活率、活力及运动参数,并可显著减缓正常生育精子活率、活力及运动参数的降低。 李伟 李克 商学军 黄宇烽 张双全关键词:L-肉毒碱 体外试验 精子运动参数 弱精子症 男性不育 广玉兰叶片抗氧化活性评价 被引量:20 2007年 用乙酸乙酯从广玉兰(Magnolia grandiflora)叶片中萃取出的活性物质,在进行主要成分理化检识鉴定后,以人工抗氧化剂PG(没食子酸丙酯)和天然抗氧化剂PA(植酸)为对照,测定了其体外抗氧化活性,并用两种体系DPPH.(二苯代苦味酰基自由基)和卵磷脂进行评价。结果表明,提取物含有黄酮类化合物和酚类化合物。提取物稀释10倍(92.00 mg.mL-1)时,对过氧化氢的清除率达最大,为29.41%,在稀释20倍(46.00 mg.mL-1)时,抑制活性氧活性达最大,达500活力单位,稀释50倍(18.40 mg.mL-1)时,非酶体系的总抗氧化能力达最大,为270活力单位。DPPH.体系和卵磷脂体系评价结果表明,在提取物稀释50倍时(18.40 mg.mL-1),对DPPH.的清除率为92.69%,比PG强,对脂质过氧化的抑制作用达最大,达56.67%,与PA相当,因此,抗氧化效果最好。 何开跃 李晓储 樊亚苏 张双全 毕慧敏关键词:广玉兰 抗氧化 黄酮类化合物 酚类化合物 重组家蚕抗菌肽CM4的生产和纯化方法 本发明涉及基因工程领域,具体涉及家蚕抗菌肽CM4多拷贝表达载体的构建、表达、纯化以及最佳拷贝菌株的筛选等技术。本发明的技术方案是:应用重组DNA技术构建抗菌肽CM4的多拷贝同向串联表达载体pET32a-nCM4(n=1,... 张双全 周良范 李保存文献传递 重组人B淋巴细胞刺激因子原核表达初探 被引量:2 2002年 借助 SDS- PAGE分析方法 ,以重组人 B淋巴细胞刺激因子 (rh BLy S)蛋白表达宿主菌株 M1 5(p QE30 a/rh BLy S)作为研究对象 ,对于用 IPTG诱导的重组目的产物的表达进行了优化研究 ,分析比较了诱导时间、IPTG浓度、温度等参数对重组产物表达的影响。实验结果表明 ,降低温度和 IPTG浓度有利于增加靶蛋白的可溶性 ,2 7℃和 0 .0 75mmol/ 杜秋丽 张双全关键词:原核表达 融合蛋白 重组蛋白 基因表达