廖飞
- 作品数：112 被引量：191H指数：7
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- 联用积分法和初速度法测定酶活性的方法
- 一种联用积分法和初速度法测定酶活性的方法；对单一酶反应体系在低于米氏常数10倍的预设底物浓度下连续监测反应3到10分钟，当起始底物浓度高于预设底物浓度70％且初速度仍在其线性范围内时测定经典初速度，当80％记录时段内底物...
- 廖飞赵运胜赵利娜陆巍杨晓兰廖红于明安桑宇
- 文献传递
- 不同自变量的积分速度方程拟合酶反应曲线测定参数的差异
- 经典积分法用（S-S）/t=V-K×[ln（S/S）/t][1]拟合底物高于1.4倍酶K且消耗80%以上的反应曲线,所得酶动力学常数可靠性仍很低。本文比较用
- 廖飞
- 关键词：酶反应
- 文献传递
- 点样位置对血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳行为的改变被引量：4
- 2004年
- 血清蛋白室温下进行醋酸纤维薄膜电泳时,点样线靠近阳极端则有蛋白朝阴极运动,低温下移动方向相同而速度变慢。兰色葡聚糖和溴酚兰在对应条件下电泳表明,主要是薄膜表面溶剂蒸发,造成缓冲液由两端朝中部补充而流动,从而改变了部分低荷质比血清蛋白的电泳行为。此异常现象证实缓冲液流动可改变蛋白质电泳行为,可用于验证电泳影响因素的设计性实验教学。
- 廖飞王咏梅左渝萍何爱彬曾昭淳
- 关键词：血清蛋白实验教学
- 用简并引物快速克隆苛求芽孢杆菌尿酸酶的编码序列被引量：2
- 2017年
- 目的:从头克隆苛求芽孢杆菌尿酸酶基因的编码序列。方法:据Edman降解所得N端氨基酸序列(AERTMFYGKGDV)用BLASTp搜索N端相似性>70%细菌尿酸酶;多序列联配比对发现靠近N端和C端的2个保守肽段。据N端已知序列和2个保守肽段设计简并引物进行PCR扩增;将所得片段连接到T载体,转化后筛选阳性克隆测序。结果:据密码子偏好性调整简并引物,获得该尿酸酶从第六位氨基酸到终止密码子之间的编码序列;此尿酸酶共含322个氨基酸残基,原核尿酸酶靠近N端的保守序列ATDSMKNFI从该尿酸酶第70位氨基酸残基左右开始,另一保守序列GKVYTEPR从该尿酸酶第290位氨基酸残基开始但变为GAVFTEPR。结论:用简并引物PCR快速克隆获得了苛求芽孢杆菌尿酸酶的编码序列。
- 赵运胜卜友泉廖飞
- 关键词：基因测序
- 在高于米氏常数的底物浓度下用积分法测定尿酸酶活性被引量：7
- 2004年
- 目的 :以尿酸酶为模型 ,考察在底物浓度高于酶米氏常数 (Km)时用积分法测定酶活性 (Vm)的可靠性 .方法 :用 2 93nm光吸收记录尿酸酶反应曲线 .用以反应时间为自变量的积分速度方程 ,以尿酸酶Km 为常数而本底为非线性参数拟合尿酸酶反应曲线 ,搜寻对应最好拟合的Vm.结果 :此积分法测定Vm 主要受剩余底物浓度影响 ,本底基本没有干扰 .剩余底物低于 2 .5 μmol/L时用 1 0～ 70 μmol/L起始底物所得Vm 无差异 .用 2 5和 70 μmol/L起始底物浓度时初速度和Vm 都与酶量呈正比 .在此两种底物浓度下积分法的下限相同 ,且与初速度法下限无明显差异 .但用积分法测定酶活性的上限明显高于初速度法 ,而且起始底物浓度越低则差异越显著 .结论 :在积分法中使用以反应时间为自变量的积分速度方程拟合酶反应曲线 ,在高于Km
- 廖飞朱小云王咏梅曾昭淳左渝萍
- 关键词：积分法尿酸酶底物浓度酶活性测定
- SEDL基因及其编码蛋白sedlin在小鼠多种组织中表达研究
- 2010年
- 目的:研究SEDL基因及其编码蛋白sedlin在小鼠多种组织中的表达。方法:采用Real-TimePCR和Western Blot检测小鼠9种组织中SEDL基因和sedlin蛋白表达水平及1、2、4周龄小鼠骨组织中的SEDL基因及sedlin蛋白表达水平。结果:①所检测小鼠9种组织中均有SEDL基因及对应的sedlin蛋白表达。组织中SEDL基因及sedlin蛋白表达量上有统计学差异(P<0.0001),以骨组织中SEDL基因及sedlin蛋白表达水平高。②不同周龄小鼠骨组织中,SEDL基因及sedlin蛋白的相对表达水平有统计学差异(P<0.01),二者的表达量随年龄变化的趋势相吻合。结论:SEDL基因和sedlin蛋白在所测组织中的表达相一致。二者的表达量在组织间均有差异性,其中以骨组织中表达水平最高。小鼠骨组织中SEDL基因及sedlin蛋白的表达量上有相同时相性改变。
- 胡娜熊丰廖飞王旭荣
- 关键词：脊椎骨骺发育不良
- 反应条件对苛求芽孢杆菌胞内尿酸酶与嘌呤衍生物作用的影响被引量：2
- 2011年
- 用底物尿酸的紫外吸收变化跟踪反应,用单或双底物米氏方程和初速度估算苛求芽孢杆菌胞内尿酸酶最大反应速度,按Arrenius经验公式得到该尿酸酶在pH 9.2和pH 7.4的活化能,但这些活化不能解释其在两个pH下的催化活性差异.该酶同常见嘌呤衍生物氧嗪酸、黄嘌呤和尿酸有亲和力,但对尿酸亲和力最低,且亲和力与嘌呤衍生物解离成阴离子的能力相关.在生理条件下,该酶对尿酸的亲和力相对于最适条件有显著下降.据此推测,优化静电相互作用选择性增强该酶对尿酸的亲和力是提高其成药性的可能措施之一.
- 李想冯娟张纯蒲军杨晓兰袁拥华廖飞
- 关键词：尿酸酶尿酸活化能
- 来自苛求芽孢杆菌的两种尿酸酶和其突变体及它们的聚乙二醇修饰与应用
- 来自苛求芽孢杆菌的两种尿酸酶和其突变体及它们的聚乙二醇修饰与应用；具体涉及来自苛求芽孢杆菌胞内和胞外的两种天然尿酸酶的同四聚体及它们各自的氨基酸序列，及这两种尿酸酶的N端前七个氨基酸缺失或被替换的突变体、C端缺失不多于十...
- 廖飞赵运胜杨晓兰李想张纯冯娟卜友泉谢燕玲
- 作用于血液中低分子物质的大分子药物的体外给药装置及其应用
- 本发明公开了一种作用于血液中低分子物质的大分子药物的体外给药装置及其应用，血液净化器包括壳体，壳体内设置由截留分子量大于等于3000Dalton物质的半透膜隔开的反应腔和血液通道，血液通道设置进口和出口，反应腔内装有用于...
- 廖飞杨晓兰袁拥华赵运胜冯娟张纯谢燕玲
- 文献传递
- 一种用4-硝基-1-萘酚或其衍生物为显色团制备β-半乳糖苷酶显色底物的方法及其应用
- 一种用4-硝基-1-萘酚或其衍生物为显色团制备β-半乳糖苷酶显色底物的方法及其应用；先将β-D-吡喃半乳糖所有羟基用包括但不限于甲酸和乙酸的短链羧酸生成酯，再与HBr的甲酸或乙酸溶液反应得α-溴代半乳糖多羧酸酯，进一步在...
- 廖飞杨晓兰党纪政刘红博张奕李元丽
- 文献传递
