岳欢 作品数:13 被引量:18 H指数:3 供职机构: 遵义市第一人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 贵州省优秀科技教育人才省长资金项目 贵州省教育厅青年基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
IL-31对肺泡Ⅱ型上皮细胞A549表达CCL2的影响 被引量:4 2015年 目的通过体外实验研究IL-31对肺泡Ⅱ型上皮细胞A549表达趋化因子C-C趋化因子配体2(CCL2)的影响,探讨IL-31在支气管哮喘气道炎症中的作用。方法体外培养肺泡Ⅱ型上皮细胞A549,用不同浓度(10、50、100 ng/m L)IL-31作用A549细胞、相同浓度(10 ng/m L)IL-31作用A549细胞不同时间(12、24、36 h),收集细胞,提取细胞总RNA,荧光定量PCR法分析趋化因子CCL2 m RNA的表达情况。结果不同浓度IL-31作用于A549细胞后,趋化因子CCL2的表达较正常未处理组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);10 ng/m L IL-31作用A549细胞后,不同时间段CCL2的表达均增高,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-31作用于肺泡Ⅱ型上皮细胞A549后,趋化因子CCL2的表达明显增高,表明IL-31可能诱导肺组织细胞分泌趋化因子参与哮喘气道炎症过程。 高婧 杜青波 谭艳芳 岳欢 黄俊琼关键词:趋化因子CCL2 白细胞介素类 气管炎 负载核糖体蛋白L8的树突状细胞对黑色素瘤的抑制作用 被引量:1 2014年 背景与目的:研究发现核糖体蛋白L8(ribosomal protein L8,RPL8)在黑色素瘤中表达能激活黑色素瘤患者外周血单个核细胞增殖并产生白细胞介素2,提示RPL8可能参与抗肿瘤免疫应答,有望成为抗肿瘤治疗的靶点。本研究通过RPL8蛋白负载树突状细胞(dentritic cell,DC),探讨负载RPL8蛋白的DC对黑色素瘤的免疫效应。方法:原核表达RPL8蛋白,纯化后致敏小鼠骨髓来源DC,流式细胞仪检测DC表面标志,MTT法检测细胞毒性T淋巴细胞对小鼠黑色素瘤细胞的杀伤作用;负载RPL8蛋白DC免疫治疗小鼠后,观察肿瘤体积变化及小鼠生存时间。结果:纯化蛋白经蛋白质印迹法(Western blot)分析见约28×103大小的特异性条带;DC经RPL8及细菌脂多糖(Lipoplysaccharide,LPS)诱导成熟后细胞表面CD11c、CD80、MHC-Ⅰ类、MHC-Ⅱ类分子表达增高,能激活T淋巴细胞,对B16细胞有抑制作用,RPL8-DC组的抑制率在效靶比为30∶1时高达70%,较PBS组和DC组明显增高;负载RPL8蛋白DC免疫治疗小鼠后,肿瘤体积缩小,小鼠的生存期明显延长。结论:负载RPL8的DC对黑色素瘤有生长抑制作用。 李燕 尹令丝 岳欢 黄俊琼 胡永林关键词:树突状细胞 黑色素瘤 免疫治疗 RIBOSOMAL PROTEIN 孕哺期暴露壬基酚对雄性仔鼠脑皮质肿瘤坏死因子-α表达的影响 被引量:1 2014年 目的观察母鼠孕期和哺乳期暴露壬基酚(NP)对其雄性仔鼠脑皮质肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法根据妊娠时间将32只孕鼠随机分为对照组及NP低、中、高剂量暴露组,每组各8只;消化道暴露剂量分别为0、25、50、100 mg/(kg·d);暴露时间为受孕第6天到出生后21 d(仔鼠哺乳结束)。采用免疫组织化学方法检测仔鼠出生后21、60 d脑皮质TNF-α表达水平,分析其表达水平与NP暴露之间的关系。结果与对照组比较,NP低、中、高剂量暴露组仔鼠出生后21、60 d TNF-α表达水平增高。结论 NP孕期暴露使仔鼠脑皮质TNF-α表达水平增加,炎性反应可能是NP引起仔鼠脑皮质损伤的机制。 张恒 俞捷 岳欢 罗娅 封校亚 许洁关键词:壬基酚 仔鼠 IL-31单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立 被引量:3 2014年 目的:制备抗人IL-31单克隆抗体,建立ELISA检测体系。方法:采用合成免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备抗IL-31单克隆抗体,用HRP标记单克隆抗体,ELISA和Western blot法检测抗体的亚类、滴度和特异性;采用ELISA技术制备IL-31检测试剂盒,并对自制试剂盒进行评价。结果:获得了两株稳定产生抗IL-31单克隆抗体的杂交瘤细胞,抗体亚类均为IgG3,抗体特异性好,杂交瘤细胞诱生的腹水抗体效价达106。试剂盒检测灵敏度为5.726 pg/ml,检测IL-1、IL-6、TNF-α、RF的P/N值均小于2.1,为阴性,靶抗原IL-31的检测结果为阳性(P/N值=13.76);自制试剂盒检测特应性皮炎血清IL-31水平为(532.83±90.39)pg/ml,对照组血清IL-31水平为(103.31±19.17)pg/ml,皮炎组明显高于对照组,有显著性差异(P<0.001)。结论:成功制备了抗IL-31单克隆抗体,建立的ELISA试剂盒可用于临床检测IL-31。 董革辉 魏培 黄俊琼 杜青波 岳欢 杜文胜 谭艳芳 孙万邦关键词:IL-31 单克隆抗体 孕哺期壬基酚暴露对雄性仔鼠肾上腺TNF-α、IL-1β表达的影响 2014年 目的观察母鼠在孕期和哺乳期壬基酚(NP)暴露对雄性仔鼠肾上腺TNF-α和IL-1β表达水平的影响及血清中激素水平的变化。方法根据妊娠时间将32只孕鼠随机分为对照组及低、中、高剂量暴露组;消化道暴露,暴露剂量分别为0、25、50、100 mg/(kg·d);暴露时间为受孕第6 d到出生后21 d(仔鼠哺乳结束)。免疫组织化学法检测仔鼠出生后21、60 d肾上腺TNF-α和IL-1β表达;放免法检测血清中激素水平的变化,并分析上述变化与NP暴露之间的关系。结果与对照组比较,低、中、高剂量组21、60 d TNF-α和IL-1β光密度增高(F=4265.850;96.191及428.759;1519.815,P<0.05),随给药剂量和给药时间的增加,21、60 d时的光密度增高,与NP暴露剂量呈正相关。血清睾酮水平随NP暴露剂量增加而降低,雌二醇水平随NP暴露剂量的增加而增加。结论 NP孕期暴露使仔鼠肾上腺炎性介质TNF-α和IL-1β表达增加,炎症性反应可能是NP引起仔鼠肾上腺损伤的机制,而肾上腺的损伤可能导致肾上腺功能异常并进而影响仔鼠的血清激素水平。 张恒 俞捷 岳欢 罗娅 封校亚 许洁关键词:壬基酚 仔鼠 IL-1Β 基因芯片对哮喘小鼠趋化因子及其受体差异表达的筛选与分析 被引量:4 2014年 目的用SABioscience基因芯片检测小鼠哮喘模型中84个趋化因子及其受体基因,并初步筛选分析其与支气管哮喘的相关性。方法用OVA构建哮喘小鼠模型,于末次激发后取右肺组织进行HE染色,并提取左肺组织总RNA,用SABioscience芯片检测84个趋化因子及其受体基因的表达水平。结果成功构建哮喘小鼠模型,哮喘组与对照组相比,表达上调的趋化因子21个,趋化因子受体13个;表达下调的趋化因子4个。结论 SABioscience芯片可有效地筛选出哮喘小鼠差异表达的趋化因子及其受体,对进一步深入探讨哮喘的发病机制及预防具有重要意义。 岳欢 李燕 高婧 江涛 黄俊琼关键词:支气管哮喘 趋化因子 受体 基因芯片 肿瘤科用活检取样器 本方案公开了医疗器械技术领域一种肿瘤科用活检取样器。包括针筒、取样针和真空泵;针筒的顶部边缘延伸出翼板,翼板与针筒的连接处设有与针筒同轴的凹槽;针筒顶部的通口处设有塞阀,塞阀包括同轴连接的固定垫片、活动垫片和塞子,固定垫... 岳欢 张薇薇 查何文献传递 IL-31RA基因敲除小鼠纯合子模型的建立 被引量:2 2015年 目的:建立IL-31RA基因敲除小鼠纯合子模型,为IL-31RA基因相关研究提供动物模型。方法:IL-31RA基因敲除小鼠严格按照SPF级要求的动物饲养标准进行饲养繁殖,采用聚合酶链式反应(PCR)法鉴定子代小鼠的基因型,RT-PCR法鉴定小鼠IL-31RA mRNA的表达,Western blot鉴定IL-31RA蛋白的表达,HE染色观察小鼠重要脏器的形态学变化。结果:PCR法成功检测出子代小鼠的3种基因型,纯合子基因敲除小鼠未检测出IL-31RA mRNA和IL-31RA蛋白的表达,IL-31RA基因敲除小鼠的重要脏器的形态学特征与野生型小鼠比较无明显变化;基因敲除小鼠可成功饲养繁殖,亦可获得较多的基因敲除纯合子小鼠。结论:成功构建了IL-31RA基因敲除小鼠纯合子模型。 江涛 高婧 岳欢 高雅倩 黄俊琼关键词:基因敲除 反转录PCR WESTERN BLOT IL-31对小鼠肺泡上皮细胞趋化因子表达的影响 被引量:2 2015年 目的体外分离培养小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞,探讨IL-31对肺泡上皮细胞表达趋化因子的影响。方法酶消化法分离及免疫吸附法纯化小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞,透射电子显微镜观察细胞形态及结构,免疫荧光技术检测细胞SP-A的表达。用100 ng/ml IL-31作用小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞24 h后提取细胞RNA,PCR芯片检测小鼠肺泡上皮细胞趋化因子及其受体的表达。结果透射电镜观察发现细胞内存在板层小体,呈同心圆状或平行排列;激光共聚焦显微镜观察可见细胞内有黄绿色荧光;小鼠肺泡上皮细胞经100 ng/ml IL-31作用24 h后,基因芯片检测细胞中表达上调的趋化因子和细胞因子基因11个、受体基因8个。结论成功分离培养小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞,IL-31可诱导肺泡上皮细胞表达趋化因子,表明IL-31可通过诱导趋化因子参与气道炎症反应。 岳欢 高婧 江涛 高雅倩 黄俊琼关键词:肺泡上皮细胞 趋化因子 基因芯片 一种紫外灯灯光强度检测装置 本方案公开了光照强度检测技术领域的一种紫外灯灯光强度检测装置,包括壳体,所述壳体内设有比色卡和紫外光强度检测膜,所述比色卡的正上方设有透明板,透明板的靠近紫外光强度检测膜的一侧设有倾斜的挡光板,挡光板位于透明板的正上方。... 查何 张薇薇 岳欢文献传递