季爱加
- 作品数:3 被引量:26H指数:2
- 供职机构:上海海洋大学更多>>
- 发文基金:上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程更多>>
- 原核表达载体pET28a-EGFP的构建与表达被引量:16
- 2011年
- 以质粒PEGFP-N3中增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)基因片段为模板,利用PCR技术扩增得到EGFP基因片段,并设计引物在其2端引入酶切位点EcoRⅠ和HindⅢ,对引入酶切位点的EGFP片段和pET28a质粒进行双酶切处理后,利用T4连接酶连接得到了重组质粒pET28a-EGFP。利用热击法把得到的重组质粒pET28a-EGFP转化至E.coliBL21(Escherichia coliBL21)感受态细胞中,当大肠埃希菌LB(Luria-Bertani)培养液在600 nm下的光密度值OD600=0.4时,通过添加异丙基硫代β-D-半乳糖苷(IPTG)作为诱导剂诱导EGFP表达。结果表明:重组质粒酶切鉴定及测序结果正确。在自然光下,转化子在LB固体培养基(含1 mmol/L的IPTG和50μg/mL的卡那霉素(Kan))中菌落呈绿色。在荧光显微镜下受蓝光激发,可以清楚观察到发绿色荧光的转化子。成功构建的原核表达载体pET28a-EGFP在E.coliBL21中得到了高效表达,为以后作为荧光标记物标记食源性病原菌提供了一定的理论和技术支持。
- 季爱加宁喜斌
- 关键词:绿色荧光蛋白大肠埃希菌
- 《食品安全学实验》教学改革的探索与实践被引量:10
- 2011年
- 为适应高等教育发展的要求,培养更多高素质的食品安全检测的专业人才,对食品安全学课程的实验教学进行探索和尝试是十分必要的。该文主要介绍了教学内容与教学方式的改革探索与实践,全面提高了教学质量,取得了实验教学的理想效果。
- 宁喜斌张晓艳季爱加张亚琼
- 关键词:教学改革教学方法
- 一种检测活的非可培养状态副溶血性弧菌的方法
- 本发明涉及一种检测样品中是否存在活的非可培养状态(VBNC)副溶血性弧菌的方法,包括步骤:以抽提自所述样品的总RNA为模板,用rpoS基因的特异性引物对进行逆转录聚合酶链反应,从而扩增出对应于rpoS基因的扩增产物;检测...
- 宁喜斌郝小斌鲁艳莉赵德畅张晓艳季爱加陈婵娟张祈费国琴
- 文献传递