孟祥兵
- 作品数：14 被引量：131H指数：5
- 供职机构：中国农业大学农学与生物技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 马铃薯Y病毒RNA-介导的抗病性及与转基因拷贝数间的关系
- 该研究通过根癌农杆菌介导的转化法,将可翻译的马铃薯Y病毒坏死株系(potatovirusYnecrosisstrain,PVY<'N>)的外壳基因(CPN)和非翻译的马铃薯Y病毒坏死株系外壳蛋白基因(CPM)转入烟草栽培...
- 孟祥兵
- 关键词：马铃薯Y病毒外壳蛋白基因RNA介导病毒抗性
- 文献传递
- 翻译和非翻译马铃薯Y病毒外壳蛋白基因介导的抗病性比较被引量：44
- 2001年
- 利用RT PCR方法克隆获得马铃薯Y病毒烟草叶脉坏死株系 (PVYN)的可翻译和不可翻译外壳蛋白 (CP)基因 ,并分别插入 pROKⅡ质粒中获得重组双元表达载体。通过根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens) 介导的基因转化方法 ,将可翻译和不可翻译的PVYN CP基因分别导入烟草栽培品种NC89叶片组织中 ,得到抗卡那霉素的再生植株。对所得到的抗卡那霉素的再生苗进行PCR检测表明 ,被导入可翻译和不可翻译CP基因的植株分别占卡那霉素抗性植株的 95 %和 98%。攻毒实验表明 ,两种类型的转基因烟草对PVYN 的抗病性具有相似性 ,其表现型为 :免疫、抗病和感病。免疫型转基因植株的抗病性不受接种物类型及其剂量的影响。Southern印迹杂交结果显示 ,目的基因已经整合到烟草基因组中。Northern印迹杂交证明 ,两种类型的CP基因都已在RNA水平上得到了表达 ,但细胞内RNA的积累量与转基因植株的抗病强度成负相关。Western印迹杂交表明 ,在表达不可翻译PVYN CP基因的转基因植株内未检测到CP蛋白 ,而在导入可翻译的PVYN CP基因的植株内检测到了CP蛋白 ,且CP蛋白含量与抗病性不存在正相关。本研究结果证明 ,表达可翻译与不可翻译PVYN CP基因的转基因烟草对PVYN 的抗病性均为RNA介导的抗病性。
- 郭兴启温孚江宋云枝孟祥兵吕士恩郑成超朱常香
- 关键词：马铃薯Y病毒外壳蛋白基因RNA介导抗病性翻译
- 转移DNA
- 2001年
- 张杰道孟祥兵
- 关键词：农杆菌介导T-DNA基因表达
- 植物转基因沉默与病毒抗性被引量：5
- 2001年
- 对植物基因沉默的机制及其在植物抗病毒基因工程中的应用作了综述 .植物转基因沉默是转基因植株中普遍发生的一种现象 ,引起植物转基因沉默的原因是多方面的 ,但主要涉及转录水平的基因沉默和转录后水平的基因沉默 .
- 孟祥兵田玉安王秀芳王爱菊
- 关键词：DNA甲基化共抑制
- 植物分子育种方法研究进展被引量：13
- 2001年
- 综述了各种植物外源遗传物质转移方法 ,就其原理和各自特点作了概述 .并且展望了各种转基因方法的应用前景 。
- 张杰道孟祥兵
- 关键词：植物转基因
- 植物转座因子被引量：1
- 2001年
- 王爱菊孟祥兵
- 关键词：转座因子转座机制植物
- 朊病毒和朊病毒病研究进展被引量：3
- 2002年
- 朊病毒病即海绵状脑病,是人和动物中的一类致死性中央神经系统疾病,近几年来在朊病毒病的致病机制及其诊断技术和防治策略方面取得了很大的研究进展.
- 李学涛王洪海孟祥兵
- 关键词：朊病毒朊病毒病
- 转录后基因沉默被引量：5
- 2002年
- 转录后基因沉默 (PTGS)普遍存在于生物界 ,如植物的共抑制、源于病原的 RNA介导的病毒抗性、真菌的基因沉默和动物的 RNA干扰等。这类现象有许多共同特点 ,如都是以向细胞内引入核酸 (转基因、双链 RNA或病毒 RNA)为诱因 ,依赖 RNA的 RNA聚合酶 (Rd RP)活性与基因沉默密切相关 ,在发生基因沉默的细胞中大多存在特定长度的小分子 RNA(2 1～ 2 5 nt) ,PTGS导致细胞质内 m RNA的特异性降解 ,不同生物的 PTGS相关基因及产物具有很高的相似性 ,基因沉默能够在细胞间传播并能以表型遗传的方式传递给下一代等。这说明各种生物的转录后基因沉默可能有相似的遗传起源 ,是一种抵抗外来核酸 (如病毒和转座子 )
- 刘红梅孟祥兵温孚江
- 关键词：共抑制RNA干扰RNA聚合酶反义RNA双链RNA转录后基因沉默
- 利用RNA介导的抗病性获得高度抗马铃薯Y病毒的转基因烟草被引量：49
- 2001年
- 以马铃薯 Y病毒坏死株系 (PVYN)的 RNA为模板 ,应用反转录 -聚合酶链式反应 (RT- PCR)方法 ,扩增出长度为 80 1bp的非翻译的马铃薯 Y病毒外壳蛋白基因。将扩增的片段克隆到 p BSK的Bam HI和 Kpn I之间并进行了序列测定。用 Bam HI和 Kpn I从重组克隆载体上切下该基因并插入到质粒 p ROKII内得到植物表达载体 p PVYCP。通过根癌农杆菌 (LBA4 40 4 )介导的方法转化烟草NC89,经卡那霉素抗性筛选、PCR和 Southern blot检测 ,获得 82株转基因植株。 Northern blot和Western blot分析表明 ,转基因植株只在 RNA水平上得到了表达。抗病性试验表明转基因植株之间抗性水平存在着差异 ,其中有 7株是对 PVYN高度抗病性的植株。转基因植株抗病特异性试验初步表明 ,对 PVYN 表现高度抗病的植株对 PVYO 也具有高度抗病性。
- 郭兴启吕士恩朱常香宋云枝孟祥兵郑成超温孚江
- 关键词：RNA介导病毒抗性马铃薯Y病毒转基因烟草
- 基因沉默被引量：14
- 2001年
- 孟祥兵王秀芳
- 关键词：转录后基因沉默植物病毒抗性RDRP
