青年及老年大鼠下丘脑弓状核阿黑皮素原mRNA的表达 2001年 目的 :观察青年和老年期大鼠下丘脑弓状核阿黑皮素原 m RNA(POMC m RNA)的表达水平。 方法 :应用原位杂交技术显示 POMC m RNA和用计算机图像分析观察杂交信号的强弱及阳性细胞的面积。 结果 :与青年组相比 ,老年组下丘脑弓状核及其附近区域 POMC m RNA阳性神经元的平均灰度值下降 ;POMC m RNA阳性神经元的数目无明显变化。结论 :老年期 POMC m RNA阳性神经元相应的 m RNA表达水平下降可能是下丘脑 POMC基因衍生肽表达水平下降的原因之一。 向正华 孟璘 蒋玲 钱国桢关键词:原位杂交 计算机辅助图像处理 下丘脑 弓状核 大鼠下丘脑内侧区生长抑素神经元的生后发育 被引量:3 1993年 实验应用丙烯醛浸泡固定,PAP免疫组化方法,对生后0~30天大鼠下丘脑内侧区背、腹内侧核生长抑素(somatostatin,SS)神经元的生后发育进行了观察.结果表明新生大鼠下丘脑背,腹内侧核SS神经元形态发育较为成熟.生后阶段SS神经元数量呈增多趋势.二周达高峰,背内侧核SS神经元染色明显变浅.三周腹内侧核大多数SS神经元消失,仅见少数阳性神经元散在分布.但在背内侧核内仍可见到浅染的SS神经元胞体,结果提示下丘脑室周核以外的内侧区SS神经元在新生时形态发育已趋成熟.从个体发育的角度证明下丘脑内存有两类SS神经元系统.背,腹内侧核SS神经元系在生后发育过程中可能对下丘脑内神经元的生长发育起调节作用. 姚钧 钱国桢 孟璘关键词:下丘脑 生长抑素 发育 短期饥饿对老年、成年大鼠下丘脑加压素神经元及血浆皮质酮的影响 被引量:5 1993年 免疫组化光、电镜法观察禁食五天老年及成年大鼠下丘脑精氨酸加压素(AVP)神经元,并检测其血浆皮质酮(B),与同龄正常鼠相比.结果:(1)B均值明显升高(P<0.01),(2)各神经核团的阳性神经元有增有减,非同步变化,(3)正中隆起外带阳性纤维密集,面积增加,(4)视上核主部及室旁核的神经元粗面内质网层次增多,线粒体较密集,(5)成年饥饿鼠阳性细胞总数增加,但其视上核主部的减少,并和血浆B的增加负相关(r=-0.98,P<0.01),而老年饥饿鼠阳性细胞总数减少,且和血浆B的相关性不明显.实验结果表明:血浆B和下丘脑AVP神经元均有明显应激反应,不论成年或老年鼠对短期饥饿均呈现合成及分泌AVP较旺盛的结构变化,但老年的饥饿应激反应弱于成年鼠的. 朱成 刘淑琴 姚钧 陈建新 江翠娥 孟璘 钱国桢 严进关键词:下丘脑 免疫组织化学 饥饿 用非同位素原位杂交组化在光镜和电镜水平观察前阿黑皮素mRNA在垂体的分布 被引量:12 1994年 用地高辛标记反意前阿黑皮素(pro-opiomelanocortin,POMC)cRNA探针原位杂交组化在光镜和电镜水平观察了POMC mRNA在大鼠垂体的分布,并比较了碱性磷酸酶(AKP)显色系统和辣根过氧化酶(HRP)显色系统在光镜水平上的敏感性.结果:POMC mRNA广泛地分布于垂体的中间叶和前叶.中间叶全部细胞均为POMC mRNA阳性.前叶中除前叶的腹侧缘和前叶与中间叶交界处阳性细胞较少外,都有较多的POMC mRNA阳性细胞分布.AKP显色系统比HRP显色系统敏感.在电镜水平,POMC mRNA主要分布于粗面内质网,少数分泌颗粒可能呈阳性反应,胞核未见阳性反应沉淀.文内还就阳性分泌颗粒在调节细胞合成功能方面可能起的作用进行了讨论. 向正华 刘淑琴 孟璘 王代学 钱国桢 蔡文琴关键词:垂体 MRNA 生长抑素mRNA与神经肽Y,催产素在大鼠前脑内的分布及其共存现象──地高辛标记c-RNA探针原位杂交与免疫组化联合法 被引量:5 1994年 本实验应用地高辛标记cRNA探针原位杂交组化和免疫组化联合法在同一切片上先后显示了生长抑素mRNA神经元和催产素神经元,生长抑素mRNA神经元和神经肽Y神经元。结果表明生长抑素mRNA及神经肽Y广泛地共存于大鼠的大脑新皮质,尾壳核,以及海马等处的神经元中。所有位于大脑新皮质,尾壳核处的神经肽Y神经元均含有生长抑素mRNA,部分位于海马的神经肽Y神经元含有生长抑素mRNA,而所有位于下丘脑弓状核,室周核的神经肽Y神经元均不含有生长抑素mRNA;生长抑素mRNA与催产素虽然共同分布于下丘脑许多核区,但未见共存于同一神经元。本文对地高辛标记cRNA探针原位杂交组化以及它与免疫组化联合法的技术问题进行了讨论。 向正华 蔡文琴 孟璘 钱国桢 王代学关键词:生长抑素MRNA 催产素 脊髓伤对断面上方脊髓及下丘脑生长抑素神经元的影响 被引量:2 1992年 用免疫组化光镜、电镜方法,观察脊髓半横断18天后大鼠的脊髓和下丘脑SS神经元的分布状况。主要结果:(1)脊髓损伤侧断面上方的背角I~Ⅲ板层,呈色较淡,其SS阳性反应既弱于健侧,也弱于对照鼠两侧相应区域的反应。(2)下丘脑SS阳性细胞增多,在室周核尤为显著(P<0.05);(3)电镜观察显示:断面上背角SS阳性细胞内阳性颗粒甚少,偶见变性胞体及纤维,室周核SS神经元阳性物则较多,细胞器也较丰富。著者认为:断面上方背角区的变化主要与SS上行传导纤维离断,而其远端SS量减少有关,室周核SS神经元的增多,则可能为代偿性的负反馈之结果。 江翠峨 孟璘 朱成 刘淑琴 钱国桢关键词:脊髓 下丘脑 生长抑素 从果蝇染色体DNA制备RNA探针及其染色体原位杂交定位 被引量:1 1993年 在相差显微镜下显微切割野生型黑腹果蝇唾液腺X染色体的1区片段,抽提该片段的DNA并与PGEM3Z质粒重组,然后转化到JM103 E.colt中,共切割12个染色体,抽提到大约10pgDNA,经重组、转化获得9个重组子。提取其中5个重组质粒分析其重组片段,2个约为0.6kb,另3个约为3.0kb。2个约为0.6kb重组片断用依赖DNA模板的SP6RNA聚合酶体外合成~3H标记的RNA,以此作探针进行染色体原位杂交定位,被克隆片段定位在果蝇唾液腺X染色体1E,1F位点上。本文结果表明重组到PGEM3Z质粒中染色体DNA可直接作为合成RNA探针的模板。 蔡平 王瑾瑛 陈铁河 向正华 孟璘 王新民 李怀义关键词:RNA探针 原位杂交 果蝇 DNA 秋水仙素对大鼠前脑生长抑素mRNA表达的影响 被引量:1 1995年 本实验用地高辛标记生长抑素(SOM)反意。RNA探针原位杂交组织化学研究了秋水仙素对大鼠前脑SOMmRNA表达的影响。结果表明秋水仙素对前脑各核区SOMmRNA的表达有明显的影响。结果表明秋水仙素对前脑各核区SDMmRNA的表达有明显的核区特异性:大脑新皮质各区,隔核和脚内核中SOMmRNA阳性神经元数目及含量增加;海马复合体和下丘脑室周核和弓状核中SOMmRNA阳性神经元数目及含量下降;嗅脑,尾壳核和丘脑等核区的则无明显变化、秋水仙素对SOMmRNA表达的核区特异性对正确分析秋水仙素条件下获得的神经肽或神经递质的定位资料具有重要的指导意义。 向正华 蔡文琴 孟璘 钱国桢 王代学关键词:秋水仙素 前脑 生长抑素MRNA 原位杂交组织化学 原位杂交组织化学与免疫组织化学结合法的研究 被引量:2 1993年 介绍一种用原位杂交组织化学与免疫组织化学结合法在同一切片中显示生长抑素mRNA和相对应的生长抑素.同时还比较了六种不同固定液对原位杂交组织化学和原位杂交组织化学与免疫组织化学结合法的影响.结果表明Zamboni氏固定液用于原位杂交组织化学与免疫组织化学结合法最佳,而4%多聚甲醛磷酸缓冲液用单纯原位杂交最佳.原位杂交组织化学与免疫组织化学结合法显示的下丘脑室周核生长抑素免疫反应阳性神经元均含有相应生长抑素mRNA,而且多数神经元生长抑素基因的转录量与生长抑素的翻译量成正比. 向正华 蔡文琴 孟璘 钱国桢 王代学关键词:原位杂交 组织化学 免疫组织化学 超致死量^(60)Co丙种射线对大鼠下丘脑神经分泌大细胞的影响 1985年 成年雄性大白鼠受^(60)Co丙种射线全身一次照射2000拉德后,下丘脑室旁核大细胞内神经分泌物逐日增多。电镜观察照射后3天室旁核大细胞,看到核糖体增多,高尔基复合体合成面外侧池膨大,各种小泡明显增加。作者认为上述变化可能与应激反应有关。 钱国桢 刘道德 孟璘 王代学 丛利关键词:视上核 大细胞 下丘脑 间脑 致死量