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毕赤酵母发酵生产颗粒性乙肝表面抗原的条件优化(英文)被引量：2: 2008年; 乙型肝炎病毒的流行对人们的生命健康造成了极大的威胁，而有效准确的诊断和预防性疫苗是阻止其流行的主要手段，乙肝表面抗原是诊断试剂和疫苗的主要成分。本试验在构建稳定表达HBsAg的毕赤酵母菌株后，对其发酵条件进行了研究。采用摇瓶分批培养方法，探讨了不同培养基、溶解氧、诱导物甲醇的浓度以及pH值等因素对菌体生长与重组蛋白表达的影响。在10L发酵罐上采用分批补料培养的方法研究了进行扩大培养生产重组HBsAg。结果表明，FBS无机盐合成培养基是理想的工业发酵培养基，溶解氧对菌体的生长与表达有显著的影响，甲醇诱导最佳终浓度为1％（V／V），发酵的最适pH值为5．4～6．0。发酵罐放大培养后，ELISA和SDS—PAGE分析表明重组HBsAg获得了高效表达，最终菌体生物量达到310 OD600，表达量达到27mg／L。电子显微镜观察表达重组乙肝抗原可以自组装为22nm类病毒颗粒，为HBV的新一代早期血清学诊断和疫苗的大规模生产提供了一定的参考。; 刘如石林亲录孙意邱义兰徐甜丁海郭向荣; 关键词：发酵参数毕赤酵母重组乙肝表面抗原

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孙意