周雯 作品数:22 被引量:45 H指数:4 供职机构: 海南医学院 更多>> 发文基金: 海南省自然科学基金 博士后科研启动基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
IL-18/MAGE-1共表达基因疫苗抗肿瘤作用机制 <正>本实验应用构建的pcIL-18-MAGE-1基因疫苗免疫C57BL/6J小鼠,同时设空白对照组和阴性对照组,免疫后收集脾细胞作为效应细胞,分别作用于靶细胞即肝癌细胞株SMMC-7721、Hepal-6。应用FCM检... 齐亚灵 钟南田 张彦慧 洪灯 崔志刚 李跃萍 陆海霞 周雯 郑小桃文献传递 紧密连接蛋白claudin-10基因5′调控区序列的生物信息学分析 被引量:4 2010年 目的:研究紧密连接蛋白对claudin-10基因转录调控机制,并对潜在的转录因子结合位点进行分析。方法:利用BLAST比对分析TATA-box、GC-box和CAAT-box;利用在线分析软件Neural NetworkPromoter Prediction、PROMOTERSCAN和PROMOTER2.0分析claudin-10基因5′调控区序列中启动子;利用在线分析软件EMBOSS和CpGIsland Searcher分析claudin-10基因5′调控区序列中CpG岛位置;利用在线分析软件TFSEARCH分析claudin-10基因5′调控区序列中潜在的转录因子结合位点。结果:claudin-10基因5′调控区序列中存在1个CAAT-box和3个GC-box,没有TATA-box;claudin-10基因可能存在4个启动子位点;CpG岛为444bp区间(1700bp-2143bp)或834bp区间(1367bp-2200bp);评分在85分以上时,该区域具有159个潜在的转录因子结合位点;评分在90分以上时,该区域具有48个潜在的转录因子结合位点;评分在95分以上时,该区域具有9个潜在的转录因子结合位点。结论:通过生物信息学的方法对于claudin-10基因转录起始位点、启动子区域和潜在的转录因子结合位点进行预测,对于科研具有十分重要的指导意义,但最终的结论还需要实验来证实。 周雯 王青松关键词:紧密连接蛋白 生物信息学 人claudin-10基因启动子转录调控的初步分析 被引量:3 2015年 [目的]构建不同长度的人claudin-10基因上游启动子荧光素酶报告基因载体,并在LO2细胞中比较其活性。[方法]以人LO2肝细胞基因组DNA为模板,PCR扩增获得claudin-10基因5'侧翼序列,并将其插入p MD18-T载体;PCR扩增获得不同长度的claudin-10基因上游启动子区序列,构建p GL3-Basic系列荧光素酶基因报告载体。瞬时转染LO2细胞,双荧光素酶报告基因分析系统检测转录活性。[结果]成功构建6个不同长度的人claudin-10基因上游启动子区(-1 451/+100bp、-1 022/+100bp、-1 005/+100bp、-677/+100bp、-377/+100bp和-108/+100bp)的报告载体;启动子活性实验结果表明:当claudin-10启动子片段从-1 005 bp截短至-677 bp,从-108 bp截短至+100 bp时活性显著下降(P<0.05);其余截短时活性无改变(P>0.05)。[结论]claudin-10启动子-1 005bp^-677bp和-108bp^+100bp区是claudin-10基因的主要转录调控区。 周雯 王青松关键词:启动子 转录调控 荧光素酶报告基因 问题教学法在《组织学与胚胎学》实验课中的应用 在《组织学与胚胎学》实验课中采用问题教学法。实践表明,问题教学法有利于提高学生学习兴趣和自主学习能力,有利于促进理论知识的理解和记忆,是一种较好的《组织学与胚胎学》实验课教学方法。 周雯 齐亚灵 钟南田 郑小桃 洪灯 陆海霞 崔志刚 张彦慧关键词:《组织学与胚胎学》 实验课 高等医学教育 问题教学法 文献传递 ATP8基因在小鼠单个GV期卵母细胞中的表达和生物信息学分析 2011年 目的:探讨小鼠GV期卵母细胞线粒体中ATP合酶亚基8(ATP8)基因的表达情况及其生物信息学的分析。方法:应用挤压法从卵巢中分离获得生发泡期(germinal vesicle,GV)卵母细胞,用RT-PCR检测GV期单个卵母细胞中ATP8基因的表达;将GV期单个卵母细胞直接进行RT合成cDNA,然后再对回收产物构建克隆质粒并测序,最后用VECTOR NIT9.0、RNAdraw和Treeview等工具对测序结果进行生物信息学分析。结果:琼脂糖电泳结果表明ATP8基因在GV期卵母细胞中有表达;测序结果显示所测昆明小鼠ATP8序列与Genbank序列完全一致;mRNA二级结构图显示12种动物间的ATP8氨基酸序列和ATP8核酸序列有较大差异,其中不同品种小鼠间也有差异;不同物种ATP8核苷酸序列构建出的分子进化树中,小鼠与棕熊进化距离较远,与田鼠、家猫进化距离相对较近。结论:小鼠GV期卵母细胞特异表达的ATP8基因与卵母细胞的正常发育成熟相关。 洪灯 齐亚灵 张彦慧 钟南田 郑小桃 周雯关键词:小鼠 卵母细胞 生物信息学 IL-18在新生儿缺氧缺血性脑病中的表达及其意义 被引量:3 2011年 目的:观察白介素-18在缺氧缺血再灌注损伤新生鼠脑组织中的表达情况及通过监测新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿血清白介素-18的变化,探讨白介素-18与HIE的相关性。方法:①18只7日龄新生SD大鼠雌雄各半,随机分成3组:正常对照组、缺氧缺血再灌注2 h及4 h组,每组6只。断头取其脑组织,应用HE染色法观察病理变化,免疫组化SABC法检测IL-18表达情况。②HIE患儿于生后第1、3、7天分别测定血清IL-18含量。结果:①模型组IL-18表达均增强。②HIE患儿生后第1、3、7天血清IL-18含量较对照组均有升高,且中、重度HIE患儿血清IL-18含量高于轻度HIE患儿。结论:IL-18参与HIE的发病过程,检测血清中IL-18水平对判断HIE脑损伤程度、病情发展及预后具有一定意义。 洪灯 齐亚灵 王慧英 张彦慧 钟南田 郑小桃 周雯 郑佳玉关键词:婴儿 白细胞介素-18 缺氧缺血性脑病 诺贝尔奖在分子生物学实验第二课堂教学中的应用 被引量:5 2013年 分子生物学实验技术是现代生物医学的一门基础性学科,是理解生命科学中发展最快、最具活力的前沿学科——分子生物学的重要手段。为了提高教学效果,在教学中将诺贝尔奖获得者的工作成果与分子生物学实验技术教学相结合,激发了学生的学习兴趣,促进了学生缜密的科学思维、高尚的科研献身精神及创新性思维的建立和提高。 周雯 王青松 蔡望伟 周代锋关键词:分子生物学 教学方法 诺贝尔奖 claudin-10与原发性消化系统恶性肿瘤临床病理特征和预后相关性的系统评价和Meta分析 2022年 目的:应用Meta分析方法研究claudin-10表达与原发性消化系统恶性肿瘤患者临床病理和预后的相关性。方法:检索PubMed、Web of Science、Ovid MEDLINE、CNKI、维普、万方数据库,提取claudin-10表达与患者临床病理特征关系以及预后的数据,应用RevMan 5.3和Stata15.1软件进行Meta分析。结果:纳入6篇文献,512例原发性消化系统恶性肿瘤患者。原发性消化系统恶性肿瘤组织中claudin-10的高表达率显著高于正常对照组,差异具有统计学意义[OR=3.22,95%CI(2.26,4.60),P<0.01]。claudin-10高表达与肿瘤大小[OR=6.21,95%CI(2.44,15.83),P<0.01]、分化程度[OR=0.56,95%CI(0.32,0.99),P=0.05]、淋巴结转移[OR=3.41,95%CI(1.09,10.65),P=0.03]呈正相关;与患者性别[OR=1.62,95%CI(0.91,2.90),P=0.10]、年龄[OR=1.72,95%CI(0.97,3.07),P=0.06]、远处转移[OR=4.51,95%CI(0.55,36.70),P=0.16]、患者预后[HR=1.99,95%CI(0.93,4.23),P=0.08]无关。结论:claudin-10表达与原发性消化系统恶性肿瘤的临床病理特征相关,是潜在的肿瘤标志物。 周雯 王青松关键词:META分析 临床病理特征 预后 小鼠GV期卵母细胞的提取及其核质比分析 被引量:1 2011年 目的:提取小鼠GV(germinal vesicle,GV)期卵母细胞并分析其核质比。方法:用挤压法从卵巢中分离获得GV期卵母细胞,放入DEPC-NS液体快速清除颗粒细胞,获得GV期卵母细胞裸卵,并计算其核质比。结果:用挤压法分离获得的GV期卵母细胞有一完整球形核,核膜明显,含有单个折光的核仁,胞浆中心稍变黑并呈颗粒状,共51枚,测得其卵径为(40.940±3.341)μm,核径为(15.020±2.236)μm,其核质比为0.054±0.019。结论:用挤压法加DEPC-NS液体可快速破坏颗粒细胞之间的连接,便于迅速获得GV期卵母细胞裸卵;小鼠GV期卵母细胞的核质比为0.054±0.019,与其它物种同时相核质比在相同范围内,提示核质比是卵母细胞发育成熟的重要指标。 洪灯 符皎荣 张彦慧 钟南田 郑小桃 周雯关键词:小鼠 GV期卵母细胞 挤压法 共表达pcIL-18/MAGE-1 DNA疫苗对JEG-3细胞HLA-G基因表达的影响 2015年 目的观察共表达基因疫苗pc IL-18/MAGE-1对绒癌JEG-3细胞株HLA-G基因表达的影响,探究pc IL-18/MAGE-1抗肿瘤作用机制。方法应用构建的共表达pc IL-18/MAGE-1 DNA疫苗免疫小鼠,同时设阴性对照组和空白对照组,免疫后分别收集脾细胞,作用于靶细胞JEG-3,应用FCM检测小鼠T细胞亚群情况及NK细胞活性,MTT法检测肿瘤特异性CTL对靶细胞的杀伤率,RT-PCR法检测HLA-G基因表达情况。结果免疫组HLA-G基因表达降低,且对JEG-3细胞杀伤活性增加,与对照组比较,差异显著(P<0.05)。免疫组NK细胞活性及CD4+/CD8+、CD8+、CD4+值均高于对照组(P<0.05)。结论共表达基因疫苗pc IL-18/MAGE-1通过降低HLA-G基因的表达,进而增加NK细胞活性以及诱导肿瘤特异性CTL直接杀伤肿瘤细胞,发挥抗肿瘤作用。 齐亚灵 赵文杰 王伟群 杨广民 时阳 方艳秋 钟南田 洪灯 张彦慧 周雯 符皎荣关键词:MAGE-1 IL-18 绒癌 人类白细胞抗原-G