- 单克隆抗体亲和层析纯化绿脓杆菌外毒素A被引量：1
- 1990年
- 本文用间接ELISA法测定了本室研制的4株绿脓杆菌外毒素A单克隆抗体的相对亲和力。结果表明,它们的相对亲和力可排列为23B9>14F10>24B5>23C12。选用23B9制备免疫吸附柱,用于亲和层析纯化绿脓杆菌外毒素A。洗脱液用pH11.5,0.05 mol的二乙胺溶液,回收率为上柱样品的72.4％。所获纯化毒素对BALB/c小鼠的LD50为137ng,在SDS聚丙烯酰胺凝胶电冰中为一条带,保持有良好的毒性及免疫学活性。
- 胡福泉汪美先周善章
- 关键词：单克隆抗体
- 绿脓杆菌外毒素A单克隆抗体保护作用的实验研究被引量：1
- 1990年
- 本文研究了本室建株并稳定传代的7株杂交瘤所分泌的绿脓杆菌外毒素A单克隆抗体在细胞培养或小鼠体内的保护活性。实验结果表明,在培养细胞或BA-LB/c小鼠体内,对于纯化毒素的攻击,4株单抗均显示了不同程度的保护作用。但当用活菌攻击时,在小鼠体内,各单抗单独便用,未见明显保护效果,而4株单抗混合使用,则可明显延长动物存活时间。文中还讨论了针对绿脓杆茵外毒素A的主、被动免疫在实际应用中的可能性及局限性。
- 胡福泉汪美先周善章
- 关键词：单克隆抗体
- 旁路活化补体降低PMN吞杀绿脓杆菌力的实验研究被引量：1
- 1992年
- 为证明论题,本文做了3项实验:(1)人血PMN培养单层加上酵母多糖活化人血清(ZAHS)。PMN的超氧离子(O_2^-)、特殊颗粒(SG)与胞内杀菌力(ICBA)明显平行下降,于6 h最低,0.05 ml的作用最强。(2)经小鼠尾静脉注射0.5ml ZAHS/鼠,6 h后活杀。肺和血内PMN的上述指标均明显降低;肺内病变明显:急性间质炎,灶性水肿出血和萎陷,肺血屏障亚微结构损伤。(3)经抗人C_3、C_5血清(AHC_(3.5)S)体外中和的ZAHS,在体内外实验中均失去其有害作用。提示:ZAHS的有害作用与C_3、C_5碎片有关,在剂量适中且吞菌前作用时间较长的条件下方显极效。有害作用的可能机制:杀菌且能致炎的O_2^-与SG大多已于吞菌前排放在胞外,所以PMN的ICBA下降;累积于组织内的则损害PMN自身及其邻近的肺血屏障。这便于MOF与感染发生。
- 汪正清周善章
- 关键词：酵母多糖补体成分
- 大肠杆菌L-型在实验性慢性肾盂肾炎发病中的作用——病理组织学和免疫组织化学研究被引量：1
- 1991年
- 作者在已建立的大肠杆菌L-型实验性肾盂肾炎模型上,于细菌学观察的基础上进行了同步的病理组织学和免疫组织化学研究,发现该模型实验大鼠肾脏组织学改变程度较轻,全身一般情况良好,类似人类隐匿型肾盂肾炎;双桥PAP法染色显示,阳性酶染物形态与L-型菌相似,其分布不限于病灶内,光镜下正常的肾小管上皮细胞内亦可见到。本文还讨论了L-型菌在慢性肾盂肾炎发病中的作用。
- 王俊生周善章
- 关键词：肾盂肾炎免疫化学
- 抗绿脓杆菌外毒素A单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立(简报)
- 1989年
- 本文采用绿脓杆菌国际标准产毒株PA-103株，纯化绿脓杆菌外毒素A，免疫BALB／c小鼠。免疫鼠血清效价经ELISA法检测达1：80万。取脾脏混悬细胞10^8与10^7Sp2／0细胞，用50%oPEG(MW4，000)融合。取有克隆生长孔上清液用ELISA法筛选分泌抗体阳性孔。
- 胡福泉余国泉汪美先周善章
- 关键词：绿脓杆菌外毒素A杂交瘤细胞系单克隆抗体产毒株
- 旁路活化补体降低宿主抗感染条件与机制的实验研究被引量：5
- 1999年
- 目的为证明旁路活化补体降低吞噬细胞功能，了解宿主抗感染能力下降的条件与机制。方法分离人中性粒细胞（ＰＭＮ）和大鼠枯否细胞（ＫＣ）；ＰＭＮ和ＫＣ培养单层加上酵母多糖活化人血清（ＺＡＨＳ）；观测吞噬细胞胞内杀菌力（ＩＣＢＡ）、超氧阴离子（Ｏ－２）、酸性磷酸酶（ＡＣＰ）指标动态水平；以抗人Ｃ３Ｃ５血清（ＡＨＣ３Ｃ５Ｓ）中和阻断ＺＡＨＳ进行反证。结果００７～００９ｍｌＺＡＨＳ处理组，ＫＣ胞内Ｏ－２水平在３小时前高于对照组值，然后逐渐下降。００３～００５ｍｌＺＡＨＳ６小时略有下降。ＩＣＢＡ其动态变化与Ｏ－２的相似，但００３～００５ｍｌ４小时后略有下降。ＡＣＰ水平只降无升，随ＺＡＨＳ用量增加，下降幅度越低，以上各指标至６小时降至最低。０１１ｍｌＺＡＨＳ处理组４小时后约８５％～９０％ＫＣ破裂脱落。ＺＡＨＳ作用ＰＭＮ的指标动态基本类似ＫＣ的动态，只是ＰＭＮ指标在２小时之前升高，然后逐渐下降，以００５～００９ｍｌＺＡＨＳ对ＰＭＮ指标影响最大。阻断组Ｏ－２、ＡＣＰ、ＩＣＢＡ在６小时测定值显著高于ＺＡＨＳ处理组，但仍低于正常对照。结论ＺＡＨＳ使吞噬细胞功能下降与Ｃ３Ｃ５碎片作用有关，在大中剂量作用时间较长的条件?
- 汪正清熊杰周善章刘启富
- 关键词：补体枯否细胞抗感染创伤
- 抗绿脓杆菌毒素A单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立被引量：2
- 1990年
- 本文采用绿脓杆菌外毒素A免疫BALB/c小鼠取脾细胞与Sp2/0细胞融合,建立了6株分泌单克隆抗体的杂交瘤,分别命名为14F10,23B9,23F1,23C12,,24A6及24B5。其中,23F1及24A6在传代培养中逐渐丧失了分泌抗体的能力,其余4株可稳定地分泌抗体。它们的Ig亚类鉴定;14F10为IgM,23B9为IgC1,23C12为JgG2b,24B5为JgG1。注射入同系小鼠腹腔,可产生高滴度抗体,在夹心ELISA试验中己证实均为抗绿脓杆菌外毒素A特异性的。此外,文中还讨论了在间接ELISA初次筛选中出现的假阴性及假阳性的原因及其排除方法。
- 胡福泉余国泉汪美先周善章
- 关键词：杂交瘤单克隆抗体
- PMN的杀菌机理及其与补体的关系
- 1992年
- 中性粒细胞(PMN)保护机体免受病原微生物感染,主要通过依赖氧和不依赖氧的杀菌机理;前者如活性氧(O_2^-、H_2O_2、·OH和~1O_2等),后者如溶酶体酶类和碱性蛋白酶等。影响上述杀菌功能的因素很多,有促进,有促退。补体是重要因素之一;在不同条件下,以不同方式起有利或有害的影响。
- 汪正清周善章
- 关键词：中性粒细胞补体
- 绿脓杆菌外毒素A的结构与功能
- 1990年
- 本文扼要介绍绿脓杆菌外毒素A(PEA)的研究概况,然后重点评述近5年来有关PEA分子结构与功能的关系以及PEA特异性防治方面的最新研究进展。
- 胡福泉周善章汪美先
- 关键词：绿脓杆菌毒素
- 旁路活化补体对枯否细胞吞噬杀菌功能影响的实验研究被引量：1
- 1999年
- 目的：证明一定条件下，旁路活化补体可使ＫＣ吞噬杀菌功能失常。方法：观测定量培养的ＫＣ在ＺＡＨＳ作用下吞噬杀菌及分泌杀菌致炎物质功能的动态水平；观察大鼠肠系膜注射ＺＡＨＳ后肝组织的病理改变；以抗人Ｃ３、Ｃ５血清中和的ＺＡＨＳ进行反证。结果：①ＺＡＨＳ处理组，ＫＣ的ＰＩ和ＩＣＢＡ以及胞内Ｏ－２水平先升后降，胞内ＡＣＰ水平只降无升；ＩＣＢＡ与Ｏ－２和ＡＣＰ的水平均显著相关；各指标至６ｈ降至最低；②阻断组Ｏ－２、ＡＣＰ、ＩＣＢＡ在６ｈ水平保持在正常对照组的９７％、８３％和７９％，显著高于ＺＡＨＳ处理组；③肠系膜静脉注射ＺＡＨＳ１２ｈ后，大鼠肝组织轻度变性，部分ＫＣ线粒体受损，与ＫＣ相邻肝细胞出现凋亡改变，阻断组肝组织无明显病变。结论：ＺＡＨＳ中过量的Ｃ３、Ｃ５碎片持续作用能使ＫＣ吞噬杀菌功能下降，对肝组织结构亦有一定间接破坏作用。
- 熊杰汪正清周善章刘启富
- 关键词：补体枯否细胞
