史梦远
- 作品数：36 被引量：116H指数：6
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金高等学校骨干教师资助计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学机械工程文化科学更多>>
- 汉坦病毒嵌合基因G2S0.7在昆虫细胞中融合表达产物的免疫学研究被引量：5
- 2003年
- 在前期工作基础上,对汉坦病毒糖蛋白(GP)和核蛋白(NP)的嵌合基因G2S0.7表达产物的免疫学特性进行进一步的研究。将汉坦病毒含有G2S0.7嵌合基因的重组杆状病毒在昆虫细胞中融合表达并免疫BALB/c小鼠,用ELISA、微量细胞培养中和实验及淋巴细胞增殖实验检测免疫应答效果,以研究嵌合基因的免疫效果。结果表明,用该融合蛋白免疫小鼠,可诱导产生抗汉坦病毒NP及GP特异性的抗体,抗体效价分别为1∶3200及1∶200;同时融合蛋白还可刺激机体产生低水平的中和抗体和明确的淋巴细胞增殖反应。说明汉坦病毒G2S0.7嵌合基因表达的融合蛋白既可刺激机体产生特异性的抗汉坦病毒体液免疫应答,也可刺激机体产生特异性的细胞免疫应答,为进一步进行汉坦病毒基因工程疫苗的研究奠定了实验基础。
- 张芳琳刘勇白文涛吴兴安于澜史梦远胡刚王海涛徐志凯
- 关键词：汉坦病毒昆虫细胞
- 汉坦病毒糖蛋白G1酵母双杂交诱饵载体的构建及初步鉴定被引量：4
- 2003年
- 拟利用Ras募集系统RRS构建并鉴定含汉坦病毒囊膜糖蛋白G1的诱饵载体。将汉坦病毒76-118株囊膜糖蛋白G1基因与Ras基因连接,构建嵌合基因Ras-G1及Ras-G1'(G1'无前导肽序列)。将两个嵌合基因克隆入酵母表达载体pMet25,并转染至酵母温度敏感株cdc25-2,检测其对RRS系统的激活作用。限制性内切酶酶切鉴定表明,Met-G1和Met-G1'载体构建正确。激活试验为阴性。说明Met-G1和Met-G1'载体可用于从cDNA文库中筛选汉坦病毒受体。
- 白文涛张芳琳徐志凯吴兴安于澜史梦远胡刚王海涛
- 关键词：汉坦病毒糖蛋白酵母双杂交
- 汉坦病毒囊膜糖蛋白G1基因重组腺病毒载体的构建及其在Vero E6细胞中的表达被引量：2
- 2003年
- 拟构建汉坦病毒G1基因重组腺病毒载体并在VeroE6细胞中表达,为汉坦病毒基因疫苗的研究提供实验基础。PCR法从含汉坦病毒-76118株M基因的M56质粒扩增糖蛋白G1基因片段,利用穿梭质粒pShuttle,将其克隆入Adeno-X病毒DNA,获得重组腺病毒DNA,转染HEK293细胞,包装、扩增后得到汉坦病毒G1基因重组腺病毒原种,感染VeroE6细胞,用IFA法和ELISA法检测表达产物。得到了含汉坦病毒G1基因的重组腺病毒,其滴度约为1011pfu/ml,感染VeroE6细胞后检测到汉坦病毒糖蛋白G1的表达。
- 吴兴安张芳琳于澜史梦远白文涛胡刚刘勇王海涛徐志凯
- 关键词：汉坦病毒糖蛋白重组腺病毒
- 胎盘组织在乙型肝炎病毒宫内传播中的作用及其机制研究被引量：27
- 2001年
- 徐德忠闫永平王素萍刘蓬勃白钢钻王歆史梦远王雪萍
- 关键词：乙型肝炎病毒胎盘组织宫内传播
- 汉滩病毒76-118株G2S0.7嵌合基因重组腺病毒的构建及表达产物鉴定被引量：2
- 2004年
- 目的 :在本室前期工作的基础上构建汉滩病毒M基因G2片段与S基因 0 .7kb片段嵌合基因的重组腺病毒 .方法 :构建含有汉滩病毒G2S0 .7嵌合基因的转移载体pShuttle G2S0 .7,然后通过特异性的酶切将嵌合基因与腺病毒DNA相连 ,电转化E .coliJM1 0 9并用PCR方法进行筛选和鉴定 ,获得重组腺病毒Adeno G2S0 .7DNA ,转染HEK2 93细胞得到重组腺病毒 .进一步对重组腺病毒滴度和表达产物进行鉴定 .结果 :构建了含G2S0 .7嵌合基因重组腺病毒 ,滴度可达 1 0 1 3 ～ 1 0 1 5pfu/L ;该重组腺病毒感染HEK2 93细胞后 ,表达出可被抗汉滩病毒核蛋白及糖蛋白G2的特异性单抗 (mAb)所识别的融合蛋白 .结论 :利用腺病毒表达系统 ,成功地表达同时具有核蛋白及糖蛋白G2生物学活性的融合蛋白G2S0 .7。
- 张芳琳刘勇于澜胡刚吴兴安史梦远白文涛王海涛徐志凯
- 关键词：汉坦病毒基因表达腺病毒科
- 应用生物信息学网络资源分析预测融合蛋白的二级结构及其理化性质被引量：1
- 2008年
- 目的:利用生物信息学网络资源分析融合蛋白的二级结构及其理化性质,探讨分泌型抗成骨肉瘤单链双功能抗体基因的表达。方法:①将单链抗体基因(ScFv)与白细胞介素2基因亚克隆至反转录病毒表达载体PLxSN,重组质粒pL(ScFv-IL-2)SN在脂质体介导下转染PA317包装细胞,G418筛选,直至出现抗性克隆,扩大培养,用NIH3T3测定病毒滴度,将重组病毒感染人成骨肉瘤细胞命名为OSC/ScFv-IL-2。②以PCR,RT-PCR以及Western blotting对ScFv-IL-2基因修饰的OSC9901细胞进行鉴定。在构建融合蛋白之后,运用DNA分析软件(DNAssist)和蛋白质分析软件(ANTHEPROT V5)分析融合蛋白的氨基酸序列、二级结构及其理化性质。结果:①经酶切及PCR分析鉴定,成功地构建了融合基因表达载体pL(ScFv-IL-2)SN,并获得高滴度产毒细胞株C26;Western blotting分析证明ScFv-IL-2基因融合蛋白的表达。②运用DNAssist核酸序列分析软件分析ScFv-IL-2DNA序列翻译并获得了氨基酸序列,运用蛋白质分析软件(ANTHEPROT V5)分析融合蛋白的二级结构及其理化性质。结论:利用生物信息学网络资源可以分析预测融合蛋白的性质,为进一步探讨单链双功能抗体基因融合蛋白提供依据。
- 史梦远王海涛张芳琳
- 关键词：单链抗体生物医学工程
- 汉滩病毒囊膜糖蛋白G1基因重组腺病毒载体的构建及其在Vero E6细胞中的表达
- 本文采用PCR法从含汉滩病毒-76118株M基因的M56质粒扩增糖蛋白G1基因片段,利用穿梭质粒pShuttle,将其克隆入Adeno-XviralDNA,获得重组腺病毒DNA,转染HEK293细胞,包装、扩增后得到汉滩...
- 吴兴安张芳琳于澜史梦远白文涛胡刚刘勇王海涛徐志凯
- 关键词：汉滩病毒囊膜糖蛋白基因重组腺病毒载体
- 文献传递
- 汉滩病毒G1S0.7嵌合基因重组腺病毒的构建及鉴定
- HFRS在我国年发病人数为5-10万人,临床病情严重,病死率较高。由于该病早期诊断比较困难,且目前尚无HFRs特异性治疗药物,因此积极研究开发各类病毒疫苗,通过疫苗降低发病率是当前和长远防治该病的主要措施。由于目前传统疫...
- 张芳琳刘勇王海涛于澜胡刚吴兴安史梦远白文涛徐志凯
- 文献传递
- 基于C8051F020的心电测量系统设计被引量：1
- 2011年
- 为研制一种能够在临床上使用的心电测量系统,以C8051F020单片机为采集控制中心,运用模拟信号采集和数字信号处理技术,实现心电信号的采集。完成了心电测量系统的设计,该系统具有实现各种控制、数据采集和A/D转换等功能。实验结果本系统运行稳定可靠,满足了临床准确采集心电信号的需要。
- 史梦远崔骊黄殿忠
- 关键词：心电信号前置放大器C8051F020
- 单链抗体及重组白介素-2双功能抗体融合蛋白的表达及其软件预测被引量：1
- 2008年
- 目的利用生物信息学网络资源分析融合蛋白的二级结构及其理化性质,并探讨分泌型抗成骨肉瘤单链双功能抗体基因的表达。方法采用聚合酶链式反应(PCR)将人工合成的抗体分泌信号肽序列加在抗成骨肉瘤单链抗体(scFv)基因5′端,其3′与白介素-2(IL-2)基因连接构成分泌型单链双功能抗体scFv-IL-2基因,将该基因克隆至逆转录病毒表达载体PLxSN,重组质粒pL(scFv-IL-2)SN在脂质体介导下转染PA317包装细胞,G418筛选,直至出现抗性克隆,扩大培养,用NIH3T3测定病毒滴度,将重组病毒感染人成骨肉瘤细胞命名为OSC/scFv-IL-2,以PCR,RT-PCR以及Western blotting对scFv-IL-2基因修饰的OSC9901细胞进行鉴定。在构建融合蛋白之后,运用DNA分析软件DNAs-sist和蛋白质分析软件ANTHEPROTV5分析融合蛋白的氨基酸序列、二级结构及其理化性质。结果经酶切、PCR及Western blotting分析鉴定,成功地构建了融合基因表达载体pL(scFv-IL-2)SN,并获得高滴度产毒细胞株C26,scFv-IL-2融合蛋白通过DNAssist和ANTHEPROTV5软件分析获得了融合蛋白的二级结构及其理化性质。结论利用生物信息学网络资源进行分析预测融合蛋白的性质,为进一步探讨单链双功能抗体基因融合蛋白提供依据。
- 史梦远王海涛张芳琳
- 关键词：单链抗体融合蛋白
