刘文达
- 作品数：22 被引量：50H指数：4
- 供职机构：中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
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- 环格列酮通过PPARγ及P38 MAPK信号途径诱导白血病HL-60细胞凋亡被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）激动剂环格列酮（CGZ）对白血病HL-60细胞的增殖抑制作用及其作用机制.方法 以不同浓度的CGZ（10～50μmol/L）作用于体外培养的HL-60细胞24、48、72 h,应用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞生长抑制率,琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡时的DNA梯状条带,流式细胞术（FCM）及膜联蛋白V（Annexin-V）/碘化丙啶（PI）双染色法检测CGZ单独及联合PPARγ拮抗剂GW9662作用后细胞凋亡率的变化,反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及Western印迹检测药物作用后PPARγ表达水平的变化,并对半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号转导通路相关蛋白的表达水平进行检测.结果 30 μmol/L以上的CGZ可显著抑制细胞的生长,并呈现出明显的量-效与时-效关系.药物作用后72 h50 μmol/L CGZ对细胞的生长抑制率为84%±11%,明显高于40、30μmol/L CGZ对细胞的生长抑制率（72%±13%、59%±13%,P＜0.01）,而且药物作用72 h后在琼脂糖凝胶电泳上可见典型的DNA梯状条带.RT-PCR及Western印迹结果表明,作用72 h后随着药物浓度的升高,PPARγ mRNA及蛋白的表达水平均逐渐升高,5μmol/L GW9662可以部分阻滞PPARγ的表达.FCM检测结果显示,CGZ（50 μmol/L）诱导的细胞凋亡只能部分被GW9662所阻滞（药物作用后72 h,CGZ诱导的细胞凋亡率为49.7%,CGZ＋GW9662的细胞凋亡率为36.2%,未加药对照组为3.2%）.Western印迹检测结果显示,MAPK信号途径中磷酸化P38（p-P38）的表达水平随药物浓度逐渐升高,同时caspase-3被活化出现相对分子质量为20 000的亚单位.结论 CGZ可以通过PPARγ依赖性和非依赖性途径诱导HL-60细胞凋亡,通过caspase-3活化以及激活P38 MAPK信号途径是CGZ诱导白血病HL-60细胞发生凋亡的重要作用机制之一.
- 刘加军刘文达刘晓丹Prem Raj-Shrestha刘培庆黄河清吴传斌王春芝徐妍肖若芝林东军黄仁魏
- 关键词：白血病细胞凋亡HL-60细胞环格列酮
- 酸洗脱血小板表面HLA-Ⅰ类抗原对血小板活化和凋亡的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨酸洗脱血小板表面HLA-Ⅰ类抗原对血小板活化和凋亡的影响。方法将10(人)份健康人机采血小板(0.5 ml/份)用pH3柠檬酸缓冲液处理(同时以PBS处理作对照组)后,利用多色流式细胞技术检测血小板表面HLA-Ⅰ类抗原及P-选择素(CD62p)的表达,Annexin V染色检测血小板的早期凋亡率。结果 pH3柠檬酸缓冲液及PBS处理后的血小板表面HLA-Ⅰ类抗原的表达为(23.83±9.93)%vs.(98.15±2.20)%(P<0.05),CD62p的表达为(45.94±10.13)%vs(20.29±4.24)%(P<0.05),血小板的早期凋亡率为(65.29±15.74)%vs(14.65±5.09)%(P<0.05)。结论 pH3柠檬酸缓冲液处理血小板可有效去除血小板表面HLA-Ⅰ类抗原,并同时诱导血小板的活化和凋亡。
- 邹勇刘相富刘文达陆英覃雪玲李芳廖思红袁青刘贵莲林东军
- 关键词：人类白细胞抗原血小板缓冲液活化凋亡
- 白细胞滤器在临床输血中的应用价值——附50例报告被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨白细胞滤器在临床输血中的应用价值。方法:将需要输血治疗的100例患者随机分为2组,实验组50例,所输血液先使用白细胞滤器滤过,对照组50例,所输血液不用白细胞滤器滤过。观察2组的输血反应,并分析实验组所输血液成分在应用白细胞滤器前后的变化。结果:白细胞的滤过率为(98.5±1.1)%,血小板的滤过率为(77.6±2.7)%,红细胞的回收率为(93.5±2.3)%,滤过前后反映红细胞功能的平均体积、平均血红蛋白含量、平均血红蛋白浓度和容积分布宽度无明显改变(P(0.05),滤过后甘油三酯和LDL-C明显降低(P(0.01)。实验组输血反应的发生率为2%,对照组为20%,实验组的输血反应发生率低于对照组(P(0.01)。结论:白细胞滤器能高效回收红细胞,对红细胞的数量、功能无明显影响,能有效滤除白细胞、血小板和血脂,减少输血反应的发生率,降低临床输血的风险。
- 刘相富林东军刘文达刘贵连覃雪玲
- 关键词：白细胞滤器白细胞红细胞血小板输血反应
- 微柱凝胶法检测ABO母婴血型不合孕妇血清抗-A(B)IgG效价1154例的结果分析被引量：1
- 2011年
- 目的探讨微柱凝胶法(MGT)检测1 154例ABO母婴血型不合孕妇血清抗-A(B)IgG效价的临床意义。方法采用MGT法对1 154例ABO母婴血型不合孕妇进行产前血清抗-A(B)IgG效价测定,分析血清抗-A(B)IgG效价与新生儿溶血病(HDN)发生的相关性。结果 1 154例孕妇在孕20周首次血清抗-A(B)IgG效价测定≥1∶64者占72.36%(835/1 154),其中O-A型、O-B型和O-AB型夫妇抗-A(B)IgG效价的阳性率分别为72.48%(366/505)、66.45%(313/471)和80.90%(144/178),各组阳性率差异有统计学意义(χ2=13.765,P<0.01)。在产前第30周左右对1 154孕妇中的340例进行抗-A(B)IgG效价的二次随机测定,发现50.50%(51/101)孕妇抗体效价从阴性转为阳性,51.80%(129/249)孕妇(效价≥1∶64)抗体效价继续上升,其中O-A型、O-B型和O-AB型夫妇抗-A(B)IgG效价上升率分别为53.74%(79/147)、50.00%(77/154)和56.41%(23/39),各组间差异无统计学意义(χ2=1.130,P>0.05);25例发生HDN的患儿母亲产前抗-A(B)IgG效价测定均≥1∶256,其中有12例血型抗体效价持续升高达4倍以上,1例效价<1∶64。结论 ABO母婴血型不合孕妇血清抗-A(B)IgG效价水平与HDN的发生显著相关,利用MGT检测孕妇血清抗-A(B)IgG效价有助于HDN的早期诊断和干预。
- 廖思红邹勇袁青覃雪玲刘文达
- 关键词：血型不合血清学试验微柱凝胶法
- 血清联合尿液巨细胞病毒脱氧核糖核酸定量监测对造血干细胞移植后巨细胞病毒相关出血性膀胱炎的诊断意义
- 2016年
- 目的探讨血清联合尿液巨细胞病毒脱氧核糖核酸(CMV-DNA)定量监测对造血干细胞移植(HSCT)后CMV相关出血性膀胱炎的诊断意义。方法收集2011年9月-2015年10月中山大学附属第三医院进行HSCT的患者,采用荧光定量PCR法检测血清CMV-DNA,对于出现CMV-DNA血症或者出现尿路刺激征的患者同时检测尿液CMVDNA。结果 114例患者中,共46例患者出现CMV血症,占40.4%(46/114);68例患者血清CMV-DNA低于参考值,占59.6%(68/114)。46例CMV血症患者中有16例同时出现CMV尿症,占34.8%(16/46);而68例无CMV血症的患者中4例出现CMV尿症,占5.9%(4/68),两者之间出现CMV尿症阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。20例CMV尿症的患者出现尿路刺激征及尿常规异常,诊断为CMV相关出血性膀胱炎。结论荧光定量PCR法检测CMV-DNA是诊断CMV感染的有效手段。对HSCT后出现CMV血症患者,同时监测尿液CMV-DNA有助于早期诊断CMV相关出血性膀胱炎。
- 陆英张兢文刘文达袁青龙冰张祥忠
- 关键词：荧光定量PCR法巨细胞病毒出血性膀胱炎
- 异基因造血干细胞移植后并发中枢神经系统急性移植物抗宿主病1例并文献复习被引量：1
- 2011年
- 目的观察急性白血病患者接受异基因造血干细胞移植(allogeneic hemotopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)后并发中枢神经系统急性移植物抗宿主病(aGVHD)的临床特点。方法回顾性分析1例急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)M5b型患者于allo-HSCT后并发中枢神经系统aGVHD的临床资料。结果患者接受allo-HSCT后40d突发癫,根据头颅磁共振成像(MRI)表现以及相关科室会诊意见,考虑中枢神经系统aGVHD,经大剂量甲泼尼龙冲击治疗后病情好转,1个月后复查头颅MRI示病灶基本消失。结论急性白血病接受allo-HSCT后发生中枢神经系统aGVHD较少见,临床表现缺乏特异性,加强监测排除其他疾病,确诊后及早使用肾上腺皮质激素(激素),可使患者获得较好的转归。
- 陆英邹勇刘文达黄仁魏林东军
- 关键词：骨髓移植移植物抗宿主病中枢神经系统甲泼尼龙
- 冬凌草乙素对U937细胞的生长抑制作用及β-catenin表达水平的影响
- 2010年
- 目的:探讨冬凌草乙素对U937细胞的生长抑制作用及其作用机制。方法:以不同浓度的冬凌草乙素作用于体外培养的U937细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡;采用RT-PCR对细胞凋亡前后β-catenin的表达水平进行检测。结果:冬凌草乙素可显著抑制细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,呈现出明显的量-效与时-效关系。在冬凌草乙素抑制细胞增殖过程中β-catenin的表达水平显著下降。结论:冬凌草乙素能抑制U937细胞的生长并诱导细胞发生凋亡,降低β-catenin的表达水平可能是其重要作用机制之一。这为冬凌草乙素抗白血病的进一步研究提供了有力的实验依据。
- 刘加军刘文达刘晓丹肖若芝王春芝林东军刘培庆黄河清
- 关键词：白血病冬凌草乙素Β-CATENIN
- 丹参酮Ⅱ_A对白血病K562细胞的体外诱导凋亡作用研究被引量：10
- 2010年
- 目的研究丹参酮ⅡA对人急性白血病K562细胞的诱导凋亡作用及其作用机制。方法以不同浓度的丹参酮ⅡA（10~50μmol/L）作用于体外培养的K562细胞24、48、72 h,应用MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡率,并对50μmol/L的药物作用不同时间后亚G1期细胞进行检测。应用免疫印迹法（Western blotting）检测Caspase-3及其裂解底物多聚ADP-核糖聚合酶（PARP）的表达水平,并对凋亡调节蛋白Fas、Bax、Bcl-2、Bak、Bid的表达水平进行检测。结果 20μmol/L以上的丹参酮ⅡA可显著抑制K562细胞的生长、诱导细胞发生凋亡,并呈现出明显的量-效与时-效关系;FCM检测结果表明50μmol/L丹参酮ⅡA作用不同时间后,亚G1期细胞（凋亡细胞）逐渐增多。20μmol/L以上的丹参酮ⅡA作用48 h后Caspase-3逐渐被活化出现17 000的亚单位,Caspase-3的作用底物PARP被活化裂解出现89 000的亚单位片段,而且Caspase-3的激活以及PARP的裂解可被Caspase-3的特异性抑制剂z-DEVD-FMK所阻断,促凋亡蛋白Fas以及Bax的表达水平明显升高,而凋亡抑制蛋白Bcl-2及其他促凋亡蛋白Bak和Bid的表达水平则无明显变化。结论丹参酮ⅡA可以通过诱导白血病K562细胞凋亡而发挥体外抗白血病作用,上调促凋亡蛋白Fas和Bax的表达水平及激活Caspase-3可能是丹参酮ⅡA诱导白血病K562细胞发生凋亡的重要作用机制之一。
- 刘晓丹刘文达刘培庆王春芝徐妍林东军黄河清吴传斌肖若芝黄仁魏刘加军
- 关键词：白血病K562细胞细胞凋亡
- 冬凌草乙素对白血病NB4细胞的体外诱导凋亡作用研究被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨冬凌草乙素(PON)对急性白血病NB4细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用及其作用机制。方法:以不同浓度的PON(0～50μmol/L)作用于体外培养的NB4细胞0、24、48及72h,应用MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,Hoechst33258染色法检测细胞凋亡时的形态学变化。应用免疫印迹法检测Caspase-3及其裂解底物多聚(ADP-核糖)聚合酶PARP的表达水平,并对凋亡调节蛋白Bax、Bcl-2、Bak、Bad及Survivin的表达水平进行检测。结果:>20μmol/L的PON可显著抑制细胞的生长,并呈现出明显的量-效与时-效关系,FCM检测结果表明,>20μmol/L的PON作用48h后,凋亡细胞逐渐增多,在Hoechst染色后可见典型的细胞凋亡现象。蛋白质印迹法检测结果表明,药物作用48h后Caspase-3被活化出现17×103的亚单位,同时PARP被裂解出现89×103的亚单位片段。蛋白质印迹法检测结果显示,凋亡抑制蛋白Survivin的表达水平明显降低,促凋亡蛋白Bax的表达水平显著升高,而其他凋亡调节基因Bcl-2、Bak、Bad则无明显变化。结论:PON可以通过诱导白血病NB4细胞凋亡而发挥体外抗白血病作用,降低Survivin以及升高Bax的表达水平可能是PON诱导白血病细胞发生凋亡的重要作用机制之一。
- 刘晓丹刘文达王春芝徐妍林东军刘培庆黄河清吴传斌肖若芝黄仁魏刘加军
- 关键词：白血病
- 不同输血方式对围术期患者白细胞介素及肿瘤坏死因子-α的影响被引量：11
- 2010年
- 目的:探讨同种输血和自体输血对食道癌患者围术期血浆IL-6、IL-10以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平的影响。方法:50例接受根治性手术的食道癌患者,征得患者同意后分为如下两组:同种输血组29例及自体输血组21例。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者术前及术后第1(d1)、5(d5)及7(d7)天IL-6、IL-10及TNF-α的表达水平。结果:两组患者手术前后IL-6的表达水平变化无显著性(P>0.05);TNF-α在异体输血组仅术后d1升高,以后逐渐回复到术前水平,而在自体输血组TNF-α在d5明显升高(P<0.01),d7有所降低,但仍高于术前(P<0.01);两组患者IL-10在术后d1及d5明显升高,特别是异体输血组IL-10的水平明显高于自体输血组(P<0.01)。结论:TNF-α水平在自体输血后可显著升高,而IL-10在异体输血后升高明显。IL-10升高可能是同种输血后导致免疫抑制的重要原因之一,而自体输血可减轻这一作用;同时自体输血后TNF-α表达水平增高有可能促进机体的抗肿瘤免疫作用。
- 刘文达袁青廖思红王云辉
- 关键词：食管肿瘤输血肿瘤坏死因子白细胞介素
