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Kluyveromyces fragilis β-D-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖被引量：2: 2007年; 低聚半乳糖具有促进肠道有益菌增殖、抗龋齿、低能量等特定的生理功能。研究了酶反应条件对脆壁克鲁维酵母(kluyveromyces fragilis)β-D-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的影响。以乳糖为底物,k.fragilis β-D-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的最适温度为40℃,最适pH值为7.0,反应20h低聚半乳糖的产率达到最大。底物初始浓度影响k.fragilis β-D-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的产率,乳糖起始浓度由110mg/mL增加到660mg/mL,低聚半乳糖的含量从43mg/mL增加到207mg/mL。; 李素芬刘建福陈占洲; 关键词：KLUYVEROMYCES 酶法合成低聚半乳糖

碳源对K.fragilis LFS-8611 β-D-半乳糖苷酶合成的影响被引量：4: 2004年; 探讨了碳源对脆壁克鲁维酵母 (Kluyveromycesfragilis)LFS 86 11生长、β D 半乳糖苷酶合成的影响及碳源对该酶合成的诱导作用。脆壁克鲁维酵母 (K .fragilis)LFS 86 11生长与 β D 半乳糖苷酶合成同步。该菌株生长和产酶的最适碳源为半乳糖 ,乳糖次之。菌体生物量和酶活力随着培养基中乳糖浓度的增加而增加 ,乳糖浓度为 12mg/mL ,菌体生物量和酶活力达到峰值 ,分别为 5 .84 g/L、19.12U/mL。半乳糖和乳糖对 β D 半乳糖苷酶合成具有诱导作用。诱导物浓度对β D 半乳糖苷酶的诱导合成有较大影响。半乳糖诱导以山梨醇为碳源预培养的K .fragilisLFS 86 11细胞合成β D 半乳糖苷酶的最适浓度为 10mg/mL。; 刘建福王璋许时婴; 关键词：Β-D-半乳糖苷酶碳源菌种培养基

中压液相色谱快速分离纯化Kluyveromyces fragilis β-D-半乳糖苷酶被引量：4: 2007年; 应用AKTA explorer 100型中压液相色谱快速纯化工艺,系统分离纯化了脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilis)β-D-半乳糖苷酶。K.fragilis发酵生产的菌体细胞经过破碎、离心后的上清液中含有K.fragilis β-D-半乳糖苷酶。粗酶经过AKTA explorer 100中压液相色谱的HiprepR16/10 Source 30Q强阴离子交换柱和Hioad26/60 Superdex凝胶过滤色谱连续两步纯化,酶的回收率为27%,纯化倍数为42。纯化的K.fragilis β-D-半乳糖苷酶在垂直板十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)上,呈现一条染色谱带,表明纯化的酶具有较高的纯度。K.fragilisLFS-8611 β-D-半乳糖苷酶相对分子质量约为60000。; 刘建福李素芬陈占洲陈庆森王璋; 关键词：Β-D-半乳糖苷酶分离纯化

K.fragilis LFS-8611 β-D-半乳糖苷酶的分离纯化被引量：3: 2005年; 分别采用柱色谱技术对K.fragilisLFS-8611β-D-半乳糖苷酶进行了纯化,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定了该酶的纯度。粗酶先后经过(NH4)2SO4分级沉淀、CM-SepharoseCL-6B、DEAE-SepharoseCL-6B、SephacrylS-200柱色谱四步分离纯化,酶的最终回收率为16%,纯化倍数为45.8。纯化的酶在SDS-PAGE上为一条染色谱带,相对分子质量约为60000。; 刘建福陈庆森王璋; 关键词：Β-D-半乳糖苷酶纯化

酶法催化合成低聚半乳糖的研究: 本文研究了酶反应的温度,pH值,底物浓度和反应时间等反应条件对kluyveromycesfragilisβ-D-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的影响。以乳糖为底物,kluyveromycesfragilisβ-D-半乳糖苷...; 刘建福王璋许时婴; 关键词：酶法合成低聚半乳糖; 文献传递

Kluyveromyces fragilis LFS-8611 β-D-半乳糖苷酶的摇瓶培养条件被引量：7: 2004年; 脆壁克鲁维酵母(Kluyveromycesfragilis)LFS 8611合成的β D 半乳糖苷酶具有较高的催化半乳糖基转移反应活力.脆壁克鲁维酵母(K.fragilis)LFS 8611细胞生长和β D 半乳糖苷酶的合成同步.该菌株生长和产酶的最适碳源为半乳糖,乳糖次之;最适氮源为蛋白胨F403;最适培养条件为:发酵培养基的初始pH值为7.0,摇床的转速为200r/min.培养基中碳源和氮源质量浓度对菌体生物量和β D 半乳糖苷酶活力有重要影响,以12mg/mL乳糖为碳源,16mg/mL蛋白胨(F403)为氮源,在最适培养条件下培养32h后,菌体生物量和β D 半乳糖苷酶活力分别为7.56g/L和18.83U/mL.; 刘建福王璋许时婴

K.fragilis β-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的组成分析被引量：6: 2005年; 采用SephadexG-15与DTF-02树脂对K.fragilisβ-半乳糖苷酶催化生产低聚半乳糖的反应液中的糖类物质进行了分离纯化。分别应用高效液相色谱测定了分离的低聚半乳糖的纯度，气相色谱分析了该糖的化学组成。酶反应液经过SephadexG-15色谱柱分成低聚半乳糖、乳糖和单糖(葡萄糖、半乳糖)3个组分。由SephadexG-15色谱柱收集的低聚半乳糖组分上DTF树脂柱出现2个洗脱峰，分别为低聚半乳糖和乳糖。经过上述2步纯化的低聚半乳糖组分在高效液相色谱(HPLC)上为一个单峰，其保留时间为10.481min。该低聚半乳糖是由1分子葡萄糖和2分子半乳糖组成的三糖。; 刘建福陈庆森王璋; 关键词：低聚半乳糖纯化催化合成 Β-半乳糖苷酶

渗透性K.lactis细胞内乳糖酶水解牛乳中乳糖的研究被引量：2: 2007年; 应用填充床细胞反应器,以渗透性K．lactis细胞内乳糖酶连续催化牛乳中乳糖的水解。渗透性K．lactis细胞内乳糖酶的热失活遵循一级反应动力学,40℃时酶的半衰期为9．5h,表观米氏常数为0．39mmol/ml,最大反应速率V_(max)为0．188mmol/min。在2．6cm×50cm填充床生物反应器上,渗透性K．lactis细胞内乳糖酶催化牛乳中乳糖水解的适宜体积流速为1．0ml/min,酶反应的适宜温度40℃,反应速率达到动态平衡后生成的葡萄糖的质量浓度为45．2mg/ml,牛乳中乳糖的水解率为91．3%。; 李素芬陈占洲刘建福陈庆森; 关键词：填充床反应器乳糖酶

影响kluyveromyces fragilisβ-D-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的因素被引量：3: 2004年; 研究了酶反应的温度、pH值、底物浓度和反应时间等对kluyveromycesfragilisβ-D-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的影响.结果显示,以乳糖为底物,kluyveromycesfragilisβ-D-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的最适温度为60℃,最适pH值为6.0.酶法合成低聚半乳糖的产率随着底物浓度增加而增加.kluyveromycesfragilisβ-D-半乳糖苷酶催化低聚半乳糖合成的初速度较快,随着反应时间延长,反应速率降低,反应20h酶反应达到平衡.以660mg/mL乳糖为底物,在最适酶反应条件下,酶法合成低聚半乳糖的产率为207.12mg/mL.; 刘建福王璋许时婴; 关键词：KLUYVEROMYCES Β-D-半乳糖苷酶酶法合成低聚半乳糖

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刘建福