冯艾
- 作品数:17 被引量:56H指数:4
- 供职机构:西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 药品产业链供需协作共享服务模式研究
- 2019年
- 当前我国正在推进的供给侧结构性改革旨在调整经济结构,使要素实现最优配置,提升经济增长的质量。本文总结国内制药行业在产业链供需协作共享中的问题和现状,通过对法规和行业发展的分析,对比欧盟委托加工制度,提出我国制药行业应以药品上市许可持有人制度为基础,吸纳当前互联网共享经济发展的有益经验,结合智能制造的发展,把握未来产业链供需协作的历史机遇和趋势,制定企业发展战略并稳步推进。同时,国家应进一步完善相关政策法规,有序引导制药行业产业链的持续健康发展。
- 王振冯艾冯变玲
- 抗鸭乙肝病毒core蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量:1
- 2013年
- 目的制备抗鸭乙肝病毒core蛋白的单克隆抗体并进行鉴定。方法 PCR扩增鸭乙肝病毒(DHBV)core基因片段,构建表达载体pET28a(+)/DHBV core。转化诱导表达融合蛋白,用Ni 2+亲和柱纯化目的蛋白。免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA筛选,采用有限稀释法筛选单克隆杂交瘤细胞并进行细胞克隆。体内诱生法大量制备单克隆抗体,进行抗体的特异性、效价和亚型的鉴定。结果成功构建表达载体pET28a(+)/DHBV core,并表达DHBV core蛋白。获得2株稳定分泌抗DHBV core抗体的杂交瘤细胞株,分别为2D7和5G10,细胞培养液抗体效价为1∶400和1∶800。选择5G10细胞株制备单克隆抗体,小鼠腹水抗体效价可达1∶320 000。鸭肝组织免疫组化结果显示,DHBV病毒载量>1010copies/mg的肝组织中DHBV core蛋白的表达明显高于病毒载量<105copies/mg的肝组织,而未感染DHBV的鸭肝细胞内不表达DHBV core蛋白。亚型鉴定结果为IgG2aκ链。结论制备并获得了抗DHBV core蛋白的单克隆抗体,为DHBV core蛋白的功能研究、诊断试剂的研制与抗病毒治疗研究奠定了基础。
- 王亚文刘正稳张琳冯艾王威王全颖杨广笑惠凌云
- 关键词:鸭乙肝病毒核心蛋白单克隆抗体细胞克隆
- 一种靶向病毒核心蛋白的穿膜抗体及其制备方法
- 本发明公开了一种靶向病毒核心蛋白的穿膜抗体及其制备方法,包括相偶联的针对病毒核心蛋白的抗体和蛋白转导域,两者偶联后构成穿膜抗体。本发明提供的膜抗体在蛋白转导域的作用下,被赋予细胞膜穿透能力,不但可以进入感染了病毒的靶细胞...
- 王亚文李义平刘正稳惠凌云刘希冯艾王威张琳杨广笑王全颖
- 文献传递
- 结直肠癌患者血浆Septin9 DNA甲基化联合FOBT检测的临床应用价值被引量:4
- 2023年
- 目的:探讨血浆Septin9 DNA甲基化及粪便隐血试验(FOBT)在结直肠癌(CRC)诊断中的应用价值。方法:回顾性收集2017年6月至2022年1月我院收治并经病理检查确诊的101例结直肠良性腺瘤患者、209例结直肠癌患者分别作为良性腺瘤组和结直肠癌组,选取同期在我院进行体检的98例健康人群作为正常对照组,比较三组一般资料及血浆Septin9 DNA甲基化及FOBT阳性情况,比较不同病理特征、不同临床分期结直肠癌患者血浆Septin9 DNA甲基化、FOBT阳性情况,采用受试者工作曲线(ROC)评估血浆Septin9 DNA甲基化、FOBT单项及联合检测对结直肠癌的诊断价值。结果:三组血浆Septin9 DNA甲基化、FOBT阳性率比较,结直肠癌组高于良性腺瘤组及正常对照组,良性腺瘤组高于正常对照组(P<0.05);肿瘤低分化、淋巴结转移、脉管/神经侵犯的结直肠癌患者血浆Septin9 DNA甲基化和FOBT阳性率高于肿瘤高分化、中分化及未发生淋巴结转移、未发生脉管/神经侵犯的结直肠癌患者(P<0.05);随着结直肠癌TNM临床分期升高,血浆Septin9 DNA甲基化及FOBT阳性率升高,差异具有统计学意义(P<0.05);血浆Septin9 DNA甲基化和FOBT联合诊断结直肠癌的敏感度、曲线下面积(AUC)(87.08%、0.885)均高于两者单独诊断(59.33%、0.744和52.63%、0.643,P<0.05);血浆Septin9 DNA甲基化诊断结直肠癌的特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为89.45%、85.52%和67.68%;FOBT分别为76.38%、70.06%和60.56%,两者联合诊断分别为89.95%、90.10%和86.89%。联合诊断优于单项诊断。结论:随着结直肠病变恶性程度的增加,血浆Septin9 DNA甲基化和FOBT阳性率升高,血浆Septin9 DNA甲基化、FOBT联合检测对结直肠癌具有较高的诊断价值,可作为结直肠癌的实验室诊断指标。
- 李娜惠凌云冯艾张琳王亚文
- 关键词:结直肠癌粪便隐血试验
- 鸭肝组织中DHBV cccDNA的实时荧光定量PCR方法的建立被引量:1
- 2014年
- 目的 建立基于DHBV病毒正、负链缺口区设计引物、沉淀蛋白结合的DNA、酶切消化残留线性DNA的DHBVcccDNA荧光定量PCR方法.方法 根据DHBV cccDNA和rcDNA结构的不同,将引物设计在DHBV DNA负链缺口的两侧.采用十二烷基硫酸钾蛋白质沉淀法分离肝组织中cccDNA和rcDNA.并对提取的DNA进行紫外定量,按照每2UPSAD消化500ng cccDNA,计算PSAD的用量,酶切消化残存的线性DNA.以pBR322/2DHBV Core重组质粒为PCR标准品,通过优化反应体系和扩增条件,建立检测DHBV cccDNA的SYBR Green I实时荧光定量PCR方法,并进行方法学考察和实际应用.结果 优化的PCR扩增产物电泳后可见239 bp的DNA片段,与目标片段长度相同.标准曲线回归方程Y=-4.085 7X+48.805,R2=-0.997 6.方法的灵敏度为103 copies/ml,线性范围可达103~108 copies/ml.方法特异性强,未检出DHV,HBV及E coli DNA.对已感染DHBV的鸭肝组织检测DHBV cccDNA,进行定量,含量从0.36~1733.08 copies/diploid genome.其中分布最广的是10~99 copies/dioploid genome.DHBV cccDNA占总DHBV DNA的比例平均仅为3.86%,范围从0.01%~13.3s%.结论 根据DHBV cccDNA与rcDNA的结构和理化性质的差异,设计能够特异性扩增DHBV cccDNA的荧光定量PCR方法,方法灵敏度高、特异度强,可广泛应用于DHBV和HBV抗病毒治疗策略的相关研究中.
- 王亚文惠凌云张琳冯艾王威马列婷王全颖杨广笑刘正稳
- 关键词:鸭乙肝病毒CCCDNA实时荧光定量PCR
- 改良Trizol-SiO2法在咽拭子及疱疹液EV71-RNA提取中的应用
- 2014年
- 目的 研究改良Trizol-SiO2法在咽拭子及疱疹液EV71-RNA提取中相对于目前常用的Trizol-氯仿-二氧化硅提取法的优势.方法 选取2010年6月-2013年1月传染科及发热门诊300例手足口病患儿咽拭子和(或)疱疹液拭子标本分别采用Trizol-氯仿-二氧化硅提取法和改良Trizol-SiO2法进行实验结果统计学分析.结果 采用Trizol-氯仿-二氧化硅提取法的232例EV71-RNA阳性标本,采用改良Trizol-SiO2法所获得的定性结果均为阳性;采用Trizol-氯仿-二氧化硅提取法的68例EV71-RNA阴性标本,采用改良Trizol-SiO2法所获得的定性结果均为阴性,两种方法差异无统计学意义(P=0.993).同时所获的EV71-RNA在进行荧光定量PCR扩增后的扩增曲线Ct值,两种方法差异无统计学意义(P=0.874).结论 与目前实验室常用的提取EV71-RNA Trizol-氯仿-二氧化硅法相比较,改良Trizol-SiO2法剔除了氯仿试剂并延长了SiO2吸附核酸物质的时间,此方法实现了EV71-RNA的快速提取,适用于大样本量的操作,具有很好的临床应用价值.
- 王威冯艾惠凌云王亚文
- 针对鸭乙肝病毒C基因设计的Taqman实时荧光定量PCR方法
- 目的针对鸭乙肝病毒C基因保守区,建立检测DHBV-DNA的通用性Taqman实时荧光定量PCR方法。方法比较GenBank中所有国内、外报道的北京麻鸭DHBV Core区的核酸序列,采用DNASIS V2.5软件筛选出最...
- 王亚文惠凌云冯艾王威张琳马列婷王全颖杨广笑刘正稳
- 关键词:鸭乙肝病毒C基因
- 文献传递
- 血浆D-二聚体水平在食管癌患者手术前后的变化及其与食管癌恶性程度的相关性研究被引量:17
- 2013年
- 目的:探讨血浆D-二聚体(D-D)含量在食管癌手术前后的变化及其与食管癌肿瘤恶性程度的关系。方法:采用免疫比浊法测定97例食管癌患者(包含46例食管癌手术患者)、56例健康人D-D含量。结果:食管癌患者血浆D-D水平明显高于正常对照组,有统计学差异(P<0.01);手术后1-3天D-D值高于术前,具有统计学差异(P<0.01);不同组织学分化程度的食管癌患者血浆D-D的结果显示,D-D结果与肿瘤分期成正相关(P<0.05)。结论:食管癌患者血浆D-D含量显著高于正常对照;术后1-3天D-D值高于术前;D-D含量与患者的TNM分期呈正相关;表明食管癌患者的肿瘤恶性程度与机体出现纤溶亢进及高凝状态水平有关。血浆D-D水平可为食管癌患者病情判断及是否给予抗凝治疗提供参考依据。
- 惠凌云冯艾王威马列婷王亚文
- 关键词:食管癌TNM分期
- mSEPT9和CEA在结直肠癌诊断与术后评估及复发监测中的价值被引量:4
- 2022年
- 目的探讨血浆Septin9基因甲基化(mSEPT9)和癌胚抗原(CEA)检测对结直肠癌(CRC)实验室诊断、手术治疗效果评价及肿瘤复发监测的临床应用价值。方法以2017年6月至2020年1月在西安交通大学第一附属医院确诊为CRC的243例患者为病例组,其中CRC根除治疗术前的119例为术前组,根除治疗术后的99例为术后组,根除治疗术后复发的25例为术后复发组,以同期的81例健康体检人员为对照组。所有入组人员均采用荧光定量PCR法检测血浆mSEPT9,采用电化学发光法检测CEA。通过比较四个组mSEPT9与CEA检测结果的差异,评价其在CRC患者中的临床应用价值。结果在CRC术前组,随着肿瘤分期的进展mSEPT9阳性率增加,差异有统计学意义(P<0.05);与隆起型肿瘤比较,溃疡型和浸润型肿瘤mSEPT9的阳性率较高,差异有统计学意义(P<0.05)。与健康对照组比较,mSEPT9和CEA在CRC术前组的阳性率显著升高,差异有统计学意义(P<0.001)。mSEPT9在术前组的检测阳性率高于CEA,差异有统计学意义(P<0.05);mSEPT9在术后组的检测阴性率高于CEA,差异有统计学意义(P<0.05);m SEPT9在术后复发组的检测阳性率高于CEA,差异无统计学意义(P>0.05)。CRC术后复发组m SEPT9和CEA检测的AUC分别为0.955和0.857,两项联合检测的灵敏度可达100%。结论mSEPT9作为CRC诊断、手术治疗效果评估及肿瘤复发监测的分子诊断指标均优于CEA。mSEPT9与CEA二者联合检测,可提高肿瘤复发监测的灵敏度。
- 高娟娟黎阳王中林冯艾李娜惠凌云
- 关键词:结直肠癌CEA复发监测
- CHB 患者疾病进程与抑郁症的程度及血清 BDNF 水平的相关性被引量:11
- 2015年
- 目的:研究慢性乙型肝炎(CHB)患者在疾病进展的不同阶段并发抑郁症的程度以及血清脑源性神经营养因子(BDNF)的水平。方法选择 HBV 病毒携带者(ASC 组)、肝硬化(LC 组)和肝癌(HCC 组)不同病程的患者126例和40例正常对照为研究对象,采用调查问卷调查研究对象人口学资料,以汉密尔顿抑郁量表(HAMD-17)进行评分和抑郁分级,同时采用 ELISA 法检测血清 BDNF 水平。结果LC 组、HCC 组离异或丧偶的比率高于对照组(χ^2=6.354,11.972;P 值均<0.01);ASC 组、LC 组、HCC 组抑郁严重程度的分布均高于对照组,差异有统计学意义(χ^2=16.151,42.150,49.636;P值均<0.01);同时,ASC 组抑郁严重程度低于 LC 组和 HCC 组,差异有统计学意义(χ^2=14.345,28.772;P 值均<0.01);ASC,LC,HCC 和对照组 BDNF(x ±s ,ng/ml),分别为11.10±3.26,8.66±3.11,7.39±2.52和12.18±2.59,LC 组和HCC 组血清 BDNF 水平显著低于 ASC 组和对照组,差异有统计学意义(P 值均<0.01);CHB 病程的进展与 HAMD 评分存在正相关关系(r=0.719,P <0.01),与 BDNF 水平存在负相关关系(r=-0.504,P <0.01);血清 BDNF 水平与 HAMD评分存在负相关关系(r=-0.526,P <0.01)。结论CHB 疾病的进程可使抑郁的程度加重,BDNF 水平逐渐降低。提示血清 BDNF 水平可作为 CHB 患者心理治疗的实验室参考依据。有望提高临床医生对 CHB 患者伴随抑郁症发生的识别,提高诊疗效果。
- 惠凌云王凌张琳冯艾李娜李义平王亚文
- 关键词:慢性乙型肝炎抑郁症脑源性神经营养因子