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实时荧光PCR检测癌基因MDM_2在急性白血病中的表达被引量：4: 2004年; 目的　应用实时荧光PCR技术 ,检测癌基因MDM2 在急性粒细胞白血病 (AML)中的表达并分析其与AML发生、分型及疗效的关系。方法　以SybrGreenⅠ为荧光指示剂 ,β actin作内参照 ,建立检测MDM2 mRNA表达的实时荧光PCR反应体系。PCR反应完毕作熔解曲线分析。分析MDM2 mRNA的表达与AML的发病、FAB分型及疗效的关系。结果　①通过对实验参数的优化 ,适宜的反应条件为退火温度 5 1℃ ,Mg2 + 浓度 3mmol/L ,牛血清白蛋白 (BSA)浓度 0 1mg/ml,循环次数 4 5次。批内、批间变异系数分别为 8 81%和 15 39%。②AML组MDM2 mRNA的表达明显高于正常对照组 (P <0 0 1) ;AML各亚型M1、M2 与M3 组MDM2 mRNA表达量组间差异无显著性意义(P >0 0 5 ) ;完全缓解组、部分缓解组、未缓解组 3组之间MDM2 mRNA表达差异有显著性意义 (P <0 0 1) ,且呈逐渐上升趋势。结论　采用SybrGreenⅠ的Lightcycler实时荧光PCR方法检测MDM2 mRNA快速、简便、稳定性好。MDM2 mRNA的表达与AML的发生及临床疗效有重要关系。; 付康吴蒙吴健民周志明夏淑贞吕文利; 关键词：实时荧光 PCR检测癌基因 MDM2 急性白血病

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付康