于欢
- 作品数：10 被引量：27H指数：3
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- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
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- 神经毒素基因RjAa17f在Sf9细胞中的表达及活性分析
- 2016年
- 【目的】在昆虫草地贪夜蛾细胞（Sf9）中表达一种能专一阻断昆虫钠、钾离子通道的神经毒素基因RjAa17f。【方法】运用杆状病毒真核表达系统表达RjAa17f毒蛋白,并用蛋白质印迹对其进行检测;测定RjAa17f毒蛋白引起健康棉铃虫中肠膜电位的变化,并对其毒力进行测定。【结果】通过重组杆状病毒质粒的转染和Western blot检测验证,神经毒素基因RjAa17f的重组Bacmid已经成功转染到Sf9细胞中,且在Sf9中表达出与预测大小一致的RjAa17f目的蛋白;此毒蛋白作用于棉铃虫中肠3~12h后,中肠膜电位与CK相比差异显著,且随着作用时间的延长,棉铃虫中肠膜电位呈逐步升高的趋势,作用9h以后,升高的幅度逐渐降低,趋于平缓。RjAa17f毒蛋白对棉铃虫的LD50为108.12μg/g。【结论】在Sf9细胞内表达出了有活性的RjAa17f毒蛋白,且该毒蛋白对棉铃虫中肠膜电位有显著改变。
- 孟姣于欢周斌王敦
- 关键词：棉铃虫
- 梯度条带PCR快速检测CSBV方法的建立被引量：6
- 2012年
- 通过与传统RT-PCR检测方法比较,建立了一种新的快速、准确鉴定中华蜜蜂囊状幼虫病病毒(CSBV)的方法,为中华蜜蜂囊状幼虫病的诊断与防治提供了重要的手段。对陕南、陕北、关中三地的健康蜂及CSBV感染蜂分别进行传统RT-PCR和梯度条带PCR两种方法的检测,通过琼脂糖凝胶电泳及测序结果对两种方法进行分析比较。结果发现传统RT-PCR和梯度条带PCR方法对陕西三地的感染病毒蜂鉴定结果一致,而梯度条带PCR方法相对更快速和直观。与传统RT-PCR鉴定方法比较,该新方法能够在电泳检测阶段通过DNA片段的梯度次序即确定是否存在病毒,能够省去PCR产物测序步骤,缩短了对该病毒的鉴定周期,对及时发现和鉴定病蜂、采取预防措施提供了重要的技术手段。因此,梯度条带PCR快速鉴定方法不仅为CSBV的检测提供了一种简单、快速、直观的方法,对类似动物病毒的快速鉴定也提供了很好的借鉴。
- 刘新宇于欢高宝国张彦明王敦
- 僵蚕提取物对棉铃虫的胃毒作用和碱性磷酸酶活性的影响被引量：3
- 2012年
- 僵蚕提取物对棉铃虫有胃毒作用,对饲毒后不同时间棉铃虫3龄幼虫体内碱性磷酸酶的活性进行了研究。结果表明,在3龄棉铃虫人工饲料中添加僵蚕提取物浓度为3mg·g-1时,饲毒第3天试虫的校正死亡率为66.73%;5mg·g-1的剂量导致试虫死亡率可以高达83.33%,表明僵蚕提取物对棉铃虫具有很强的胃毒作用。试虫碱性磷酸酶活性分析表明,1～5mg·g-1浓度处理组的试虫碱性磷酸酶活性与对照组相比均显著下降,并有明显的剂量相关性。推测僵蚕对棉铃虫幼虫的毒杀作用机制之一与其对碱性磷酸酶活性的抑制有关。
- 曹军于欢张瑞凤王沛张雅林王敦
- 关键词：僵蚕棉铃虫胃毒作用碱性磷酸酶
- 棉铃虫核型多角体病毒orf83和orf86基因功能的研究
- 棉铃虫核型多角体病毒(Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus,HearNPV)作为核型多角体病毒Group II中的代表物种,其基因组序列已在2001年被报道。相比模式物种苜蓿...
- 于欢
- 关键词：棉铃虫核型多角体病毒HEARNPV基因功能研究
- 文献传递
- Arlb基因重组棉铃虫核型多角体病毒（HearNPV）的构建与生物学特征研究
- 本研究利用澳洲雪漏斗蜘蛛毒素基因ω-ACTX-Ar1b（Ar1b）替换棉铃虫核型多角体病毒（HearNPV）的人工基因组（HZ8-bacmid）中egt基因获得的Ar1b-bacmid，通过转座将多角体基因（ph）修复到...
- 于欢
- 关键词：重组病毒生物活性测定
- HearNPV侵染对棉铃虫中肠碱性磷酸酶活性及表达水平的影响被引量：6
- 2012年
- 【目的】通过研究棉铃虫核型多角体病毒(HearNPV)感染宿主昆虫后对宿主中肠碱性磷酸酶(ALP)活性与基因表达水平的影响,明确病毒在侵染宿主过程中对宿主昆虫中肠ALP的调控机理。【方法】采用不同剂量的HearNPV感染3龄棉铃虫,测定感染后不同时间昆虫中肠ALP酶活性及其编码基因表达水平,分析病毒感染试虫与未感染健康试虫的ALP活性和编码基因表达水平上的差异。【结果】HearNPV感染后,能够显著抑制ALP的活性,且抑制作用与感染病毒的剂量和感染后时间的增加呈正相关。ALP活性的下降与病毒下调其编码基因ALP的表达水平有关。【结论】HearNPV感染其宿主昆虫的过程中导致宿主ALP活性显著下降,该过程可能协助病毒粒子侵染宿主。病毒对ALP活性的抑制作用机理之一是下调了ALP编码基因的表达水平。
- 于欢吕婷婷李晓峰王敦
- 关键词：中肠碱性磷酸酶基因表达水平
- 小菜蛾性信息素结合蛋白Ⅰ基因的表达及多克隆抗体制备被引量：2
- 2011年
- 提取羽化3 d的小菜蛾成虫触角总RNA,反转录合成cDNA,以此为模板PCR扩增出小菜蛾性信息素结合蛋白基因(PxPBPⅠ),大小为495 bp,Blast结果显示与多种昆虫的PBPⅠ具有较高同源性。将该基因克隆到表达载体pMAL-c4E中,转化宿主菌TB1(DE3),获得单克隆重组质粒pMAL-c4E-PxPBPⅠ。IPTG成功诱导pMAL-c4E-PxPBPⅠ表达出约60 ku的融合蛋白。优化诱导条件为3 mmol/L IPTG、诱导表达6 h,可获得大量可溶性蛋白。表达的融合蛋白通过亲和色谱法纯化、免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。ELISA分析表明制备的抗体效价达1∶512 000。
- 陈东旭于欢徐红星张雅林王敦
- 关键词：小菜蛾原核表达多克隆抗体
- 桑白蚧在杏树上的发生规律与空间分布研究被引量：1
- 2010年
- 【目的】揭示桑白蚧在杏树上的发生规律与空间分布格局,为控制桑白蚧的危害提供依据。【方法】在陕西礼泉选择代表性杏园,周年系统调查桑白蚧种群的消长动态;选择1～5,6～10,11～15,16～20和>20年5个树龄段的杏园,调查不同树龄、高度(上、中、下)、方向(东、南、西、北)对桑白蚧危害的影响;选择3个代表性杏园,调查每株树上桑白蚧的数量,采用聚集指标法测定其空间分布型。【结果】桑白蚧以雌成虫在树干被害部位越冬,成虫发生高峰期分别为4月中旬和6月下旬至7月中旬,若虫发生高峰期分别为5月中旬和7月下旬。树龄对桑白蚧的发生影响显著,以11～15年及16～20年2个树龄段的杏树受害较重,其次是1～5年和6～10年树龄段的杏树,20年以上树龄的杏树很少受害。在同一杏树的不同高度和不同方向,桑白蚧危害程度无显著差异。桑白蚧种群在杏树上分布的各项聚集度指标值分别为扩散系数C=0.4141,扩散指数Iσ=0.7138,聚集指数CA=-0.2920,平均拥挤度M*=0.7023。【结论】桑白蚧在陕西礼泉1年发生2代,其危害对杏树的方位没有选择性,而对树龄具有选择性;成虫在杏树上属均匀分布型。
- 李怡萍张亚素郑峰段喜涵于欢陈静仵均祥
- 关键词：桑白蚧杏树空间分布型
- 3株苹果蠹蛾颗粒体病毒本土株的毒力测定与田间防效被引量：9
- 2011年
- 【目的】通过与比利时商用病毒株系CypoGV-BG的对比,研究3株国内苹果蠹蛾(Cydia pomonella)颗粒体病毒株系CypoGV-ZY、CypoGV-KS1、CypoGV-KS2的毒力和田间防治效果,为我国苹果蠹蛾的生物防治和病毒杀虫剂的研制奠定基础。【方法】采用饲喂法研究3株病毒对苹果蠹蛾3龄幼虫的毒力大小。以性诱剂诱集的雄虫数量和受害果率为评价指标,检测3株苹果蠹蛾颗粒体病毒的田间防效。【结果】3株国内株系CypoGV-ZY、Cy-poGV-KS1和CypoGV-KS2对苹果蠹蛾3龄幼虫的LD50分别为3.43×104,8.81×104和1.04×105 OBs/mL,优于CypoGV-BG的5.31×105 OBs/mL;而病毒浓度为5×105 OBs/mL时,3株病毒株系的LT50分别为4.05,4.11和4.19d,与CypoGV-BG的4.98d差异不显著。田间防效结果表明,防治3个月后,从性诱剂诱集的雄虫数量看,3株本土病毒株防效均显著优于CypoGV-BG;从果实受害率看,CypoGV-ZY、CypoGV-KS1的果实受害率分别为39.5%和41.3%,与化学杀虫剂灭幼脲的防效(36.9%)接近,显著强于CypoGV-KS2和CypoGV-BG。【结论】CypoGV-ZY和CypoGV-KS1分离株对我国西北疫区的苹果蠹蛾具有较强的毒力及田间防治效果,防效明显优于国外商品病毒制剂。
- 甘恩宇李晓峰于欢吴正伟徐利张雅林王敦
- 关键词：毒力测定田间防效
- 棉铃虫核型多角体病毒感染对宿主昆虫GST活性及其表达水平的影响被引量：1
- 2015年
- 【目的】研究棉铃虫核型多角体病毒(HearNPV)感染宿主昆虫后对宿主谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性与基因表达水平的影响,明确病毒在侵染宿主过程中对宿主昆虫GST的调控作用。【方法】采用50和100PIB/只2种剂量的HearNPV病毒感染3龄棉铃虫,测定感染后不同时间试虫中肠GST活性与其编码基因的表达水平,对比分析病毒感染与未感染健康试虫的GST活性及其编码基因表达水平的差异。【结果】棉铃虫在HearNPV感染初期,GST活性显著提高,同时GST表达水平显著上调;随着感染时间的推移,GST活性与其编码基因的表达水平均显著下降,表明病毒感染后对宿主昆虫GST活性的影响与其对GST表达水平的调控相关。【结论】HearNPV感染棉铃虫过程中,病毒入侵能够激活宿主GST基因的表达,但病毒的持续感染最终会抑制GST编码基因的表达水平。
- 黄诗迪黄彩萍于欢王敦
- 关键词：GST基因
