丛郁
- 作品数：53 被引量：208H指数：10
- 供职机构：中国科学院南京土壤研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省农业科技自主创新基金江苏省科技基础设施建设计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 杜梨CBL1和CBL7基因对非生物逆境的响应被引量：11
- 2014年
- 【目的】克隆2个杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白(Calcineurin B-like protein,CBL)基因,并对其序列特征、表达特点及抗逆功能进行比较研究。【方法】采用电子克隆、RT-PCR和长片段PCR克隆了PbCBL1和PbCBL7的cDNA和DNA序列,利用生物信息学方法进行序列分析,半定量RT-PCR检测它们的表达特点,原核表达初步比较研究上述2个基因的抗逆功能。【结果】杜梨PbCBL1 cDNA编码区为642 bp,编码213个氨基酸,对应基因组DNA序列长2 969 bp;PbCBL7 cDNA编码区为639 bp,编码212个氨基酸,对应基因组DNA序列长1 788 bp;PbCBL1和PbCBL7均由8个外显子和7个内含子组成。PbCBL1和PbCBL7编码的多肽均具有植物类钙调磷酸酶B亚基蛋白结合Ca2+所必需的4个EF手型结构和1个典型的植物钙调磷酸酶A亚基结合位点。未经处理的杜梨幼苗(对照)根和叶中PbCBL1和PbCBL7的表达非常微弱,NaCl、PEG6000、甘露醇和ABA处理后,它们在根和叶中的表达均上调,且PbCBL1在叶片中的表达量显著增加。2个CBL基因分别转入大肠杆菌BL21(DE3)后,均能够明显减轻NaCl、甘露醇和PEG6000对菌株的生长抑制,而转PbCBL1菌株的抗逆效果较为明显。【结论】PbCBL1和PbCBL7基因具备植物CBLs基因家族的固有特征,对盐碱、干旱、渗透胁迫和ABA处理均存在转录响应,上述基因的转入能够提高大肠杆菌BL21(DE3)对盐胁迫和渗透胁迫的耐受能力,转PbCBL1菌株的抗逆功能强于转PbCBL7菌株。
- 韩金龙李慧丛郁常有宏蔺经
- 关键词：杜梨功能比较
- 一种利用超声波提高农杆菌介导的苹果属植物转化效率的方法
- 本发明“一种利用超声波提高农杆菌介导的苹果属植物转化效率的方法”属于生物工程育种领域。将苹果属八棱海棠叶片切成小块在OD<Sub>600</Sub>为0.6且含有75mg.L<Sup>－1</Sup>As的农杆菌悬浮液中...
- 渠慎春章镇蔡斌华丛郁高志红杨梦悦
- 文献传递
- 超声波直接转导外源基因转化八棱海棠的技术研究被引量：4
- 2007年
- 应用超声波直接转导法,对八棱海棠进行rolC基因转化,同时,利用gus基因瞬间表达的方法研究了超声波处理时间、处理功率和转化缓冲液中二甲基亚砜(DMSO)对rolC基因转化率的影响。结果表明:当DMSO为5%(体积分数)时,用80 W功率处理20 min,能够获得最佳的转化效果。在超声波最佳处理条件下转化486个八棱海棠叶片,共得到237个抗性愈伤组织和9株抗性苗,转化率为1.85%。GUS染色、PCR及Southern blotting检测结果显示,有8个八棱海棠株系的基因组中整合了完整的外源rolC基因。
- 丛郁渠慎春乔玉山姚泉洪章镇
- 关键词：八棱海棠ROLC基因
- 梨锈病对树体生长及果实品质的影响被引量：4
- 2008年
- 田间感病情况下,研究梨锈病对华酥叶片光合作用、丰产性、果实品质及树体生长势的影响,结果表明:随着叶片病情指数增高,净光合速率逐渐降低,到9级时,净光合速率出现负值;树体感病程度越重,生长势越弱,果实越小,果实可溶性固形物和还原糖含量降低,可滴定酸含量增加。
- 李晓刚蔺经丛郁杨青松颜志梅盛宝龙常有宏
- 关键词：梨锈病光合作用果实品质
- 豆梨半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆及胁迫表达被引量：2
- 2011年
- 采用RT-PCR结合RACE技术,从中国梨砧木——豆梨成熟种子中克隆获得豆梨半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因（PcCPI）的cDNA全长序列,并通过半定量RT-PCR分析不同胁迫处理对该基因表达水平的影响.结果表明：（1）PcCPIcDNA序列长度为980 bp,开放阅读框78~812 bp,编码的多肽由信号肽（29个氨基酸）和成熟肽（216个氨基酸）组成,具有3个植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因家族的高保守特征序列模式——LARFAVQEHN、QX-VXG和YQAKVWVKPW.（2）该蛋白与蔷薇科植物的CPI蛋白处于系统发育树的同一分支,且与苹果CPI蛋白的一致性最高（95.9%）.（3）半定量RT-PCR结果显示：PcCPI基因在豆梨叶片中为诱导型表达,在人工模拟逆境条件下（包括喷施50μmol/L MeJA或100μmol/L ABA、刀片2次机械损伤2、00 mmol/L NaCl胁迫、4℃低温或30℃高温胁迫）处理4 h后,豆梨叶片中PcCPI基因表达量明显上升,表明该基因参与了豆梨对生物或非生物胁迫的防御机制.
- 李慧丛郁常有宏蔺经盛宝龙
- 关键词：豆梨半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因克隆
- 杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白基因PbCBL2的克隆和功能初探被引量：4
- 2013年
- 类钙调磷酸酶B亚基蛋白(Calcineurin B-like protein,CBLs)是植物中一类重要的钙离子传感器,参与调控植物生长发育及逆境胁迫响应过程。为了探明杜梨CBLs家族成员PbCBL2的序列特征和表达模式,以杜梨(Pyrus betulaefolia Bunge)幼苗为试材,运用EST搜索结合RACE技术、染色体步移法对PbCBL2的cDNA、DNA和启动子进行克隆,采用半定量RT-PCR和原核表达研究该基因在非生物胁迫下的表达模式。结果表明,PbCBL2基因cDNA序列长681bp,编码一个含有226个氨基酸残基的蛋白。基因组DNA序列长1927bp,包括8个外显子和7个内含子,启动子序列包含光反应元件、厌氧诱导必需顺式作用元件、赤霉素反应元件和水杨酸响应顺式作用元件。PbCBL2编码的多肽具有植物类钙调磷酸酶B亚基蛋白结合Ca2+所必需的4个EF手型结构和1个典型的植物钙调磷酸酶A亚基结合位点。未经处理的杜梨幼苗(对照)根和叶中未检测到PbCBL2的表达,PbCBL2的表达受NaCl、PEG6000、甘露醇和ABA诱导上调。PbCBL2转入大肠杆菌BL21(DE3)后,能够明显减轻NaCl、甘露醇和PEG6000对该菌株的生长抑制。PbCBL2基因具备植物CBLs基因家族的固有特征,对盐碱、干旱、渗透胁迫和ABA处理均存在转录响应,大肠杆菌转入该基因后能够提高对盐胁迫和渗透胁迫的耐受能力。
- 李慧李刚波丛郁常有宏蔺经盛宝龙
- 关键词：杜梨基因克隆原核表达逆境胁迫
- 羊角槭基因组DNA提取及SRAP-PCR体系优化被引量：14
- 2009年
- 采用CTAB法、SDS法、偏重亚硫酸钠法提取槭属中羊角槭基因组DNA,通过DNA含量测定、琼脂糖凝胶电泳检测对所提DNA质量进行分析。结果表明,3种提取方法中CTAB法最适合提取羊角槭基因组DNA,所得DNA的质量和纯度较高。以CTAB法提取的DNA为模板进行SRAP扩增反应,对SRAP反应体系的dNTPs浓度、Mg2+浓度、引物浓度3个主要影响因子进行筛选。获得羊角槭SRAP最优反应体系为:50μl的PCR体系中含有DNA模板100 ng、10×PCR Buffer(不含Mg2+)、Mg2+2.5 mmol/L、dNTPs 0.2 mmol/L、引物0.5μmol/L、TaqDNA聚合酶1.0 U。
- 李倩中刘晓宏苏家乐丛郁
- 关键词：基因组DNASRAP
- 杜梨铵转运蛋白基因的克隆表达及在梨属植物中的SNP分析被引量：6
- 2011年
- 利用EST并结合RACE方法从杜梨幼苗克隆获得1个AMT基因(PbAMT1;2).分析显示,PbAMT1;2cDNA全长1 811 bp,开放阅读框为1 515 bp,其对应基因组DNA序列不含内含子.PbAMT1;2编码的蛋白由504个氨基酸组成,具有11个跨膜域,1个N-糖基化位点、3个酪蛋白激酶磷酸化位点和8个蛋白激酶C磷酸化位点.同源性分析发现,PbAMT1;2与其他植物的AMT具有较高的一致性,其中与百脉根LjAMT1;2的一致性为80.23%,与拟南芥AtAMT1;2的一致性为78.68%,与番茄LeAMT1;2的一致性为77.80%.系统进化树分析表明,PbAMT1;2属于AMT1亚家族.半定量RT-PCR结果显示,PbAMT1;2主要在根部表达,而在茎和叶中几乎没有表达.以杜梨、豆梨、砂梨、白梨、秋子梨和西洋梨等6种梨属植物的DNA为模板,高保真Taq酶PCR扩增AMT1;2基因ORF区DNA序列,发现6种梨属植物的AMT1;2 ORF区DNA序列长度均为1 515 bp,相似性高达99.48%,但在44个核苷酸位点中存在SNPs,导致18个氨基酸位点发生变异,多态性频率为1SNP/34.43 bp,核苷酸变异度为2.9%,氨基酸变异度为3.57%.
- 丛郁杨顺瑛宋志忠郝东利苏彦华
- 关键词：杜梨克隆梨属植物单核苷酸多态性
- 一种利用超声波提高农杆菌介导的苹果属植物转化效率的方法
- 本发明“一种利用超声波提高农杆菌介导的苹果属植物转化效率的方法”属于生物工程育种领域。将苹果属八棱海棠叶片切成小块在OD<Sub>600</Sub>为0.6且含有75mg.L<Sup>-1</Sup>As的农杆菌悬浮液中...
- 渠慎春章镇蔡斌华丛郁高志红杨梦悦
- 文献传递
- 超声波介导铁蛋白基因转化苹果的研究被引量：11
- 2006年
- 以嘎拉苹果的叶片为转化受体,应用超声波法将菜豆铁蛋白基因导入受体中.实验表明,以0.5 W/cm2的声强、25℃、20 min超声波处理的转化效果最佳,抗性愈伤组织的比例高达24%.抗性愈伤组织经诱导获得了16个苹果抗性植株,有11株表现出GUS阳性,阳性比率为2.75%.经PCR检测,11株GUS阳性植株中有6株能扩增出目的条带;而Southern blotting实验表明,菜豆铁蛋白基因仅在2个苹果转基因株系的基因组中实现了完整插入,并且杂交的信号较强;进一步RT-PCR检测实验显示,外源菜豆铁蛋白基因在上述2株转基因植株中并未转录,发生了基因沉默.
- 叶霞丛郁陶建敏渠慎春章镇
- 关键词：苹果超声波
