丛笑倩
- 作品数：7 被引量：41H指数：4
- 供职机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 差速贴壁法分选人毛囊干细胞的研究被引量：24
- 2006年
- 目的探讨Ⅳ型胶原差速贴壁法在分选人毛囊干细胞中的作用。方法将人毛囊ORS细胞接种在Ⅳ型胶原涂被的培养皿上进行黏附分选,实验组细胞和对照组细胞分别进行K15、β1-整合素和外皮蛋白免疫荧光和流式细胞术检查。检测细胞超微结构并测定克隆形成率。结果黏附率约为22%。实验组 K15和β1整合素的表达分别为(70．1±6．7)%和(82．4±9．3)%,对照组相应为(32．1±8．9)%和(30．3±1．3)%,外皮蛋白两组间的表达为(26．7±8．6)%和(79．2±15．3)%,两组间差异有统计学意义(P＜0．05)。电镜示实验组细胞小,核浆比例大,细胞器不成熟。实验组和对照组克隆形成率分别为(66．0±7．1)%和(30．3±2．3)%(P＜0．05)。结论利用Ⅳ型胶原差速贴壁法可初步分选、纯化人毛囊干细胞。
- 张群杨光辉丛笑倩崔磊张文杰刘伟曹谊林
- 关键词：毛囊干细胞
- 毛囊干细胞表皮膜片修复裸鼠皮肤缺损的实验研究被引量：8
- 2009年
- 目的开发新的组织工程表皮替代物,利用毛囊干细胞-壳聚糖明胶膜片(Chitosan-gelatin membrane,CGM)进行修复裸鼠皮肤缺损的实验研究。方法将体外扩增培养的毛囊干细胞接种于CGM,构建组织工程表皮膜片,裸鼠背部作直径1cm的全层皮肤缺损,将毛囊干细胞-CGM复合物覆盖创面。回植后1周、4周和12周分别进行组织学和免疫组织化学检测。结果毛囊干细胞在CGM上生长良好。毛囊干细胞-CGM修复裸鼠后1周切片示创面有新生上皮覆盖,表皮分化良好,而对照组残留较大未愈创面。修复后4周和12周可见对照组收缩较实验组显著。结论体外构建的毛囊干细胞-CGM可以修复裸鼠皮肤缺损。
- 张群杨光辉丛笑倩崔磊张文杰刘伟曹谊林
- 关键词：毛囊干细胞皮肤缺损
- 利用中性蛋白酶消化法扩增毛囊干细胞的实验研究被引量：6
- 2007年
- 目的完善毛囊干细胞的体外培养扩增体系。方法接种毛囊干细胞于滋养层细胞上,利用中性蛋白酶分离毛囊干细胞和滋养层细胞传代,进行鉴定并计算扩增数目。结果经中性蛋白酶传代后,毛囊干细胞生长良好,可连续培养至15代;第12代(P12)毛囊干细胞免疫细胞化学检测均表达K15、β1-整合素及p63,原代(P0)至P12毛囊干细胞均表达K15 mRNA。以P10计算,细胞数量为1.2×1036,约250 m2,满足构建的需要。结论通过滋养层接种毛囊干细胞结合中性蛋白酶消化法传代,可大量扩增毛囊干细胞。
- 张群丛笑倩张文杰刘伟曹谊林
- 关键词：毛囊干细胞扩增中性蛋白酶
- 毛囊干细胞细胞膜片的构建研究被引量：3
- 2008年
- 目的以毛囊干细胞作为种子细胞,构建细胞膜片,检测培养的细胞膜片的结构,为进一步进行动物试验奠定基础。方法采用中性蛋白酶(Dispase)分离人毛囊干细胞,构建细胞膜片。该膜片构建成功后,分别进行扫描电镜观察、HE染色、角蛋白15和角蛋白10免疫组织化学染色。结果经过1～2周的培养,细胞连接成片,呈现典型的"铺路石"状。将细胞膜片消化下来,HE染色显示该膜片由2～4层细胞组成,电镜观察示细胞排列紧密,细胞基质分泌多。免疫组织化学染色显示细胞膜片大部分细胞K15染色阳性,少量细胞K10染色阳性。结论由毛囊干细胞构建的细胞膜片与人正常表皮结构类似,可进一步深入研究。
- 张群丛笑倩张文杰刘伟曹谊林
- 关键词：毛囊干细胞
- 利用小鼠胚胎干细胞分化来源的血管内皮细胞构建组织工程化血管的研究
- 刘伟曹谊林丛笑倩张文杰崔磊刘德莉沈干吴春芳刘晓音
- 该研究将小鼠胚胎干细胞分化来源的血管内皮细胞经端粒酶转染永生化以后建立了血管内皮细胞系TEC3，该细胞贴壁生长，具有正常内皮细胞的多角形形态，流式细胞仪检测显示TEC3细胞表达内皮细胞特异性标志vWF。利用TEC3构建的...
- 关键词：
- 关键词：胚胎干细胞血管
- SNL细胞作为饲养层细胞培养人胚胎干细胞被引量：1
- 2007年
- 目的为便于人胚胎干细胞(ES细胞)的培养和研究,寻找一种建系细胞作为人ES细胞的饲养层细胞。方法以小鼠成纤维细胞系SNL细胞作为饲养层细胞培养人ES细胞株hES1。传代17代后,检测hES细胞表面特异性标志,包括碱性磷酸酶(AKP)、Oct-4、阶段特异性胚胎抗原(SSEA)-3和SSEA-4的表达;同时观察细胞的多向分化潜能。结果hES1细胞在SNL细胞饲养层上能持续生长。经多次传代后持续表达人ES细胞表面特异性标志,其注射于重症联合免疫缺陷小鼠皮下仍能形成畸胎瘤组织。结论SNL细胞能够作为饲养层细胞用于人ES细胞的培养,且操作更方便;该细胞已转染了耐受新霉素的基因,为将来对人ES细胞基因操作时进行药物筛选提供了可能。
- 谢峰张文杰王鸿陆峻泓丛笑倩曹谊林
- 关键词：人胚胎干细胞饲养层细胞
- 人毛囊外根鞘细胞的分离及培养被引量：11
- 2006年
- 目的建立毛囊外根鞘细胞的分离和培养方法。方法利用中性蛋白酶分离得到单个毛囊,采用组织块法和消化法进行细胞培养,倒置显微镜、扫描及透射电镜观察细胞形态,培养各代细胞做生长曲线,RT-PCR检测干细胞相对特异性标识分子K15和细胞分化标识分子外皮蛋白的mRNA表达情况。结果组织块法和消化法均能培养出毛囊外根鞘细胞,并可传代培养,组织块法细胞生长慢,不易汇合,消化法细胞增殖快。各代细胞中K15和外皮蛋白mRNA均有表达。结论消化法适合毛囊外根鞘细胞的体外培养,该方法的建立为进一步分离纯化培养毛囊干细胞奠定了基础。
- 张群杨光辉丛笑倩崔磊张文杰刘伟曹谊林
- 关键词：人毛囊外根鞘细胞组织块法消化法相对特异性纯化培养
