万兵
- 作品数：10 被引量：8H指数：2
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- 人4-1BB(CD137)在真核细胞CHO中的高效表达及活性研究
- 目的:分别构建表达膜型、分泌型人4-1BB蛋白的重组真核表达载体,建立高效表达4-1BB(CD137)的真核表达系统,获得高效表达人4-1BB抗原的dhfr-CHO细胞株,深入研究4-1BB及其配体在细胞信号传导中的作用...
- 万兵
- 关键词：共刺激分子4-1BB真核表达系统
- 文献传递
- 人CD137L在肿瘤细胞的表达及意义
- 最近研究发现CD137和其配体(CD137L)为CD28/B7之外的另一对重要的的协同刺激信号,在免疫应答、肿瘤免疫和自身免疫性疾病中起重要作用。目前关于CD137L的研究相对较少。本研究检测了CD137L在不同的人肿瘤...
- 李长菲张利宁万兵马春红刘星霞宋静
- 关键词：肿瘤细胞结肠癌细胞系CD137L肝癌细胞系
- 文献传递
- 人4-1BB(CD137)在真核细胞CHO中的高效表达及活性研究
- 4-1BB及其配体是CD28/B7共刺激信号途径之外的另一重要的共刺激分子,4-1BB介导的协同刺激信号,能促进T细胞活化、增殖、分化,也能诱导慢性活化的T细胞凋亡。4-1BB共刺激信号可抑制活化诱导的细胞死亡,并能在p...
- 张利宁万兵孙汶生曹英林马春红宋静
- 关键词：真核表达系统
- 文献传递
- 人CD137L在肿瘤细胞的表达及其对肿瘤细胞分泌IL-8的影响被引量：1
- 2002年
- 目的 :检测人CD137L在肿瘤细胞的表达及其功能。方法 :采用RT PCR、FACS方法检测人CD137L在肿瘤细胞的表达 ,用ELISA方法检测CD137L对肿瘤细胞分泌IL 8的影响。结果 :9种不同来源的人肿瘤细胞系均不同程度表达CD137L ,其中 ,BEL 74 0 2、HL 6 0、A2细胞系呈高水平表达 ;HepG2 .2 .15、L 78、HT 2 9细胞系中度表达 ;U937、H6、HLE细胞系低表达。胚胎细胞系ECV 30 4中度表达 ,而新分离的正常外周血单个核细胞不表达。CD137L的表达水平与肿瘤细胞系的来源无关 ,同一组织来源的细胞系 ,有的高表达 ,有的低表达。肿瘤细胞上的CD137L对肿瘤细胞本身IL 8的分泌可产生不同的影响 :可使HepG2 .2 .15分泌IL 8的水平增加 ,但对HLE、A2 ,只能微弱地增强肿瘤细胞释放IL 8。结论 :CD137L在肿瘤细胞上的表达是普遍现象 ,其表达可能与细胞的快速生长有关 ;肿瘤细胞的CD137L可增强某些细胞系分泌IL 8。
- 李长菲张利宁万兵宋静刘星霞马春红曹英林曹倩孙汶生
- 关键词：肿瘤细胞培养白细胞介素8酶联免疫吸附测定
- 重组可溶性人CD137在CHO细胞中的表达
- CD137属肿瘤坏死因子受体超家族,仅表达于活化的T细胞表面,静止的T细胞不表达,具有膜型和分泌型两种形式。CD137/CD137L是CD28/B7之外的另一重要的共刺激分子,可依赖或不依赖于CD28/B7途径而介导共刺...
- 李长菲张利宁万兵马春红曹英林宋静王晓燕刘素侠石永玉朱法良孙汶生
- 文献传递
- 面向二语学习者的汉语成语教学大纲研究
- 成语是现代汉语词汇系统中特殊的一类，在结构、语义、语法、语用等多个方面具有自身的独特性。在对外汉语教学的高级阶段，成语往往作为文化教学的重要内容出现。但实际上，成语在交际层面也发挥着巨大的作用。当前对外汉语成语教学缺乏专...
- 万兵
- 关键词：二语学习教学大纲汉语成语对外汉语教学
- 4-1BB(CD137/ILA)与免疫细胞相互关系研究进展被引量：3
- 2002年
- 4 1BB(CD137 ILA)是神经生长因子受体 (NGF R) 肿瘤坏死因子受体 (TNF R)家族的成员之一 ,它介导的协同刺激信号能促进T细胞活化、增殖、分化 ,也能诱导T细胞凋亡。 4 1BB既能协同CD2 8对T细胞的共刺激作用 ,也能不依赖于CD2 8而发挥共刺激效应。 4 1BB通过胞浆末尾区的聚集 ,与肿瘤坏死因子受体相关因子 2 (TRAF2 )交联 ,依次活化ASK 1、JNK SAPK或p38MAP ,启动级联放大效应。活化B细胞表达 4 1BB配体 (4 1BBL)。 4 1BB单抗调高NK细胞杀伤肿瘤的活性。 4 1BB通过双向信号转导 ,使单核细胞活化、增殖 ,并促进单核细胞的粘附作用。
- 万兵
- 关键词：4-1BBNK细胞机体免疫应答神经生长因子受体免疫细胞
- 人4-1BB-hIgG1Fc融合蛋白真核表达载体的构建被引量：1
- 2002年
- 目的：构建人４１ＢＢ胞膜外区ｈＩｇＧ１Ｆｃ融合蛋白真核表达载体。方法：ＰＣＲ扩增人４１ＢＢ胞膜外区和ｈＩｇＧ１Ｆｃ基因片段，用ＨｉｎｄⅢ、ＰｓｔＩ酶切４１ＢＢ胞膜外区，ＰｓｔＩ 、ＥｃｏＲ Ｉ 酶切ｈＩｇＧ１Ｆｃ ，ＨｉｎｄⅢ、ＥｃｏＲＩ 酶切ｐＣＤＮＡ３，纯化后的酶切产物经Ｔ４ＤＮＡ连接酶连接，转化大肠杆菌ＤＨ５α，氨苄青霉素筛选阳性克隆，ＰＣＲ及测序鉴定。结果：连接反应产物转化大肠杆菌ＤＨ５α，氨苄青霉素筛选出多个阳性克隆；分别以针对４１ＢＢ胞膜外区和ｈＩｇＧ１Ｆｃ的引物进行ＰＣＲ扩增，电泳后观察到一５５８ｂｐ、７０８ｂｐ的特异性条带，与４１ＢＢ胞膜外区和ｈＩｇＧ１Ｆｃ相符，提示构建成功。进一步测序分析证明克隆在ｐＣＤＮＡ３ 质粒中的４１ＢＢ和ｈＩｇＧ１Ｆｃ序列和读码框架正确，无基因突变。结论：成功构建人４１ＢＢ胞膜外区ｈＩｇＧ１Ｆｃ融合蛋白真核表达载体，为表达４１ＢＢ融合蛋白奠定基础。
- 万兵张利宁马春红宋静曹英林李长菲孙汶生
- 关键词：T淋巴细胞受体基因表达载体蛋白质类
- CD137(人4-1BB)在dhfr-CHO中的表达及活性研究被引量：2
- 2002年
- 目的 :构建CD137真核高效表达系统 ,深入研究CD137及其配体在细胞信号转导中的作用。方法 :将构建有CD137全长cDNA序列的pCDNA3质粒 (CMV ILA SEN ,CIS)及pSV2 dhfr(含二氢叶酸还原酶基因 ) ,运用脂质体介导法共转染二氢叶酸还原酶缺陷的CHO细胞 (dhfr CHO) ;用G4 18筛选出阳性克隆 ;MTX压力选择系统诱导CD137在dhfr CHO细胞的高效表达 ;RT PCR、免疫细胞化学法及流式细胞术测定CD137的表达情况 ;3H TdR掺入法进行活性研究。结果 :CD137为膜型表达 ,CIS转化dhfr CHO细胞CD137表达率为 96 0 7% ;活性研究显示CD137膜蛋白轻度促进抗CD3单抗诱导的PBMC增殖。结论 :获得高效表达CD137的CHO细胞株 ,CD137膜蛋白促进抗CD3单抗诱导的PBMC增殖。
- 万兵张利宁马春红宋静曹英林李长菲孙汶生
- 关键词：共刺激分子CD137真核表达系统
- 分泌型人4-1BB-hIgG1Fc融合蛋白真核表达载体的构建
- 4-lBB是一种可诱导的T细胞表面受体,具有分泌型(可溶性)和膜型两种形式。我们在国内率先运用dhfr-CHO细胞表达了人4-lBB膜型蛋白,并进行了初步的活性研究。但是由于膜型4-lBB抗原表达于细胞膜表面,给进一步的...
- 万兵张利宁李长菲刘星霞马春红宋静曹英林孙汶生
- 关键词：分泌型真核表达载体
- 文献传递
