高尔静
- 作品数：24 被引量：33H指数：3
- 供职机构：首都医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种用于脑损伤修复的生物材料及其制备方法
- 本发明涉及一种用于脑损伤修复的生物材料及其制备方法。它是以透明质酸为原料，在碳二亚胺盐酸盐(EDC)的介导下，用己二酸二酰肼(ADH)进行交联的方法制备透明质酸凝胶，作为接枝抗体的载体材料，用抗体固化技术将轴突生长抑制因...
- 徐群渊刘丙方候少平崔福斋田维明马军张进禄杨慧高尔静姬曼
- 文献传递
- 功能化硅壳荧光纳米载体在A549细胞中的细胞标记被引量：1
- 2009年
- 背景:硅壳荧光磁性纳米载体表面功能化后不仅仍具备荧光性、磁性功能,而且还具有携药和携基因潜能,并有良好的生物相容性,可实现对细胞的标记功能。目的:制备Fe3O4@SiO2(FITC)-3-异氰基丙基三乙氧基硅烷-聚酰胺-胺树状大分子(G2.0)纳米颗粒型多功能纳米载体,并评估纳米载体标记A549细胞的能力,在细胞内的分布及与细胞的生物相容性。设计、时间及地点:观察性实验,于2006-06/2007-06在首都医科大学化学生物学与药学院合成了纳米载体,2007-07/2008-07在首都医科大学神经科学研究所完成了复合纳米载体的生物评估。材料和方法:15μL3-异氰基丙基三乙氧基硅烷和195.12mg聚酰胺-胺树状大分子(G2)在无水甲醇环境中反应24h,得到目的产物3-异氰基丙基三乙氧基硅烷-聚酰胺-胺树状大分子;然后将合成好的Fe3O4@SiO2(FITC)与3-异氰基丙基三乙氧基硅烷-聚酰胺-胺树状大分子在甲醇溶液环境下,避光搅拌48h,用永磁铁分离固体,并经无水乙醇洗后真空干燥,得到最终目标载体。主要观察指标:透射电镜观察纳米载体的大小和细胞内分布,Zeta电位测定其生理情况下电荷情况,激光共聚焦显微镜下观察FITC、DAPI和LysotrackerBlue细胞染色情况以评估载体在细胞内定位,CCK-8评估其对细胞毒性作用,流式细胞计数法评价其标记细胞的效率。结果:透射电镜分析表明,修饰的硅壳纳米载体大小约为80nm,pH=7.4,纳米载体zeta电位为+23.93mV。透射电镜和激光共聚焦显微镜结果表明纳米粒主要存在细胞浆中,且能被溶酶体吞噬。CCK-8结果显示纳米载体的浓度高达1g/L时仍无明显的毒性作用。流式细胞计数结果表明,细胞摄取纳米粒呈浓度和时间依赖性。结论:成功制备了硅壳结构的荧光磁性纳米载体,主要分布在细胞浆中,且细胞相容性好。
- 赵焕英隋雷鸣李峰李睿蔡青邓君高尔静姬曼杨慧
- 关键词：生物材料细胞相容性细胞标记
- 5-HT_(1A)受体蛋白在PC12细胞膜转运的动态变化
- 2010年
- 目的在神经元样PC12活细胞上进行实时、可视和定量研究5-羟色胺1A受体的时空分布、膜转运和信号传导机制。方法运用RT-PCR方法获得小鼠5-HT1A基因,并插入到pEGFP-N1真核表达载体中。采用阳离子脂质体方法将质粒转染至PC12细胞和HEK293细胞中,通过G418筛选出稳定表达5-HT1A-EGFP的PC12细胞系。运用激光共聚焦成像系统观察活细胞中5-HT1A-EGFP的表达情况,利用光漂白荧光恢复(FRAP)技术在PC12细胞膜局部漂白后观察5-HT1A-EGFP荧光蛋白在细胞膜上转运的情况。结果克隆所获得的小鼠5-HT1A基因是准确的。5-HT1A-EGFP蛋白清晰的分布于PC12和HKE293细胞膜上。通过FRAP技术观察到漂白区域的细胞膜在100s内有部分恢复,说明受体在细胞膜上发生转运。结论建立了稳定表达5-HT1A-EGFP融合蛋白的PC12细胞系,并利用活细胞成像和FRAP技术观察分析并证实了5-HT1A受体在PC12细胞的膜表面的表达和转运的动态变化。
- 金艳燕吕琼闫竹青高尔静赵春礼张进禄徐志卿
- 应用人工神经修复长距离周围神经缺损的研究
- ＜正＞ 本实验借助人工神经修复临床长距离的周围神经缺损,并观察周围神经再生的规律。本实验采用人工神经桥接羊坐骨神经8.5cm缺损为模型,并在导管内植入具有多重生物学活性的微载体进行修复治疗。手术后15个月,进行WGA-H...
- 李晓光刘玉军鲁强王元身赵春礼蔡青高尔静姬曼杨朝阳杨慧吕国蔚徐群渊
- 文献传递
- 嗅球切除对成年大鼠侧脑室外侧壁新生细胞增殖和分化的影响被引量：2
- 2007年
- 目的研究嗅球切除后成年大鼠侧脑室外侧壁(SVZ)新生细胞增殖和分化的情况,进一步探讨嗅球对SVZ神经生发活动的影响。方法建立成年SD雄性大鼠右侧嗅球切除模型,并分别存活4周和12周,利用Nissl染色、多唾液酸神经细胞黏附分子(PSA-NCAM)和BrdU免疫组织化学染色的方法观察了成年SD大鼠嗅球切除后存活不同时间两侧吻侧迁移流(RMS)BrdU阳性细胞数占总细胞百分比的变化以及两侧RMSPSA-NCAM阳性细胞的形态学变化。结果1·嗅球切除后不同时间点,嗅球切除侧RMS的细胞数增加,BrdU免疫阳性细胞数增加,但BrdU免疫阳性细胞数占总细胞数的百分比随嗅球切除后大鼠存活时间的延长而下降,且以RMS的吻侧部分下降更明显;2·嗅球切除后,在切除侧断端吻侧颗粒层和RMS均出现较对照侧更多的具有较长突起的PSA-NCAM阳性细胞。结论嗅球切除后仍有新生神经元沿RMS向吻侧迁移,但其增殖率随时间延长下调;嗅球的切除似乎并没有影响成神经细胞的分化。
- 孟艳刘丙方蔡青高尔静徐群渊
- 关键词：增殖分化免疫组织化学
- 成年大鼠脑室下区吻侧迁移流的细胞形态学研究被引量：2
- 2005年
- 为了探讨成年大鼠脑室下区吻侧迁移流(RMS)神经干细胞的分布及特点,我们利用Nissl染色,BrdU、GFAP、PSA-NCAM和nestin免疫组织化学染色,nestin与GFAP免疫荧光双标记染色等方法观察了正常成年SD大鼠RMS的组织化学和免疫组织化学特征;同时观察了正常RMS的超微结构特征。结果观察到:(1)在光镜下,Nissl染色切片的RMS由深染和浅染细胞组成,其中深染细胞为PSA-NCAM、BrdU及nestin免疫反应阳性,浅染细胞为GFAP及nestin免疫反应阳性;(2)电镜下,RMS存在数量不等、由同一种类型的细胞聚集形成的细胞团,以及星型胶质细胞和少量少突胶质细胞,细胞团中可看到正在分裂的细胞。结果提示:(1)除少突胶质细胞外,RMS主要由两种类型细胞组成,即成神经细胞和星型胶质细胞;(2)成神经细胞存在于RMS全长并保持分裂特性,属神经元前体细胞;(3)目前还没有充分的证据证实RMS中存在干细胞。
- 孟艳高殿帅蔡青刘丙方高尔静鲁强徐群渊
- 关键词：脑室下区形态学
- 硫化氢对体外大鼠肝星状细胞内Ca^2＋浓度变化及细胞增殖的影响被引量：6
- 2008年
- 目的研究硫化氢(H2S)对大鼠肝星状细胞-T6(HSC-T6)Ca2+浓度、细胞增殖的影响及其机制。方法活化HSC-T6用含10小牛血清DMEM培养液制备为1×105个肝星状细胞(HSC)悬液。钙离子荧光探针Fluo-3/AM负载细胞后,在不同刺激条件下,利用激光扫描共焦显微镜动态扫描HSC-T6细胞内Ca2+荧光强度(FI)变化,FI表示细胞内Ca2+浓度。四唑盐比色法,观察不同浓度H2S供体——NaSH对HSC-T6细胞增殖的影响。结果低浓度H2S(100μmol/L)明显降低HSC-T6细胞内Ca2+浓度(P<0.05),而细胞增殖增加(增殖率为116);KATP通道阻断剂——格列本脲可阻断H2S的作用。高浓度H2S(1mmol/L)刺激HSC-T6细胞内Ca2+浓度增加,但细胞增殖无明显变化(P>0.05)。结论低浓度H2S通过激活HSC-T6细胞KATP通道降低细胞内Ca2+浓度,可能通过调节细胞氧化应激促进细胞增殖;高浓度H2S刺激HSC-T6细胞内Ca2+浓度增加。提示H2S在肝硬化门脉高压症的发生机制中具有双重作用。
- 尚宏伟王利军王兴翠尤红唐淑珍高尔静丁惠国贾继东
- 关键词：硫化氢肝星状细胞四唑盐比色法细胞培养
- 一种用于脑损伤修复的生物材料及其制备方法
- 本发明涉及一种用于脑损伤修复的生物材料及其制备方法。它是以透明质酸为原料，在碳二亚胺盐酸盐(EDC)的介导下，用己二酸二酰肼(ADH)进行交联的方法制备透明质酸凝胶，作为接枝抗体的载体材料，用抗体固化技术将轴突生长抑制因...
- 徐群渊刘丙方候少平崔福斋田维明马军张进禄杨慧高尔静姬曼
- 文献传递
- 成年大鼠侧脑室外侧壁新生细胞在嗅球切除后增殖与分化的形态学变化
- 目的：研究嗅球切除后成年大鼠侧脑室外侧壁(SVZ)新生细胞增殖和分化的情况,进一步探讨嗅球对SVZ神经生发活动的影响。方法：建立成年SD雄性大鼠右侧嗅球切除模型,并分别存活4w和12w,利用Nissl染色、PSA-NCA...
- 张淑文孟艳刘丙方蔡青高尔静徐群渊
- 关键词：增殖分化形态学成年大鼠
- AGRIN在老年鼠大脑皮质和海马的表达
- 2004年
- 目的 观察蛋白聚糖—agrin在大鼠大脑皮质和海马的表达 ,探讨agrin与记忆的关系。方法 用抗agrin的多克隆抗体 ,免疫组化方法检测成年大鼠、记忆正常老年鼠以及记忆障碍的老年鼠大脑皮质和海马中agrin的表达变化。结果 Agrin在不同动物组的表达变化明显 ,在成年鼠和记忆正常的老年鼠的大脑皮质和海马agrin有较弱表达 ,但在记忆障碍的老年鼠其表达增加明显。结论 Agrin表达可能和大鼠的记忆障碍有关。
- 刘丙方王唯析高尔静徐群渊
- 关键词：AGRIN蛋白聚糖记忆障碍大脑皮质海马
