马晓霞
- 作品数：8 被引量：23H指数：3
- 供职机构：上海市第一人民医院更多>>
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- RNA干扰对急性髓系白血病AML1-ETO融合基因表达的抑制作用被引量：1
- 2008年
- 目的应用RNA干扰技术抑制Kasumi-1细胞AML1-ETO融合基因的表达，研究随后出现的细胞增殖和细胞周期变化。方法体外化学合成针对AML1-ETO融合基因的小干扰RNA（siRNA），并用电穿孔方法将AML-ETO siRNA转染Kasumi-1细胞，以非特异性的siRNA转染细胞作阴性对照；电转带有增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的载体，流式细胞术检测其绿色荧光以确定电转效率；荧光染料实时定量PCR及Western blot检测AML1-ETO siRNA的抑制效应；并应用CCK-8实验法检测细胞增殖率；采用碘化丙锭（PI）法测定细胞周期DNA含量。结果电转增强EGFP的转染效率可达44．5％；电转AML1-ETO siRNA可以有效抑制AML1-ETO融合基因在mRNA和蛋白水平的表达；电转AML1-ETO siRNA72h后细胞增殖率[（47．90±0．02）％]低于对照组[（66．90±0．08）％]（P〈0．05）；PI染色显示AML1-ETO siRNA转染细胞72h后，G1期细胞比例为38．3％，对照组为31．6％，而处于G2／M期细胞分别为1．8％和2．4％。结论化学合成的特异性siRNA能抑制AML1-ETO融合基因的表达，siRNA介导的AML1-ETO融合蛋白表达减少阻滞Kasumi-1细胞在G1期，进而抑制细胞增殖。
- 卫菊李肃王椿秦尤文马晓霞谢匡成颜式可高彦荣蔡琦
- 关键词：RNA干扰融合蛋白AML1-ETOKASUMI-1细胞
- 表观遗传学调控机制对白血病细胞维甲酸受体β基因表达的影响及意义
- 核苷酸类物质是细胞间通讯的载体，P2家族嘌呤受体传递ATP介导的细胞间通讯。本项研究从功能异常的J6-1细胞中克隆P2X7受体基因，旨在探索白血病细胞中P2X7受体功能异常的机制。
- 孟月生张燕香艾工文孟秀琴魏蓉马晓霞刘葳
- 关键词：白血病基因表达
- 表观遗传学机制对白血病细胞维甲酸受体β基因表达的调控作用及意义被引量：2
- 2007年
- 目的探索表观遗传学机制对白血病细胞维甲酸受体β基因(RARβ)表达的调控作用及意义。方法应用 DNA 甲基化酶抑制剂地西他滨(DAC)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠(VPA)与全反式维甲酸(ATRA)处理白血病细胞;RARβ基因甲基化测定和表达定量;染色质免疫沉淀。结果 56例急性髓系白血病(AML)患者 RARβ基因甲基化总阳性率为64.3%。DAC 与 VPA 可显著增加 ATRA 对 RARβ表达的激活作用。染色质免疫沉淀实验证明 DAC 和 VPA 通过 DNA 去甲基化和组蛋白乙酰化作用上调 RARβ表达。三药联合可诱导部分 U937细胞出现髓系分化标记 CD11b,使克隆形成能力明显下降。结论表观遗传学调控剂与 ATRA 联合应用可激活 RARβ的表达,具有协同抗白血病作用。
- 孟月生马晓霞孟秀琴魏蓉刘葳艾工文张燕香
- 关键词：表观遗传学
- RNA干扰对慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因表达的抑制作用被引量：7
- 2005年
- 目的研究RNA干扰(RNAi)效应对慢性粒细胞白血病(CML)bcr/abl融合基因表达的抑制作用。方法体外化学合成针对bcr/abl融合基因的小干扰RNA(siRNA),并用电穿孔方法将siRNA转染K562细胞株,以未转染的细胞及非特异性的siRNA转染细胞作对照;同时转染带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的载体作为阳性对照,流式细胞术检测其绿色荧光以确定转染效率;实时定量RTPCR及Westernblot法检测siRNA的抑制效应。MTT法检测细胞增殖抑制率。膜联蛋白Ⅴ(AnnexinⅤ)及碘化丙锭双染法测细胞凋亡率。结果电穿孔的转染效率可达70%;化学合成的siRNA可以抑制bcr/abl融合基因在mRNA和蛋白水平的表达;特异性siRNA可以抑制细胞增殖,转染24h细胞增殖抑制率达47%,48h达56%;特异性siRNA转染细胞24h组凋亡率为15.05%,48h组为19.47%,与对照组(1.00%)比较明显提高。结论在细胞水平上,化学合成的siRNA可以抑制bcr/abl融合基因的表达,为利用RNA干扰作为基因治疗的研究奠定基础。
- 马晓霞王椿卫菊秦尤文颜式可高彦荣蔡琦
- 关键词：RNA干扰慢性粒细胞白血病BCR/ABL融合基因细胞凋亡
- 自身免疫性溶血性贫血及其药物治疗
- 2007年
- 自身免疫性溶血性贫血(AIHA)是一组因B淋巴细胞功能异常亢进,产生抗自身红细胞抗体使红细胞破坏增加而引起的贫血,其常见的并发症有血栓栓塞和淋巴细胞增生。AIHA的标准治疗措施包括糖皮质激素治疗、脾切除和免疫抑制治疗,近年,新的治疗药物开始涌现并初显成效。
- 马晓霞张燕香王椿
- 关键词：贫血溶血免疫性疾病免疫抑制剂单克隆抗体
- 实时定量RT-PCR检测慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因的临床意义被引量：6
- 2005年
- 目的:建立实时定量RTPCR方法检测慢性粒细胞白血病(CML)bcr/ablmRNA的方法;探讨CMLbcr/abl融合基因的表达水平与疗效的关系。方法:可同时检测b2a2和b3a2两种亚型,GAPDH的mRNA作为内参照。检测14例CML患者的22个外周血和骨髓样本中bcr/abl融合基因表达水平,并对2例异基因造血干细胞移植后复发的患者进行动态监测。结果:bcr/abl及GAPDH标准曲线的相关系数均为0.999;灵敏度为10-6;14例初诊患者的mRNA表达水平范围为2.81～145;2例异基因造血干细胞移植后复发患者的bcr/ablmRNA表达水平随临床治疗而变化。结论:实时定量PCR检测CML患者的bcr/abl融合基因,敏感可靠,重复性好;其融合基因表达水平的改变与临床疾病进展关系相一致,有助于反映白血病细胞负荷、评价疗效及判断疾病预后。
- 马晓霞王椿秦尤文颜式可高彦荣蔡琦
- 关键词：白血病髓细胞性实时定量聚合酶链反应融合基因
- bcr/abl基因表达的定量检测技术及临床意义被引量：7
- 2004年
- bcr/abl基因在慢性粒细胞白血病发病机制中的作用已为人们所熟知,但是传统的检查方法只能给以定性结果,近年来各种定量技术得以长足进步,可以监测患者对各种治疗的反应,预测复发和及时采取措施进行干预,该文就几种定量方法加以综述。
- 马晓霞王椿
- 关键词：白血病BCR/ABL反转录聚合酶链反应微小残留病
- 免疫抑制剂在治疗骨髓增生异常综合征中的应用
- 2004年
- 骨髓增生异常综合征(MDS)是一组造血干细胞恶性克隆性疾病,主要表现为造血功能异常伴外周血细胞数减少,并具有演变为急性非淋巴细胞白血病的高危险性。MDS的确切发病机制尚不清楚,免疫调节功能异常可能为其中一个重要原因。本文简要介绍几种免疫抑制剂在MDS治疗中的探索及其结论。
- 马晓霞王椿
- 关键词：骨髓增生异常综合征免疫抑制剂MDS造血功能
