饶柏钟
- 作品数:9 被引量:4H指数:1
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- LT蛋白诱导小鼠脾脏IFN-γ变化规律研究
- 2014年
- 为研究大肠杆菌热敏性肠毒素(Escherichia coli heat-labile enterotoxin,LT)蛋白佐剂(野生型、突变型)对免疫小鼠体内细胞因子表达水平的影响,建立了检测干扰素(IFN-γ)的荧光定量PCR方法,并检测了经LT滴鼻免疫小鼠脾脏中IFN-γmRNA的表达水平。结果表明:野生型和突变型LT蛋白免疫小鼠脾脏中IFN-γ的mRNA水平呈时间依赖性升高,而PBS对照组没有明显变化。野生型LT蛋白免疫后48 h,小鼠脾脏IFN-γmmRNA的表达量与对照组相比显著上升并达到峰值,在60 h后开始下降;突变型LTRG蛋白免疫后60 h左右,IFN-γmRNA水平达到最高峰值,72 h后开始下降。本研究表明:野生型及突变型LT蛋白免疫小鼠均能增强小鼠脾脏中IFN-γ的转录表达,产生针对抗原的非特异性免疫应答。
- 董端凝殷秀辰哈卓饶柏钟刘惠莉
- 关键词:IFN-Γ小鼠实时定量PCR
- 粘膜佐剂肠毒素LT蛋白制备及配伍疫苗研制
- 刘惠莉赵艳敏师小潇唐思静哈卓殷秀辰陶洁倪建平董端凝李星潘洁饶柏钟
- 项目属于兽医学领域-新型疫苗及疫苗佐剂研制。 大肠杆菌热敏性肠毒素(Heat-labile toxin,LT)是高效粘膜佐剂,基因改造的无毒mLT粘膜佐剂蛋白与畜禽疫苗配伍,研制可经粘膜免疫的新型疫苗,提升免疫的针对性和...
- 关键词:
- 关键词:兽医学
- 一种猪病毒性腹泻病原的多重液相芯片检测方法及其构建
- 一种猪病毒性腹泻病原的多重液相芯片检测方法及其构建,根据猪病毒性腹泻病原的基因序列,筛选出合适的TAG序列,偶联于微球;将TAG互补序列标记于各病原PCR引物的上游引物5’端,并在PCR引物的下游引物5’端标记生物素;然...
- 刘惠莉陶洁李本强马玉飞程靖华石迎饶柏钟
- 文献传递
- 一种猪瘟口服弱毒冻干疫苗、其制备方法及冻干保护剂
- 本发明公开了一种猪瘟口服弱毒冻干疫苗、其制备方法及冻干保护剂,所述猪瘟口服弱毒冻干疫苗包括抗原猪瘟病毒、黏膜佐剂和冻干保护剂,其中,冻干保护剂包括:1~3%明胶,1~3%甘氨酸,余量为水;该猪瘟口服弱毒冻干疫苗能较好的保...
- 刘惠莉陶洁饶柏钟
- 文献传递
- 表达猪流行性腹泻病毒S基因的猪源BVDV重组病毒及应用
- 表达猪流行性腹泻病毒S基因的猪源BVDV重组病毒及应用,其在猪源BVDV的C核衣壳蛋白基因N端插入了猪流行性腹泻病毒S基因的中和抗原表位序列。本发明获得一种重组感染性克隆质粒,该质粒线性化后,体外转录成RNA,并转染MD...
- 刘惠莉陶洁李本强程靖华石迎饶柏钟
- 文献传递
- 一种猪病毒性腹泻病原的多重液相芯片检测方法及其构建
- 一种猪病毒性腹泻病原的多重液相芯片检测方法及其构建,根据猪病毒性腹泻病原的基因序列,筛选出合适的TAG序列,偶联于微球;将TAG互补序列标记于各病原PCR引物的上游引物5’端,并在PCR引物的下游引物5’端标记生物素;然...
- 刘惠莉陶洁李本强马玉飞程靖华石迎饶柏钟
- 文献传递
- 重组口蹄疫病毒非结构蛋白3AB基因的克隆与表达被引量:1
- 2008年
- 陈波华修国张忠明潘洁饶柏钟邢继兰
- 关键词:口蹄疫病毒3AB基因非结构蛋白偶蹄动物接触性传染病
- 猪乙脑病毒重组E基因的克隆表达及间接ELISA检测方法研究被引量:1
- 2015年
- 参照已发表的猪乙脑病毒(JEV)基因组序列,设计引物,扩增出E基因,克隆到pMD19-T载体中。序列分析表明:E基因与NCBI登录的JEV毒株E基因序列同源性达到96.6%—99.7%;遗传进化分析表明:该JEV属于GIII病毒。将E基因片段亚克隆到pET32a-E,IPTG诱导表达E蛋白。Western Blot检测表明:该重组蛋白能与JEV高免血清发生非特异性反应,证明该表达产物为JEV E蛋白。以重组E蛋白为包被抗原,建立检测猪JEV抗体的间接ELISA方法,检测160份猪血清样品,与猪JEV抗体检测试剂盒进行平行性对比,结果显示二者的吻合率为92.2%,表明建立的ELISA方法具有较好的特异性,有望为临床提供一种JEV血清抗体检测方法。
- 李海洋彭丽英陶洁殷秀辰饶柏钟刘惠莉
- 关键词:乙脑病毒E基因间接ELISA
- 猪乙型脑炎病毒Ⅰ、Ⅲ型的RT-LAMP检测方法建立与应用被引量:2
- 2015年
- 参考Gen Bank中猪乙型脑炎病毒(JEV)Ⅰ型和Ⅲ型毒株的E基因序列,通过比对分析,选取8个保守区域设计了6条引物,经条件优化及临床样品验证,本研究建立了能同时检测JEVⅠ型和Ⅲ型毒株E基因的RT-LAMP方法。该方法的最低检测灵敏限度为15 copies,具有较好的特异性,对猪常见病原如猪流感病毒(SIV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV),猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),猪细小病毒(PPV)和伪狂犬病病毒(PRV)等均没有特异性扩增。与RT-PCR检测方法相比,其灵敏性高10倍。用本研究建立的RT-LAMP方法检测来自屠宰场的1 500份猪血清,阳性检出率为0.4%,与RT-PCR吻合率达100%,表明本试验建立的RT-LAMP方法适用于Ⅰ、Ⅲ基因型JEV的快速、批量筛检,为JEV感染的流行病学调查提供了必要的技术手段。
- 李海洋殷秀辰饶柏钟刘惠莉
- 关键词:乙型脑炎病毒环介导等温扩增