颜春洪
- 作品数：11 被引量：137H指数：7
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- 发文基金：中国博士后科学基金更多>>
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- 细胞骨架结合蛋白酪氨酸磷酸化在小鼠黑色素瘤细胞分化诱导中的作用被引量：1
- 1998年
- 为探讨影响癌细胞分化的因素 ,分析了诱导分化与细胞内蛋白酪氨酸磷酸化的关系 .蛋白酪氨酸激酶抑制剂 genistein诱导B1 6_BL6黑色素瘤细胞分化 .诱导分化前后 ,总蛋白抽提物中磷酸酪氨酸蛋白含量没有明显改变 ;但不溶于TritonX_1 0 0的细胞骨架结合蛋白的酪氨酸磷酸化水平下降 ,其中明显降低的有 3种蛋白 ( 5 3,6 0和 6 5ku) .表明细胞骨架结合蛋白酪氨酸磷酸化在癌细胞的分化调节中发挥重要作用 .
- 颜春洪韩锐
- 关键词：酪氨酸磷酸化癌细胞分化黑色素瘤CAPS
- 基质金属蛋白酶-2在酵母系统中表达的初步研究被引量：7
- 1999年
- 基质金属蛋白酶２（明胶酶Ａ）在肿瘤侵袭和转移中具有重要作用，为进一步研究其作用机制，在酵母系统中表达了金属蛋白酶２通过ＰＣＲ方法获得明胶酶Ａ的表达序列，酶切和测序结果证明序列正确后，构建明胶酶Ａ的表达载体ｐＰＩＣ９／ＧｅｌＡ，电击法转化酵母得到阳性克隆．明胶酶谱分析说明表达产物具有明胶底物特异性，ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳表明，表达产物的分子质量为６６ｋｕ．
- 丁秀云李春海朱运峰孙丽亚颜春洪张立新冯东晓陈高明
- 关键词：基质金属蛋白酶酵母
- 黏附诱导卵巢癌细胞基质金属蛋白酶-9基因的表达被引量：21
- 2002年
- 目的 观察黏附纤黏连蛋白后肿瘤细胞基质金属蛋白酶 (MMP)基因的表达 ,揭示细胞侵袭发生的机理。方法 纤黏连蛋白与A2 780人卵巢癌细胞相互作用后 ,用反转录PCR观察MMPmRNA的表达 ;从HT10 80细胞基因组DNA克隆MMP9启动子区基因 ,构建MMP 9 pGL2报告基因载体 ,瞬时转染A2 780细胞 ,通过测定萤火虫酶活性 ,观察纤黏连蛋白对MMP9启动子活性的影响。结果 A2 780细胞不表达MMP基因 ,黏附后细胞内MMP 9mRNA含量明显增加 ,这一作用与黏附时间有关。克隆MMP 9基因启动子并转染细胞 ,黏附后转染细胞内MMP 9基因启动子活性明显增强。结论 细胞 细胞外基质黏附可刺激MMP基因转录活性 ,诱导MMP基因表达 ,进而促进细胞侵袭。
- 颜春洪田方肖风君李克勤李春海
- 关键词：卵巢肿瘤基质金属蛋白酶基因表达卵巢癌
- 高表达bcl-2卵巢癌细胞系参与药物抵抗和细胞凋亡作用的研究
- 2000年
- 目的：探讨化疗的敏感性与细胞凋亡的关系，观察细胞凋亡抑制分子ｂｃｌ－２在卵巢癌化疗抵抗中的作用。方法：构建了逆转录病毒ｂｃｌ－２表达载体ｐＬＸＳＮ／ｂｃｌ－２，应用ｌｉｐｏｆａｃｔｉｎ法建立转染ｂｃｌ－２基因和转染空载体ｐＬＸＳＮ的卵巢癌细胞系。ＭＴＴ法观察细胞系抵抗药物的细胞毒作用。ＦＡＣＳ和ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳观察ｂｃｌ－２高表达细胞系在阿霉素诱导细胞凋亡中的变化。结果：转染 ｂｃｌ－２的卵巢癌细胞系ＯＣ３／ｂｃｌ－２稳定表达ｂｃｌ－２分子并抵抗药物介导的细胞毒作用，明显提高细胞的存活率，与此同时也抑制细胞凋亡的发生。结论：化疗的敏感性与细胞凋亡的调节密切相关，凋亡抑制基因ｂｃｌ－２在肿瘤耐药中起重要作用。
- 田方李春海颜春洪陈高明
- 关键词：BCL-2药物抵抗细胞凋亡卵巢肿瘤
- 抗恶性肿瘤转移药的实验研究被引量：11
- 1996年
- 颜春洪韩锐
- 关键词：肿瘤转移药物疗法
- 癌侵袭、转移分子机理与抗转移药物的研究进展被引量：9
- 1997年
- 近年来 ,癌侵袭、转移的机理探讨和药物研究取得了明显的进展 ,特别是对肿瘤新血管生成、基质金属蛋白酶以及细胞信号传导紊乱在癌侵袭、转移中的重要作用有了深入的认识。目前已有金属蛋白酶抑制剂 BB94、血管生成抑制剂 TNP 470和钙通道拮抗剂CAI进入临床研究 ,为癌侵袭、转移治疗的突破带来了希望。
- 施波颜春洪
- 关键词：癌转移癌侵袭基质金属蛋白酶抑制剂血管生成
- Raji细胞抵抗阿霉素诱导细胞凋亡分子机制的实验研究被引量：5
- 2000年
- 目的 :观察 Raji细胞抵抗阿霉素诱导细胞凋亡的分子机制 ,从细胞凋亡的角度探讨肿瘤细胞耐药机制。方法 :MTT方法测定阿霉素和肽素诱导的细胞毒实验 ,碘化丙啶染色 FACS和 DNA降解断裂法分析阿霉素诱导的细胞凋亡 ,FACS分析 Raji细胞 bcl- 2的表达 ,Western bolt观察 Raji细胞 p5 3、bax分子的表达 ,RT- PCR检测 MDR1、MRP和 GSTπ的表达水平。结果 :Raji细胞对阿霉素和肽素均产生明显药物耐受 ,同时抵抗药物诱导的细胞凋亡 ;Raji细胞中 bcl- 2分子呈诱导性表达 ,不表达或弱表达 bax、p5 3分子 ;Raji细胞组成性高表达 MDR1、MRP、GSTπ等耐药相关分子。结论 :Raji细胞抵抗药物诱导的细胞凋亡是化疗耐受的重要原因。其中细胞膜表面分子 MDR1、MRP的高表达 ,细胞质中 bcl- 2诱导性高表达 ,bax、p5 3分子的弱表达是导致药物耐受和抵抗细胞凋亡的重要因素。
- 田方李春海颜春洪程国均陈高明
- 关键词：RAJI细胞药物耐受细胞凋亡肿瘤
- 纤粘连蛋白诱导卵巢癌细胞基质金属蛋白酶-2基因表达被引量：25
- 2000年
- 目的 研究细胞外基质蛋白对肿瘤细胞基质金属蛋白酶 (MMP)基因表达的影响及机理。方法 以纤粘连蛋白处理SKOV3卵巢癌细胞后 ,用明胶 酶谱法和反转录PCR观察MMP分泌及基因表达。以MMP 2启动子转染细胞 ,通过测定萤火虫酶活性 ,观察纤粘连蛋白对MMP 2启动子活性的影响。细胞p5 3含量采用Westernblot分析。结果 5 μg/mL纤粘连蛋白刺激MMP 2分泌 ,但不影响MMP 9分泌 ,这一作用随纤粘连蛋白浓度增加而增强。经 10 μg/mL纤粘连蛋白刺激 1h后 ,细胞内MMP 2mRNA量显著增加 ;作用时间延长 ,诱导作用减弱。纤粘连蛋白可诱导转染细胞中萤火虫酶活性增加 ,AP 1功能抑制剂姜黄素 (5 0 μmol/L)不能阻断这一作用。经纤粘连蛋白处理后 ,细胞内p5 3含量明显增加。结论 纤粘连蛋白可刺激卵巢癌细胞中MMP 2分泌 ,诱导MMP 2启动子活性增强及mRNA含量增加 ,这一作用可能与p5 3蛋白转录因子活性有关 ,而与AP 1通路无关。
- 颜春洪李春海田方孙丽亚
- 关键词：纤粘连蛋白基质金属蛋白酶卵巢癌细胞
- 人基质金属蛋白酶-9在酵母Pichia pastoris中的表达被引量：10
- 2000年
- 基质金属蛋白酶 - 9( MMP- 9)可促进恶性肿瘤的侵袭、转移 ,并在组织重建、胚胎发育以及伤口愈合等生理过程中发挥重要作用 .为研究这一蛋白的性质 ,并以之为靶标筛选抗肿瘤转移药物 ,在酵母 Pichia pastoris中实现了重组人 MMP- 9蛋白的高效、高活性、分泌表达 .首先用 PCR扩增了 MMP- 9基因编码区 (不含信号肽序列 ) ,经测序证实后 ,将其插入 p PIC9质粒中 ,构建表达载体 .用 Li C1 - PEG法转化酵母后 ,采用明胶 -酶谱法筛选获得 5株高效分泌表达 MMP- 9的克隆 ,经PCR证实 MMP- 9基因整合在阳性克隆的染色体中 .重组蛋白分子量为 93k D,表达量为 1 0 mg/L.重组蛋白可水解明胶及 型胶原 ,并可经有机汞 APMA诱导发生自剪切 ,转换成 85k D的激活形式 ,表明重组蛋白具有与天然人 MMP- 9蛋白相似的底物水解活性和自剪切激活特性 .
- 颜春洪李春海田方朱运峰孙丽亚
- 关键词：基质金属蛋白酶-9酵母表达系统重组蛋白
- Genistein抑制HT1080人纤维肉瘤细胞的体外侵袭作用被引量：31
- 1999年
- 目的 观察ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ 对恶性肿瘤细胞侵袭及侵袭相关性质的影响，探讨蛋白酪氨酸激酶抑制剂用于肿瘤转移治疗的可能性。方法 ＨＴ１０８０ 细胞经２０ μｍｏｌ／Ｌ或４０ μｍｏｌ／ＬＧｅｎｉｓｔｅｉｎ 处理３天后，分别用重建基底膜侵袭模型、粘附基质分析、Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ 小室趋化运动模型以及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ 分析来研究药物处理后细胞侵袭、粘附、运动以及基质蛋白酶基因表达的改变。结果 经ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ 处理后，ＨＴ１０８０ 细胞的侵袭能力明显下降，趋化运动能力降低，基质金属蛋白酶抑制剂（ＴＩＭＰ１） 基因相对表达量增加，但粘附率没有降低。结论 ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ 可降低恶性肿瘤细胞的侵袭能力。
- 颜春洪韩锐
- 关键词：GENISTEIN纤维肉瘤蛋白酪氨酸激酶肿瘤侵袭
