贺明
- 作品数:9 被引量:19H指数:2
- 供职机构:吉林农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金吉林省重大科技攻关项目国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 牛MSTN蛋白与T-cap蛋白的相互作用验证
- 2014年
- 通过体内和体外试验研究牛MSTN蛋白与T-cap蛋白间的相互作用。构建pLEGFP-MSTN及pcDNA3.0-Flag-T-cap真核表达载体,共转染至293T细胞,利用免疫共沉淀技术检测两者间相互作用。再构建pGEX-4T-1-MSTN表达载体,经IPTG诱导表达并纯化GST-MSTN,将pcDNA3.0-Flag-T-cap载体转至293T细胞,通过GSTpull down检测两者间相互作用。利用各抗标签克隆抗体沉淀细胞裂解液,分别进行Western blotting检测,结果显示,体内和体外试验都可以检测到蛋白的表达。从而证实了MSTN与T-cap之间存在相互作用,本试验为在分子水平上为探索MSTN蛋白的新功能提供思路。
- 郑立双孙城涛李向楠刘红羽贺明刘勋吕文发
- 关键词:免疫共沉淀MSTN
- 克百威在奶牛日粮及牛奶中的残留量研究被引量:2
- 2014年
- 为明确奶牛日粮及牛奶中克百威残留状况及对牛奶安全的影响,建立气象色谱质谱(GC-MS)快速分析检测方法,测定克百威在奶牛日粮及牛奶中含量.结果表明:克百威在牧草上的最低检测浓度为1.21×10^-3 mg/kg,饲料最低检测浓度为1.22×10^-3 mg/kg,牛奶上的最低检测浓度为1.20×10^-3 mg/kg;最小进样量峰高为噪声3倍时,最小检出量为1.5×10^-11g;相对保留时间为18.0~18.2 min.本试验研究结果表明,克百威在奶牛日粮及牛奶中的残留限量符合最低残留限量标准.
- 赵静刘红羽王军刘勋贺明杨雪
- 关键词:克百威
- PCR-DGGE技术在生殖道内微生物研究中的应用
- 2015年
- 生殖道内的微生态在维持生殖道正常生理功能和预防疾病过程中起着非常重要的作用。传统细菌培养方法在研究微生态菌群时存在诸多局限性,PCR-DGGE(Polymerase Chain Reaction-Denaturing Gradient Gel Electrophoresis)指纹图谱技术是一种在基因水平上不依赖微生物培养的分子生物技术,免除了纯培养的种种局限,为菌群微生态的研究提供了准确而快捷的方法。本文综述了PCR-DGGE分子生物技术在人类和家畜生殖道内微生物的研究应用,为今后该技术的合理应用提供参考。
- 刘勋王军贺明易金云刘畅吕文发
- 关键词:生殖道微生物PCR-DGGE
- 奶牛生殖道内益生乳酸菌的筛选及分子鉴定被引量:2
- 2014年
- 为了筛选出用于制作微生态制剂的候选菌株,选取15头产后30~60d的健康荷斯坦奶牛,使用MRS琼脂培养基厌氧技术从生殖道分泌物中分离得到47株革兰阳性菌株。随后对其抑菌效果和产过氧化氢能力进行测试,从中挑选出抑菌效果和产过氧化氢能力相对较强的菌株4株,通过生化试验和16SrDNA序列分析方法对其进行鉴定。鉴定结果为:1株为魏斯氏菌,1株为大芬戈尔德菌,1株为乳酸明串珠菌,1株为营养泥杆菌。最后测试混合菌株的抑菌效果得出以下结论:大芬戈尔德菌、乳酸明串珠菌、营养泥杆菌混合之后抑菌效果在这几组混合液中抑菌效果是最好的。
- 赵静李向楠王军孙城涛刘红羽贺明刘勋王全凯
- 关键词:奶牛生殖道乳酸菌抑菌作用
- Kisspeptin在牛卵母细胞体外成熟过程中的表达和功能研究被引量:1
- 2015年
- Kisspeptin(Kp)是KiSS-1基因编码的产物,为明确Kp在牛卵母细胞体外成熟过程中的表达和功能,本文首先利用免疫荧光技术研究了Kp在牛卵母细胞体外成熟0、6、12、18、24h的表达规律,随后利用体外培养技术研究了添加Kp对牛卵母细胞体外成熟的影响。结果表明:Kp在牛卵母细胞体外成熟0、6、12、18、24h均有表达,且0~12h表达量呈递增趋势,12-24h下降并达到最低;在TCM-199溶液中添加10nmol/L的Kp可使卵母细胞的成熟率达到80.3%,与同时添加FSH和FBS处理组的结果差异不显著。研究结果提示,Kp在牛卵母细胞中有表达,且在体外成熟过程中呈现规律性变化,其可提高牛卵母细胞体外成熟效率。
- 贺明王军杨雨江刘子维刘勋吕文发
- 关键词:KISSPEPTIN牛卵母细胞免疫荧光体外成熟
- Kisspeptin在牛卵母细胞体外成熟过程中的表达和功能研究
- Kisspeptin是KiSS-1基因编码的一种多肽,其在下丘脑表达,对哺乳动物生殖活动起中枢调控作用已被广泛证实。研究表明,Kisspeptin除在下丘脑表达外,在卵巢也有表达,但有关其功能和机制的研究极少。对猪和鼠的...
- 贺明
- 关键词:KISSPEPTIN牛卵母细胞免疫荧光荧光定量PCR体外成熟
- 酵母双杂交技术及应用的研究进展被引量:12
- 2013年
- 酵母双杂交技术是研究蛋白质与蛋白质相互作用的一种非常有效的分子生物学方法,它是一种能直接检测胞内蛋白质相互作用较为简便、快捷、高效、敏感、广泛的方法。作者将主要介绍酵母双杂交技术的基本原理、应用及优缺点,现就酵母双杂交技术及其应用的研究进展作一综述。
- 郑立双李向楠孙城涛刘红羽刘勋贺明吕文发
- 关键词:酵母双杂交技术真核细胞蛋白质
- 秋水仙胺对电融合方法体外制备牛四倍体胚胎的影响
- 2014年
- 通过添加秋水仙胺从而改善电融合方法体外制备牛四倍体胚胎的过程。首先检测牛早期胚胎的分裂时间,并由此确定于体外受精后26~30h时间段内挑选既同期化且优质的2细胞期胚胎用于电融合。电融合参数选取2次直流电压为0.75kV/Cm且脉冲时间60μs。并通过免疫荧光染色监测电融合后细胞核的重组过程。设立电融合对照组和电融合秋水仙胺处理组,处理组在电融合后随即处理0.05mg/L秋水仙胺6h,后彻底洗涤继续体外培养至囊胚期。处理组的融合率(84.4%vs 84.8%)、分裂率(74.3%vs 77.6%)和囊胚率(36.1%vs 39.4%)皆低于对照组,但差异均不显著。获取的囊胚期胚胎的核型分析结果显示,处理组的四倍体制备率显著高于对照组(59.4%vs 26.9%)。综上所述,对电融合后的胚胎处理0.05mg/L秋水仙胺6h显著提高了牛四倍体电融合方法体外制的备率。
- 王二旦LEE Kyeong-lim柴梦龙贺明KONG Ll-keun吕文发
- 关键词:四倍体胚胎电融合细胞周期核型分析
- 2细胞期胚胎采集时间对电融合方法体外制备牛四倍体胚胎效率的影响
- 2015年
- 通过检测牛早期胚胎分裂速率的时间分布,并将体外受精后0~34 h与26~30 h时间段内采集的2细胞期胚胎分别作为电融合对照组与电融合试验组。将对照组与试验组的2细胞期胚胎分别用于电融合,并将电融合后的胚胎继续体外培养至囊胚期,检测并对比分析2组胚胎的融合率、分裂率、囊胚率和四倍体制备率。结果显示,牛2细胞期胚胎在体外受精后28~30 h其内分裂速率达到最高峰(18.9%)。电融合对照组的融合率、分裂率略高于试验组胚胎(85.2%vs.84.2%,82.2%vs.80.9%),试验组的囊胚率略高于电融合对照组(45.4%vs.44.8%),但差异均不显著。而电融合试验组的四倍体制备率显著高于电融合对照组(28.3%vs.14.5%)。结果表明,牛2细胞期胚胎的采集时间对电融合方法体外制备牛四倍体胚胎的效率有显著影响。
- 赵静王二旦柴梦龙贺明刘畅杨世宝
- 关键词:四倍体胚胎电融合细胞周期