蔺辉星
- 作品数：40 被引量：47H指数：4
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省农业科技自主创新基金江苏省高校优秀科技创新团队更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 一种猪源胞内劳森菌Omp2蛋白单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了一种猪源胞内劳森菌Omp2蛋白单克隆抗体及其应用，所述单克隆抗体的重链可变区包括HCDR1、HCDR2和HCDR3，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示...
- 范红结肖宁蔺辉星周红李剑男胡雨婷
- 文献传递
- 马链球菌兽疫亚种纤连蛋白结合蛋白的原核表达及其免疫原性的检测被引量：2
- 2015年
- 根据已发表的纤连蛋白结合蛋白(fibronectin-binding protein,FNZ)基因(fnz)序列,设计并合成1对引物,以马链球菌兽疫亚种(SEZ)ATCC35246菌株基因组DNA为模板,PCR扩增fnz基因,并定向将其克隆至表达载体pET-32a(+)中。重组质粒pET-32a(+)-fnz经酶切及测序鉴定后,在大肠杆菌BL21中进行诱导表达,表达产物经Western-blot检测后进行纯化,得到了74ku的纯化蛋白。以纯化的FNZ与ISA206佐剂以1∶1的体积比混合后免疫ICR小鼠,每只小鼠背部皮下多点注射120μL(含蛋白22.5μg),14d后以同样方法进行加强免疫。间接ELISA检测结果表明,FNZ免疫组小鼠的血清FNZ抗体效价显著高于其他3个对照组。二免后第15天小鼠腹腔注射ATCC35246菌液5.0×105 CFU(10LD50),观察注射后10d内小鼠的临床表现及存活状况;结果显示,FNZ免疫组小鼠的存活率为62.5%,显著高于阴性对照组(0)和空白对照组(0),但低于SEZ灭活疫苗免疫组(87.5%)。结果表明,FNZ可使免疫小鼠对SEZ的感染产生一定的抵抗作用。
- 范皓天周梦曦蒋子奇蔺辉星范红结
- 关键词：马链球菌兽疫亚种原核表达免疫保护
- 我国中东部主要养猪地区死亡育肥猪呼吸道病原菌的流行病学调查及猪多杀性巴氏杆菌的特性鉴定
- 2024年
- 【目的】从我国中东部主要养猪地区因呼吸道疾病死亡的育肥猪病料中分离主要病原菌,并进行鉴定和分型,为近年流行的猪呼吸道病原菌的防控治疗提供流行病学依据。此外,对分离的猪多杀性巴氏杆菌(Pm)特性进行鉴定,为Pm疫苗研制提供参考。【方法】收集2021-2023年我国中东部主要养猪地区规模化猪场因呼吸道疾病死亡的育肥猪的病猪肺脏;用血琼脂和TSA培养基分离病原菌,通过微生物学和分子生物学方法鉴定分离菌株;合成adk、est、gdh、mdh、pgi、pmi和zwf基因引物,以分离的Pm为模板进行PCR,通过测序7对管家基因对Pm进行MLST分型;通过PCR对Pm进行荚膜分型和脂多糖分型;通过PCR对Pm的毒力因子进行检测;在ICR小鼠对单一分离的A型和部分D、F型Pm进行毒力鉴定;检测JS-65、JS-51和JS-34在ICR小鼠的LD_(50)。【结果】共分离Pm 73株,分离率为15.53%;分离猪链球菌(SS)71株、猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)29株和副猪格拉菌(GPS)10株,分离率分别为15.11%、6.17%和2.13%。分型结果表明,Pm主要为A:L3型,占55%;SS主要为9型,占38.03%;APP主要为15型,占51.72%;GPS主要为5/12型,占60%。混合感染包括Pm+SS,Pm+APP,SS+APP和Pm+APP+GPS,混合感染占总猪群的16.67%。共分离到3种Pm荚膜型:A(67%)、D(30%)和F(3%)型;2种脂多糖型:L3型(56%)和L6型(44%);9种ST分型:ST79、ST50、ST7、ST74、ST13、ST27、ST9、ST287和ST370,所占比例分别为33%、26%、16%、10%、4%、4%、3%、3%和1%。毒力基因检测结果表明:ptfA、fimA、hsf-2、exbB、exbD、tonB、fur、nanH、sodA和sodC的阳性率大于95%;hsf-1、pfhA、tadD、hgbA、hgbB、pmHAS、ompA、ompH、oma87和plpB阳性率在40%-90%之间;tbpA和nanB阳性率在10%-30%;未检出toxA。毒力鉴定结果表明A型菌株在剂量小于10^(2)CFU时导致小鼠全部死亡,D型菌株在10^(3)CFU剂量时小鼠死亡率为60%-100%,F型菌株在5×10^(3)CFU剂量时小鼠死亡率为60%。在ICR小鼠检测JS-65、JS-
- 罗素贤周红蔺辉星范红结
- 关键词：流行病学猪多杀性巴氏杆菌分子分型
- Epidemic strain YC2014 of porcine epidemic diarrhea virus could provide piglets against homologous challenge
- Porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) is the main causative agent of porcine epidemic diarrhea (PED).Since De...
- 蔺辉星范红结
- 关键词：PORCINEEPIDEMICDIARRHEA
- 一种用于检测胞内劳森菌的绝对荧光定量PCR引物对、试剂盒及检测方法
- 本发明公开了一种用于检测胞内劳森菌的绝对荧光定量PCR引物对、试剂盒及检测方法，所述引物对包括上游引物和下游引物，其核酸序列如下所示：上游引物：GCTGTGGATTGGGAGAAATC(SEQ ID NO.1)；下游引物...
- 范红结胡雨婷李剑男肖宁周红蔺辉星
- 文献传递
- 油佐剂口蹄疫疫苗稀释猪瘟和猪伪狂犬病活疫苗混合免疫的效果评价被引量：1
- 2022年
- 为了明确猪场常用的油佐剂灭活疫苗与活疫苗混合后的免疫效果,本研究采用油佐剂猪口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗与猪瘟活疫苗、猪伪狂犬病活疫苗混合后免疫60日龄商品猪,比较上述疫苗混合免疫与单独免疫之间的差异;通过检测各组免疫前后的抗体水平变化、细胞因子水平变化,评估混合免疫效果。结果显示,无论是混合免疫组还是单独免疫组,在二次免疫后4周,口蹄疫病毒抗体水平100%达到>1∶128,混合免疫不影响口蹄疫疫苗的免疫效果;与单独免疫组相比,混合免疫组猪瘟病毒抗体水平无显著差异(P>0.05),而猪伪狂犬病病毒gB抗体水平极显著提升(P<0.01),表明油佐剂猪口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗混合猪伪狂犬病活疫苗免疫能有效提升猪伪狂犬病活疫苗的免疫效果。结果表明,采用油佐剂口蹄疫疫苗稀释猪瘟、猪伪狂犬病活疫苗进行混合免疫不影响口蹄疫疫苗、猪瘟活疫苗的免疫效果,但可以极显著(P<0.01)的提升猪伪狂犬病活疫苗的免疫效果。
- 季霖宋庆庆王凯佘志成徐希兰袁兵兵蔺辉星
- 关键词：活疫苗油佐剂混合免疫
- IreB磷酸化修饰调控SS2毒力的机制
- 猪链球菌2型(Streptococcus suisserotype 2,SS2)是一种重要的人兽共患病病原,引起人链球菌样中毒性休克综合征(Streptococcus Toxic Shock-Like Syndrome,...
- 唐金升蔺辉星马喆范红结
- 关键词：猪链球菌2型
- 制备大肠杆菌菌蜕的方法比较
- 2020年
- 为进一步研究大肠杆菌菌蜕的制备技术,以pBV221、pCold IV和pETDuet1载体为基础构建了表达噬菌体E基因的溶菌质粒,并利用pETDuet1的2个多克隆位点构建了同时表达E基因和金黄色葡萄球菌核酸酶A的双表达溶菌质粒。经检测,pBV221-E/DH5α组和pCold-E/BL21组的裂解效率最高,但pCold-E/BL21组的裂解起始时间晚于其他几组。诱导剂的浓度对pETDuet1-E-SNA/BL21(DE3)的裂解效率有较大影响。电泳结果显示,随着E基因的表达,细菌DNA逸出膜外,同时金黄色葡萄球菌核酸酶A将DNA降解为250 bp以下的小片段。除pBV221-E/BL21组外,β-丙内酯可实现对其他试验组菌蜕的完全灭活。电镜观察发现,几组菌蜕在结构上并无明显差别。与对照菌相比,菌蜕结构完整,电子密度低且不均匀,细胞膜有不同程度的皱缩。
- 袁橙郭长明左伟勇郝福星左沁丹蔺辉星
- 关键词：大肠杆菌E基因
- OppA对副猪格拉菌突破猪呼吸道上皮屏障的影响
- 2022年
- 为了探究寡肽结合蛋白OppA在副猪格拉菌(Glaesserella parasuis,GPS)突破猪呼吸道上皮屏障过程中的作用,采用自然转化法构建副猪格拉菌HPS5-SQ的oppA缺失株ΔoppA,并通过测定ΔoppA在不同培养基中的生长曲线、黏附猪气管上皮细胞(swine tracheal epithelial cells,STEC)、穿透猪呼吸道上皮屏障、损伤紧密连接蛋白等能力来判定OppA对GPS定殖和突破猪呼吸道上皮屏障的影响。结果显示:通过PCR和Western blot验证,试验成功构建了ΔoppA,表达的重组OppA具有结合血红素功能;ΔoppA和HPS5-SQ野生株在TSB培养基中生长速度相当,黏附STEC能力没有差异;在加入血红素DMEM中,野生株的生长速度比ΔoppA快,对猪呼吸道上皮屏障破坏和紧密连接蛋白损伤能力比ΔoppA强。结果表明:OppA摄取血红素促进GPS生长,进而加速猪呼吸道上皮屏障损伤。
- 刘明星张鹏云陈敏蔺辉星周红范红结
- 关键词：血红素紧密连接蛋白
- 032基因缺失猪痘病毒载体的构建及鉴定被引量：2
- 2016年
- 目的：构建毒力减弱的猪痘病毒载体。方法：以猪痘病毒野生毒株NT1501株为亲本毒株,通过同源重组方法,构建缺失032毒力基因的猪痘病毒SPV△032。检测SPV△032在不同种属来源细胞系中的培养滴度,并通过动物试验来检测其毒力。结果：猪痘病毒SPV△032株与野生NT1501株在PK15和ST等猪源细胞中的培养滴度差异不显著,均可达到5.0×106TCID50左右。猪痘病毒SPV△032株在Vero、MDBK等其他物种来源的细胞系中不能进行复制,连续传代2-3代以后,细胞培养物中检测不到猪痘病毒基因,与野生NT1501株培养结果一致。动物试验结果表明,用高浓度SPV△032接种实验猪,接种部位皮肤未出现任何症状,比野生NT1501株的毒力显著降低。接种SPV△032实验猪的细胞免疫和体液免疫反应水平均显著高于野生NT1501株（P〈0.05）。接种SPV△032的实验猪不会通过粪便等途径向环境中排毒。结论：本研究构建了032基因缺失猪痘病毒SPV△032,该病毒的毒力与野生NT1501株相比显著下降,可以作为弱毒猪痘病毒载体,用于兽用疫苗研发。
- 蔺辉星周红范红结
